Wheat straw was treated on laboratory scale with 4% urea at a moisture level of 50% along with different amount of HC1 to fix various levels of ammonia (30, 40, 50 and 60%) and stored for 4 weeks. Result, revealed a significant (p<0.01) increase in CP content of the samples where HC1 was added. The CP content of the straw was only 7.8%, which increased to 14.1, 16.0, 15.0 and 15.2% with the addition of acid. Similarly the concentrations of NDF, ADF and hemicellulose was significantly different due to HC1 addition. The level of HC1 recommended was to trap 30% ammonia as there was not significant difference in CP content of straw due to addition of 4 levels of acids. Results of in vivo experiment conducted on nine buffaloes divided randomly into three groups of three animals in each revealed no significant difference in the intake of DM, OM, NDF, ADF, cellulose and hemicellulose in group I (ammoniated straw), group II (HC1 treated ammoniated straw) and group III (HC1 treated ammoniated straw + 1 kg barley grain), but the intake of CP was significantly (p<0.01) more in group III as compared to other 2 groups. The digestibility of DM, OM and CP was significantly (p<0.01) more in groups where HCI treated straw was fed as compared to only ammoniated straw fed group, whereas there was no significant difference in the digestibility of NDF, ADF and cellulose in 3 groups. Intake was significantly higher of nitrogen (p<0.05), calcium (p<0.01) and phosphorus (p<0.01) in group III as compared to other two groups. Animals in all the 3 groups showed positive nitrogen, calcium and phosphorus balance, though the balances of all the 3 nutrients were significantly higher in group III as compared to other 2 groups. Rumen fermentation study conducted in 3 rumen fistulated buffaloes in $3{\times}3$ latin square design offering the same 3 diets as in group I to III revealed that rumen pH was alike statistically in 3 groups and at various time intervals. The mean ammonia-N concentration was significantly (p<0.01) more in group II and III as compared to group I. The mean TVFA concentration (mM/100 ml SRL) were 6.46, 7.84 and 8.47 in 3 groups respectively and different statistically (p<0.01). Results revealed no significant difference in the activities of carboxy methyl cellulase, urease or protease at both the time of sampling (0 h and 4 h) in all the 3 groups of animals.
O, Yeong-A;Kim, Gyeong-Cheol;Yu, Seung-Su;Jeong, Seon-Yong;Kim, Seong-Jun
한국생물공학회:학술대회논문집
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2002.04a
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pp.441-444
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2002
This study was targeted to develope a microbial consortium having high cellulase production. A filamentous fungus, strain FB01, isolated from a compost showed high ${\beta}-glucosidase$ activity especially. The strain FBOl was co-cultured with Trichoderma viride to enhance the productivity of ${\beta}-glucosidase$, changing inoculation time of one strain (FB01). The microbial consortium prepared showed the higher cellulytic enzyme production than T. viride well-known. The maximal enzyme production was obtained when the microbial consortium was cultured at $30^{\circ}C$ and pH 6.0 for 10days and the activities of CMCase, ${\beta}-glucosidase$, and avicelase were 2.0, 0.8, and 0.2 U/mL, respectively. These enzyme activities were 2, 4, and 2 times as high as those of CMCase, ${\beta}-glucosidase$, avicelase from T. viride, respectively, indicating that a synergistic interaction appeared between T viride and strain FB01. The serial subcultures by pH control increased ${\beta}-glucosidase$ production about 3.2 times. Also, enzyme production using rice-straw as a carbon source showed that the activities of CMCase, ${\beta}-glucosidase$, and avicelase were 3.69, 0.76, 0.17 U/mL, respectively, and ${\beta}-glucosidase$ activity was 1.5 times higher than that of T. viride. Consequently, microbial consortium showed the considerabely enhanced production of the cellullolytic enzymes, such as CMCase, ${\beta}-glucosidase$, and avicelase compared those of T. viride, and a favorable stability for the enzyme production even in the serial subcultures.
