Hybridoma 세포의 세포 성장 속도, monoclo nal antibody의 생산성 및 세포 대사에 미치는 glucose의 영향이 조사되었다. IgG2,를 생산하는 m mouse-mouse hybridona VIII H-8 세포가 모델로 이용되었다. Glucose 농도에 따른 바성장속도의 변화는 기질저해형식 (substrate inhibition type) 의 성장모델로 나타낼 수 있었다. 초기 glucose 농도 4g/f까지는 최대 세포밀도의 증가를 보여 주었다. Glucose는 세포사망속도에 큰 영향을 나타내었고 glucose 농도와 비사망속도 간에는 반비례의 관계가 성립됨을 보였다. Glucose 농도가 증가될수록 세포의 생존율과 monoclonal an tibody의 생산이 증가되었다. Glucose 놓도가 증가될수록 glucose의 비소비속도가 증가되 었고, 초기 glucose 농도의 증가는 lactate의 총괄 비 생산속도의 증대를 가져왔다. 암모늄 이온의 총괄비 생산속도는 초기 Glucose의 농도에 의존하 였지만 암모늄 이온의 전반적인 생성속도는 초기 glucose 농도에 거 의 무관함을 보여 주었다.
The growth kinetics of Streptomyces noursei NRRL 5126 was investigated under different aeration and agitation combinations in a 5.0 l stirred tank fermenter. Poly-${\varepsilon}$-lysine biosynthesis, cell mass formation, and glycerol utilization rates were affected markedly by both aeration and agitation. An agitation speed of 300 rpm and aeration rate at 2.0 vvm supported better yields of 1,622.81 mg/l with highest specific productivity of 15 mg/l.h. Fermentation kinetics performed under different aeration and agitation conditions showed poly- ${\varepsilon}$-lysine fermentation to be a growth-associated production. A constant DO at 40% in the growth phase and 20% in the production phase increased the poly-${\varepsilon}$-lysine yield as well as cell mass to their maximum values of 1,992.35 mg/l and 20.73 g/l, respectively. The oxygen transfer rate (OTR), oxygen utilization rate (OUR), and specific oxygen uptake rates ($qO_2$) in the fermentation broth increased in the growth phase and remained unchanged in the stationary phase.
This study was conducted to assess the growth characteristics of phytoplankton and to understand seasonal dynamics of phytoplankton in response to limiting nutrients in an agricultural reservoir from November 2002 to December 2003. Marked increase of chl.a concentration observed in July ($99.0{\mu}g/L$) and November ($109.7{\mu}g/L$) after heavy rainfall. TP concentration ranged $48.0{\sim}126.6{\mu}g/L$, and its the temporal variation was similar to that of chl.a concentration. Microcystis spp., dominant phytoplankton species were used for the growth kinetics experiment, except for the season when Aulacoseira spp. (March, April) and Aphanocapsa sp. (May) dominated. In the temperature range between $10{\sim}25^{\circ}C$, the rate of growth increase per $10^{\circ}C$ was almost two folds. The highest maximum growth rate (${\mu}_{max}=1.09day^{-1}$) of phytoplankton observed September, and ${\mu}_{max}$ was lowest ($0.34day^{-1}$) in March when Aulacoseira spp. dominated. The ${\mu}_{max}$ ($0.78{\pm}0.20day^{-1}$) was relatively high in the summer season when water temperature is above $20^{\circ}C$ and cyanobacteria dominated compared to the spring when diatoms dominated ($0.43{\pm}0.08day^{-1}$). The maximum growth rate ($0.55{\pm}0.12day^{-1}$) and the half saturation concentration ($K_s=0.73{\pm}0.15{\mu}M$) of cyanobacteria during winter season (November, December) was higher than those of diatoms. However, the ${\mu}_{max}$ and $K_s$ of cyanobacteria in December was similar to those of diatom, reflecting that diatom cell quota (Mean 48.4 pgP/cell) was greater than cyanobacteria (34.0 pgP/cell) during this time.
