• 제목/요약/키워드: cell suspension

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Elicitor-induced accumulation of stilbenes in cell suspension cultures of Cayratia trifolia (L.) Domin

  • Roat, Chetana;Ramawat, K.G.
    • Plant Biotechnology Reports
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    • 제3권2호
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    • pp.135-138
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    • 2009
  • Cell cultures of Cayratia trifolia (Vitaceae), a tropical lianas, were maintained in Murashige and Skoog's medium containing $0.25mg\;1^{-1}$ NAA, $0.2mg\;1^{-1}$ kinetin and casein hydrolysate $250mg\;1^{-1}$. Cell suspension cultures of C. trifolia accumulate stilbenes (piceid, resveratrol, viniferin, ampelopsin), which on elicitation by any of $500{\mu}M$ salicylic acid, $100{\mu}M$ methyl jasmonate, $500{\mu}M$ ethrel and $500mg\;1^{-1}$ yeast extract, added on the 7th day, were enhanced by 3- to 6-fold ($5-11mg\;1^{-1}$) by the 15th day.

세포의 개별 공급을 위한 체크 밸브의 설계 (DESIGN OF A CHECK VALVE FOR FEEDING BIOLOGICAL CELLS ONE BY ONE)

  • 최정훈;이상욱;김용권
    • 대한전기학회:학술대회논문집
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    • 대한전기학회 1994년도 하계학술대회 논문집 A
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    • pp.85-87
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    • 1994
  • Feeding biological cells one by one is the key point in the manipulation of cells. The conventional valve systems have many difficulties in feeding cells one by one, because they shut the whole flow of fluids when they are closed and have possibilities of breaking the fragile cells. They need some other equipments for continuous supply of suspension and to protect the cells. We design a check valve for feeding biological cells one by one using polyimide all the silicon substrate. The cells are fed by hydraulic pressure through the isotropically etched cavity. When the suspension flows continuously along the channel the valve is bent by hydraulic pressure and a cell is fed to the outlet. We have studied a cell fusion device fabricated with polyimide and electroplating. If the designed check valve is located in front of the cell fusion device it is helpful to fuse two different kinds of cells.

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Thalicrtrum rugosum 세포배양에 의한 berberine 생산에 미치는 여러 가지 elicitor의 영향 (Effects of Various Elicitors on the Production of Berberine in Plant Cell Suspension Cultures of Thalicrtrum rugosum)

  • 윤정환;박인석김동일
    • KSBB Journal
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    • 제8권4호
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    • pp.390-396
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    • 1993
  • Thalicrtrum rugosum 식물세포 현탁배양에 의한 berberine 생산에 미치는 여러 가지 종류의 elicitor들의 영향에 관해 연구 하였다. 효모 유래의 elicitor, 15가지의 서로 다른 종류의 무생물 종류 elicitor, 3가지 곰팡이로부터 얻은 elicitor 들을 처리하여 세포의 생장 및 berberine 생산에 미치는 영향을 비교 분석해 본 결과, 이들 elicitor들은 T. rugosum에 의한 berberine 생산을 크게 증대시키지 못함을 확인하였다.

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난과식물의 형질전환 유도 및 다량증식에 관한 연구. III. Electroporation에 의해서 자란의 원형질체로 도입된 유전자의 발현 (Studies on the Induction of Transformation and Multiplication in Orchid Plants.(III) Expression of Gene Transferred into Orchid Protoplasts by Electroporation)

  • 이정석;황성진김영준황백
    • KSBB Journal
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    • 제6권4호
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    • pp.385-388
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    • 1991
  • 자란(B. striata)의 미성숙종자로 부터 유도한 embryogenic callus를 현탁배양하고 이와같은 embryogenic cell suspensions로부터 분리한 원형질체에 electroporation 방법을 사용하여 reporter genes이 들어있는 pBI121 plasmid DNA 를 도입하고 그 발현을 확인하였다. 배양된 세포에 있어서 GUS의 활성은 plasmid DNA양의 증가와 함께 높게 나타났으며, 200-300 voltage/1180 uF에서 GUS의 활성 및 원형질체의 생존율(viability)이 가장 좋았다.