Because of high contents of cellulose (~37 wt%) and hemicellulose (~17%), rice straw seems to be a potential lignocellulosic biomass for production of bioethanol. In this study, Ammonia Recycled Percolation (ARP) pretreatment of rice straw was extensively investigated. In particular, the experimental study included the effects of temperature, reaction time and concentration of ammonia on compositions and enzymatic digestibility of the resulting solid residues; the ranges of pretreatment conditions were, in turn, $150{\sim}190^{\circ}C$, 10~90 min and 0~20 wt%. Through ARP pretreatment, the lignin content was reduced by as high as ~84% while 20~80% of the hemicellulose was also solubilized. The solid residue resulted from the pretreatment with 15 wt% aqueous ammonia solution at $170^{\circ}C$ for 90 mim showed as high as ~90% of digestibility with 15FPU/g of glucan enzyme loading. Supplement of xylanese to cellulase led to a notable enhancement of digestibility, indicating a discernable inhibitory role of hemicellulose. Simultaneous Saccharification and Fermentation (SSF) and Simultaneous Saccharification and Co-Fermentation (SSCF) were performed to obtain ethanol productions of 13.8 g/L (corresponding to 81% yield) and 15 g/L (corresponding to 89% yield), respectively.
This paper reports the production and characterization of crude xylanase from the newly isolated Humicola sp. Ly01. The highest (41.8 U/ml) production of the crude xylanase was obtained under the optimized conditions (w/v): 0.5% wheat bran, 0.2% $KH_2PO_4$, and 0.5% peptone; initial pH 7.0; incubation time 72 h; $30^{\circ}C$; and 150 rpm. A considerable amount of the crude xylanase was induced using hulless barley bran or soybean meal as the carbon source, but a small amount of the enzyme was produced when supplementary urea was used as the nitrogen source to wheat bran. The crude xylanase showed apparent optimal cellulase-free xylanase activity at $60^{\circ}C$ and pH 6.0, more than 71.8% of the maximum xylanase activity in 3.0-30.0% (v/v) ethanol and more than 82.3% of the initial xylanase activity after incubation in 3.0-30.0% (v/v) ethanol at $30^{\circ}C$ for 2 h. The crude xylanase was moderately resistant to both acid and neutral protease digestion, and released 7.9 and 10.9 ${\mu}mol/ml$ reducing sugar from xylan in the simulated gastric and intestinal fluids, respectively. The xylooligosaccharides were the main products of the hydrolysis of xylan by the crude xylanase. These properties suggested the potential of the crude enzyme for being applied in the animal feed industry, xylooligosaccharides production, and high-alcohol conditions such as ethanol production and brewing.
The purpose of this study was to investigate the fungal growth and enzyme production under different carbohydrate substrate conditions. The anaerobic fungus Neocallimastix sp. NLRI-3 isolated from the rumen of Korean native goat was incubated with different carbohydrate media containing 0.2% of glucose, starch, rice straw, filter paper, carboxymethyl cellulose(CMC), Sigmacell cellulose, xylan or xylose, respectively. The culture head gas production was the highest in the culture of filter paper medium, and the lowest in the culture of CMC medium at 96h incubation (P<0.05). The fungal zoospore production reached peak at 72h incubation, and its number was the highest in rice straw medium among the treatments (P<0.05). At 96h incubation, carboxymethyl cellulase(CMCase) activity was the highest in the culture of filter paper medium and the lowest in the culture of starch medium (P<0.05). While xylanase activity was the highest in the culture of rice straw medium and the lowest in the culture of xylose medium(P<0.05) at 72h incubation. There were no differences in culture supernatant protein expression among the treatments. However, the patterns of enzyme expression were different among the treatments with zymogram analysis. Six CMCases and 4 xylanase were detected from the results of zymogram analysis. Therefore the present study indicating that the fungal enzyme expression could be stimulated with insoluble substrates in the culture medium.
To search probiotic microorganisms, we isolated Lactobacillus sp. from kefir, The Lactobacillus sp. strain showed $99.5\%$ of identity to species Lactobacillus rhamnosus by API kit. Lactobacillus rhamnosus showed high resistances to acidic environment, which grew well even at pH 2.0 and $1.0\%$ bile salt Enzyme activity of Lactobacillus rhamnosus was higher in amylase ($0.673\;{\mu}mol/min/mg$) than that in xylanase ($0.288\;{\mu}mol/min/mg$), cellulase($0.117\;{\mu}mol/min/mg$) and phytase($0.269\;{\mu}mol/min/mg$). Especially, the Lactobacillus rhamnosus showed high heat stability which remained $1{\times}10^6\;CFU/ml$ at $60^{\circ}C$. The maximum numbers of Lactobacillus rhamnosus on growth owe was reached at 24 h fermentation and pH was decreased to 4.6. The resistances of Lactobacillus rhamnosus to acidic pH and bile salt were better than that of Lactobacillus acidophilus used as control. When Lactobacillus rhamnosus was cultured with E. coli in MRS broth, E. coli was disappeared after 18 h. These result suggest that the isolated Lactobacillus rhamnosus has a useful probiotics properties.