The present study was carried out to investigate the effects of co-culture cells and growth factors on in vitro culture of Korean native cattle(KNC) embryos fertilized in vitro. Two-eight cell embryos were cultured in vitro using 4 types of co-culture cells and 3 growth factors singly or in combination. The results were as follows, In the co-culture of 2~8 cell embryos with bovine oviductal epithelial cell(BOEC), granulosa cell(BGC), uterine epithelial cell(BUEC) and mouse embryonic fibroblast (MEF) monolayers, the developing rate to blastocysts was significantly(P<0.05) higher with BUEC(32.1%) than with MEF(15.3%), BGC(13.2%) and non co-culture control(11.6%). When the morula co-cultured with BOEC for 5 days following in vitro fertilization were co-cultured with BOEC continuously or with BUEC, respectively, the developing rate to blastocysts was higher with BUEC(73.9%) than with BOEC(56.0%). To examine the effects of growth factors on in vitro development of 2~8 cell embryos, epidermal growth factor(EGF), transforming growth factor-$\beta$l(TGF-$\beta$l) and insulin-like growth factor-1(IGF-1) were added singly or in combination to TCM 199 maturation medium with respective concentration. In a addition of each 10, 30 and SOng /rnl EGF, the developing rate to blastocysts was the highest in lOng /ml EGF(25.3%). In addition of each 1, 2 and Sng /mi TGF-$\beta$1, the developing rate to blastocysts was the highest in lng /ml TGF-$\beta$1(28.8%). In addition of each 50, 100ng/ml JGF-l, the developing rate to blastocysts was higher in 100ng/ml IGF-l(16.5%) than in SOng/mi IGF-1(12.9%). When lOng /ml EGF and lng /ml TGF-$\beta$l was added singly or in combination, the developing rate to blastocysts was similar in groups added singly or in combination with EGF and TGF-$\beta$l (23.l~24.6%), although higher than in control(16.7%). In the co-culture of 2~8 cell embryos Wth BOEC + each 10, 30 and 5Ong /rnl EGF, the developing rate to blastocysts was significantly(p<0.05) higher in BOEC + long /ml EGF(32.3%) than in BOEC + 3Ong /ml EGF(18.9%) and BOEC + song /ml EGF(9.7%). In the co-culture of 2~8 cell embryos with BOEC + each 1, 2, Sng /ml TGF-$\beta$l the developing rate to blastocysts was higher in BOEC + Sng/rnl TGF-$\beta$l(28.2%) than in BOEC + lng /ml TGF-$\beta$l(21.7%) and BOEC + 2ng/ml TGF-$\beta$l(21.4%). In summary, higher developing rate to blastocysts were obtained with co-culture of BUEC for co-culture system, with addition of lOng /ml EGF or lng /ml TGF-$\beta$l for growth factor culture system, and with co-culture of BOEC + lOng /ml EGF or BOEC + Sng /ml TGF-$\beta$l for co-culture + growth factor culture system.
본 연구는 국소온열요법(Local Hyperthermia)에 사용되는 발열체(Thermo-rod)의 온도에 따른 세포성장률의 변화를 관찰하고자 한다. 연구에 사용된 발열체는 듀플렉스 스테인리스 강(Duplex Stainless Steel)을 이용하여 개발되었다. 세포성장률을 관찰하기 위하여 CPAE세포와 Osteoblast세포를 이용하였다. 각각의 세포를 well에 분주 후 3일, 6일, 9일, 12일, 15일 동안 배양만 한 군을 대조군으로 하고 well에 발열체를 식립 후 세포를 분주하여 3일 간격(3일, 6일, 9일, 12일, 15일)으로 하루 30분 유도가열을 실시하여 15일 간 배양한 군을 시험군으로 하였다. CPAE세포와 Osteoblast세포의 성장률을 관찰한 결과 두세포 모두 3일의 대조군과 시험군 모두 세포 성장률이 급격히 상승하다 6일의 대조군과 시험군 모두 급격히 감소하고 9일과 12일 그리고 15일의 대조군과 시험군의 성장률은 불규칙하게 감소하였다. 이러한 성장률 관찰 결과 두종의 세포 모두 약 $41^{\circ}C$의 온도를 가한 시험군과 온도를 가하지 않은 대조군의 차이가 없다. 따라서 CPAE세포와 Osteoblast세포는 발열체에 의한 온도(약 $41^{\circ}C$)에 영향이 없는 것으로 판단된다.
Park, Young-Goo;Kim, Su-Jung;Kang, Young-Min;Jung, Hee-Young;D. Theertha Prasad;Kim, Sun-Won;Chung, Young-Gwan;Park, Myung-Suk
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제9권1호
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pp.41-46
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2004
The influence of various culture conditions on growth and ginkgolides (GKA and GKB), and bilobalide formation in callus and suspension cultures of Ginkgo biloba were investigated. Callus induced from the leaf petioles exhibited distinct morphological and physiological responses. The cell biomass and ginkgolides content varied among the cell lines; brownish callus lines produced high levels of ginkgolides and bilobalide in spite of poor cell growth. Among the culture media used, MS medium showed significant effect on cell growth and ginkgolides production. Low concentration of sucrose (3%) improved cell growth, while higher sucrose levels (5 and 7%) improved ginkgolides production. Cultivation of callus cultures above 28$^{\circ}C$ dramatically reduced their growth rate; however the cell lines grown at 36$^{\circ}C$ showed increased levels of bilobalide content. A 2.5-L balloon type bubble bioreactor (BTBB) was successfully developed for the cell growth and ginkgolides production.