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벼 진탕 배 배양세포로부터 원형질체 분리 및 배양 (Isolation and Culture of Protoplasts Derived from Embryogenic Cell Suspension Culture of Oryza sativa (Rice))

  • 황백;김미경
    • Journal of Plant Biology
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    • 제31권1호
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    • pp.41-49
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    • 1988
  • Several cultivars of rice were examined for induction of embryogenic callus on a medium containing MS salts, vitamins and 2, 4-D under darkness. Embryogenic callus was obtained from cultivar Cheonma with high ratio and embryo-like structures were formed from the callus on a medium with or without reduced 2, 4-D. Somatic embryoids with a plumule and radicle axis surrounded by a scutellum were observed. These embryoids germinated and produced plantlets in 30 days on the same medium. Protoplasts isolated from an embryogenic cell suspension culture derived from embryogenic callus were cultured either in liquid or in agar medium and protoplast derived cell colonies were obtained in 3-4 weeks.

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Long-Term Starvation Induces the Viable-but-Nonculturable Condition in Lactobacillus crispatus KLB46

  • 이석용;김주현;장정은;김승철;윤현식;소재성
    • 한국생물공학회:학술대회논문집
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    • 한국생물공학회 2001년도 추계학술발표대회
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    • pp.918-922
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    • 2001
  • In a previous study, we have isolated a number of lactobacilli from Korean women, and one of them (KLB46) was identified as Lactobacillus crispatus by 16S rRNA gene sequencing. For the ecological treatment of bacterial vaginosis (BV) cell suspension of L. crispatus KLB46 was instillated into BV patients. L. crispatus KLB46 was found to persist for several days in cell suspension with no nutrients. In this study, in order to assess the influence of starvation on physiological activity, we compared the viability and culturability of KLB46 following suspension in various buffer solutions. A pair of in situ fluorescent dye was used to assess viability (i.e. membrane integrity) and the culturability was examined by plate count assay. A rapid epifluorescence staining method using the LIVE/DEAD Bacterial Viability Kit $(BacLight^{TM})$ was applied to estimate both viable and total counts of bacteria in cell suspension. $BacLight^{TM}$ is composed of two nucleic acid-binding stains ($SYTO\;9^{TM}$ and propidium iodide). $SYTO\;9^{TM}$ penetrates all bacterial membranes and stains the cells green while propidium iodide only penetrates cells with damaged membranes, therefore the combination of the two stains produces red fluorescing cells. Optimal staining conditions for $BacLight^{TM}$ were found to be with 0.0835M $SYTO\;9^{TM}$ and 0.05M propidium iodide for 15 min incubation at room temperature in dark. When cells were microscopically examined during 140 hours of starvation, the culturability decreased markedly while the viability remained relatively constant, which suggests that large fraction of KLB46 cells became viable but non-culturable (VBNC) upon starvation.

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참당귀 현탁세포배양에 의한 면역증강성 다당 생산 (Production of Immunostimulating Polysaccharide in Angelica gigas Nakai SusDension Cell Cultures)

  • 김영화;김익환;김동일
    • KSBB Journal
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    • 제21권5호
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    • pp.331-335
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    • 2006
  • 참당귀(Angelica gigas Nakai) 현탁세포의 면역 증강성 다당의 생산을 증진시키기 위하여 초기 당농도와 생장조절제인 2,4-D의 농도를 변화시켰다. 당의 농도를 높일수록 세포의 생장과 ECP의 생산은 각각 1.6배, 1.1배 증가하여 효과적이었다. 2,4-D는 첨가하지 않은 것이 세포의 생장이 대조군에 비해 1.2배 높았지만, ECP의 생산의 경우 2mg/L 2,4-D를 첨가한 경우 대조군에 비해 10% 이상 더 생산되었다. 또한 배양 중 여러 가지의 elicitor를 첨가함으로써 ECP의 생산을 증진시키기 위하여 fungal elicitor들을 처리한 결과 Verticillium dahliae 90 mg/L을 배양 4일째에 처리한 경우 세포의 생장을 다소 저해시킨 반면, ECP 생산량이 1.7배나 증가함을 확인하였다.