Activities of the extracellular enzyme from Fomitopsis palustris, a brown-rot fungi, and by which crystallinity changes of cellulose in the various softwoods, such as Larix leptolepsis, Finns rigida, Finns koraiensis and Finns densiflora by liquid culture, were investigated. Activity of Cellobiohydrolase (CBH) from F. palustris was detected in the every test softwoods culture, showing activities of the Endoglucanase (EG), $\beta$-glucosidase (BGL) and $\beta$-1,4-xylosidase (BXL). It was shown high enzyme activities in the sapwood culture than heartwood of the same wood species, However, the enzyme activities in most of test wood cultures increased with longer incubation time, indicating a possibility of intermix sapwood and heartwood for degradation process by enzyme. Also it was shown that protein patterns of the extracellular enzyme from F. palustris in wood particle substrate of the several domestic softwoods were similar with each other wood species, which suggested the possibility of mixing all softwoods in saccharification by enzyme from F. palustris. Crystallinity reduction value of cellulose by F. palustris was 4.2~20.4% in 4 weeks cultivation, 12.9~28.9% in 8 weeks.
The process of the preparation of branched-chain amino acid (BCAA)-enriched hydrolysates from corn gluten was optimized through the parameters of pre-treatment (heating and cellulosic hydrolysis), hydrolysis method (acid, protease, and microbe plus protease), concentration, and spray drying condition. The protein yield of corn gluten was increased by heating and cellulase treatments. Among three different hydrolysis methods, the combined use of microbes and protease was the most effective in terms of free amino acid (FAA) and BCAA content of the corn gluten hydrolysates. In addition, the FAA and BCAA content in the hydrolysates prepared by microbial and enzymatic combined treatment were improved by a concentration process. Spray drying conditions for the preparation of the powder from the hydrolyzed reactant were an inlet temperature of $185^{\circ}C$, outlet temperature of $80^{\circ}C$, and the use of maltodextrin as an anticaking agent. Thus, this study established an economical process for preparation of value-added hydrolysates of excellent productivity and quality, in terms of high BCAA content and product stability.
A filamentous fungus, strain FB01 showing high $\beta$-glucosidase activity was isolated from a compost. This fungus was cocultured with Trichoderma viride to enhance the productivity of $\beta$-glucosidase by changing inoculation time of the fungus. The microbial consortium showed higher cellulolytic enzyme production than T. viride alone. The maximal enzyme production was obtained when the microbial consortium was cultured at 30$\^{C}$ and pH 6.0 for 10 days with the activities of CMCase, $\beta$-glucosidase, and avicelase of 2.0, 0.8, and 0.2 U/mL, respectively. These enzyme activities were 2, 4, and 2 times as high as those of CMCase, p-glucosidase, avicelase from T. viride, respectively, indicating that a synergistic interaction appeared between T. viride and strain FBOI . The serial subcultures with pH control increased $\beta$-glucosidase production about 3.2 times. Enzyme production using ricestraw as a carbon source showed that the activities of CMCase, $\beta$-glucosidase, and avicelase were 3.69, 0.76, 0.17 U/mL, respectively, and $\beta$-glucosidase activity was 1.5 times higher than that of T viride.
This experiment was carried out to investigate the effects of red pepper powder on its enzyme production and growth of Aspergillus oryzae. In this report, Aspergillus oryzae A and G strains were cultured to the wheat bran and Czap다 Dox liquid media containing red pepper powder. And their enzyme activity. dry mycelial weight, pH and acidity were determined respectively. The results obtained were as follows. 1. In the case of protease reaction on the substrate without salt, the addition of red pepper powder ranging from 0.05 to 30 per cent to the wheat bran medium showed the increased neutral and alkali protease production in comparison with the control. However, the acid protease production were decreased by the addition of red pepper powder in the case of Aspergillus oryzae G strain. 2. In the case of protease reaction on the substrate with 10 per cent of salt, wheat bran medium containing 0.05 to 10per cent of red pepper powder showed the high protease production in comparison with the control. 5. As the amount of red pepper added to the Czapek-Dox lipuid culture was increased, the dry mycelial weight produced by Aspergillus oryzae A and G strains were also increased. And the dry mycelial weight produced by Aspergillus oryzae A strain was much more than that of Aspergillus oryzae G strain. 6. The addition of red pepper powder brought the fall of pH in Czapek-Dox liquid medium. 7. By the increase of red pepper powder concentration, the acidity in Czapek-Dox liquid culture were increased. And the increase ratio in the case of Aspergillus oryzae G strain was more remarkable than that of Aspergillus oryzae A strain.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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