Two low-salt complex media, bactopeptone and desalted yeast extract, were used for high density cultivation of the hyperthermophilic archaeon Sulfolobus solfataricus (DSM 1617). Bactopeptone, which has low mineral ion content among various complex media, was good for cell growth in batch cultures; the maximal cell density in bactopeptone was comparable to that in yeast extract. However, cell growth was rather poor when bactopeptone was added by the fed-batch procedure. Since several vitamins are deficient in abctopeptone, the effect of vitamins on cell growth was examined. Among the vitamins tested, pyridoxine was found to improve the growth rate of S. solfataricus. To reduce the growth inhibition caused by mineral ions, yeast extract was dialyzed against distilled water and then fed-batch cultures were carried out using a fed medium containing desalted yeast extract. Although the concentrations of mineral ions in yeast extract were significantly lowered by the dialysis whether low molecular weight solutes in yest extract are crucial for cell growth, we investigated the effect of trehalose, a most abundant compatible solute in yeast extract, on the growth pattern. Cell densities were increased and the length of the lag phase was markedly shortened by the presence of trehalose, indicating that trehalose plays an important role in the growth of S. solfataricus.
The aim of this paper was to study the effect of spent medium recycle on Spodoptera exigua Se301 cell line proliferation, metabolism, and baculovirus production when grown in batch suspension cultures in Ex-Cell 420 serum-free medium. The results showed that the recycle of 20% of spent medium from a culture in mid-exponential growth phase improved growth relative to a control culture grown in fresh medium. Although both glucose and glutamine were still present at the end of the growth phase, glutamate was always completely exhausted. The pattern of the specific glucose and lactate consumption and production rates, as well as the specific glutamine and glutamate consumption rates, suggests a metabolic shift at spent medium recycle values of over 60%, with a decrease in the efficiency of glucose utilization and an increase in glutamate consumption to fuel energy metabolism. Baculovirus infection provoked a change in the metabolic pattern of Se301 cells, although a beneficial effect of spent medium recycle was also observed. Both growth rate and maximum viable cell density decreased relative to uninfected cultures. The efficiency of glucose utilization was dramatically reduced in those cultures containing the lowest percentages of spent medium, whereas glutamine and glutamate consumption was modulated, thereby suggesting that infected cells were devoted to virus replication, retaining their ability to incorporate the nutrients required to support viral replication. Recycle of 20% of spent medium increased baculovirus production by around 90%, thus showing the link between cell growth and baculovirus production.
Pseudomonas stutzeri strain KCCM 34719 was used in this experiment to determine the effects of increasing Pb(II) concentrations on its growth rate. To obtain optimum growth conditions, strain KCCM 34719 was cultivated in nutrient broth under various conditions, such as temperature, pH, and NaCl concentration. Optimal conditions for cell growth were $30^{\circ}C$ of temperature, 8.0 of pH, and 3% of NaCl concentration, respectively. Growth response of bacterial cell to Pb(II) showed tolerance to concentrations ranging from 10 to 100 mg ${\ell}^{-1}$ in liquid culture, following a growth pattern similar to the control. Growth rate was greatly inhibited at 200 mg ${\ell}^{-1}$ of Pb(II).
해양 미세조류인 Isochrysis galbana Parke의 성장에 미치는 여러 환경요인과 배지요인의 영향을 조사하고 최적 배양조건을 구하였다. 그 결과를 요약하 면 다음과 같다. 1. 인공바닷물은 자연바닷물보다 다소 낮은 비성 장속도와 최종 균체농도를 나타내었다. 2.. 자연바닷물이 기초배지로 사용되었을 때 2mM 이상의 충분한 질산염 농도가 필요하였다. 그러나 미량원소와 비타민의 영향은 관찰되지 않았다. 3. 완충용액요로 Tris를 첨가한 경우 pH는 일정 하게 유지가 가능하나 비성장속도와 최종 균체농도 가 감소하였다. 4. 최적 초기 pH와 온도는 각각 pH 8, $20^{\circ}C$ 였다. 5. 벚세기를 400-21001ux의 범위에셔 변화시켰을 때 비성장속도는 18501ux까지 증가하였고 그 이 후로는 일정하였다. 6. 10mL에서 70mL로 Working volume을 증가 시켰을 때 초기 성장속도는 비슷하였으나 최종 균체 농도가 감소하는 경향을 보였다. 7. Working volume이 30mL일 때 최적 교반속 도는 100rpm정도이고, 더 높은 교반속도에서는 최 종 균체농도의 감소가 관찰되었다. 8. 플라스크배양의 최적조건에서 최대 비성장속도 와 최종 균체농도는 각각 $O.021hr^{-1}$과 1.1g/L로 얻어졌다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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