참돌꽃에서 Salidroside의 동정 및 현탁세포배양을 통한 분리 (Identification of Salidroside from Rhodiola sachalinensis A. Bor. and its Production through Cell Suspension Culture)

  • 김수정;김광수;황성진;천상욱;김영호;안준철;황백
    • 한국약용작물학회지
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    • 제12권3호
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    • pp.203-208
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    • 2004
  • 참돌꽃의 캘러스는 0.5 mg/l NAA와 1 mg/l BA가 조합 첨가된 1/2MS 배지에서 유도하였으며, 현탁세포배양은 0.5 mg/l NAA와 1 mg/l BA가 조합 첨가된 2B5 배지에서 확립되었다. 한편, 참돌꽃 뿌리로부터 반복된 silicagel colum chromatography와 분취 HPLC를 통하여 순수한 salidroside 결정을 얻었으며, 얻어진 결정체는 $^1H-NMR,\;^{13}C-NMR$$^1H-^1H$ COSY 등의 분광학적 분석으로 구조를 동정 확인하였다. 확립된 세포배양계에서 salidroside 함량은 원뿌리 0.17%에 비교하여 광배양(0.12%) 암배양 (0.286%) 및 sucrose 5%에서 함량이 0.41% 까지의 함량변화를 나타내었다.

애기장대(Arabidopsis thaliana) 현탁배양세포의 원형질체로부터 식물체 재분화 (Plant Regeneration from Protoplasts of Suspension Cultured Cells in Arabidopsis thaliana)

  • 김명덕;김준철;진창덕;임창진;한태진
    • 식물조직배양학회지
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    • 제27권2호
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    • pp.125-131
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    • 2000
  • 원형질체는 현탁배양된 세포괴로부터 1% cellulase R-10, 0.25% pectolyase Y-23, 그리고 0.5% driselase가 포함된 CPD 효소용액에서 4시간의 진탕 (40 rpm)조건에서 쉽게 분리되었다. 분리된 원형질체는 1 mg/L 2,4-D, 0.5 mg/L kinetin , 200 rng/L spermidine 그리고 68 g/L glucose가 포함된 KM 액체배지에서 배양되었으며, 또한 현탁배양중인 동종의 feeder cell이 있는 CP배지 위에 액체배양배지를 1 mL균일하게 퍼트린 후,$25^{\circ}C$, 암조건으로 4주간 양육배양하였다. 원형질체 유래 SF 캘러스는 0.05 mg/L IAA, 7 mg/L 2lip와 30mg/L sucrose가 첨가된 MS 재분화 배지에서 광조건으로 4주동안 배양되었을 때, 60% 이상의 shoot를 형성하였다. 이후, 식물의생장조절물질이 첨가되지 않은 MS 배지로 옮겨 뿌리를 유도하였으며, 재분화된 식물체는 토양으로 옮겨 배양 8주후에 종자를 형성하였다.

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한국들잔디 배아세포의 부유배양과 식물체 재생 (Embryogenic cell suspension culture and plant regeneration in zoysiagrass (Zoysia japonica Steud))

  • 팽왼주안;한리바우;퀴충휘;리다이엥;박태윤
    • 아시안잔디학회지
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    • 제23권2호
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    • pp.345-352
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    • 2009
  • 한국들잔디는 운동경기장이나 골프 코스 등에 폭넓게 쓰이는 난지형 잔디이다. 많은 품종은 영양체로 번식한다. 이 연구는 배아세포 유도와 식물체 재생을 위한 적정 배양액 개발과 배양조건을 연구하여, 한국잔디의 육종과 번식을 위한 세포배양 체계 확보를 목적으로 하였다. 그 결과 $Cu^{++}\;2.5mgL^{-1}$를 유도 배양액에 첨가하는 것이 캘러스 유도를 위한 최적 농도 조건 이였음을 보여주었다. Sub-culture의 횟수의 증가는 캘러스의 질을 향상시켰다. 세포 부유배양을 위한 최적 용량은 2.5에서 10mL 사이였으며 본 연구에서 58%의 식물체 재생산비율을 보였다.