• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제13권1호
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• pp.77-84
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• 2003

Chitinase was purified from an antagonistic bacterium Bacillus sp. 7079 by ammonium sulfate precipitation, QAE-Sephadex anion exchange chromatography, Sephadex G-100 gel filtration, and SP-Sephadex cation exchange chromatography. The molecula. weight of purified chitinase (PC-1) was approximately 66.5 kDa on SDS-PACE. PC-1 exhibited optimum pH and temperature of pH 7.5 and $45^{\circ}C$, respectively. More than $80\%$ of PC-1 was stable at pH 5.0 to 9.0, and more than $90\%$ at $40^{\circ}C$. $Fe^2+\;and\;Ca^2+$ inhibited the chitinase activity about $20\%$, and EDTA and p-CMB by about $30\%$, whereas $Ag^+$ inhibited the activity up to $65\%$. The $K_m$ value of PC-1 was 1.215 mg/ml with colloidal chitin as a substrate. We also investigated the effect of PC-1 treated chitin (PCTC) on the pro-inflammatory cytokine gene expression in macrophage RAW 264.7 cells. The expression of IL-$1{\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ mRNA gene was investigated using reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR). IL-$1{\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ mRNA were induced by the treatment of PCTC and chitin only in RAW 264.7 cells. These expressions were induced as early as 2 h and sustained up to 24 h in RAW 264.7 cells. IL-$1{\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ mRNA were more strongly expressed by the treatment of PCTC than chitin treatment alone in RAW 264.7 cells.

• KSBB Journal
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• 제16권6호
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• pp.533-537
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• 2001

유청 단백질 중에서 $\alpha$-lactalbumin, $\beta$-lactoglobulin를 고성능 막 크로마코그래피를 이용하여 분리하는 것이다. 분리 메카니즘은 음이온 교환작용이며 고정상은 CIM DEAE, QA, So$_3$ disk (16$\times$3 mm)을 사용하였다. 이동상은 buffer A (20 mM Tris-HCI, pH 7.3)와 buffer B (buffer A + 1 M NaCl)를 사용하였으며 $\alpha$-lactalbumin, $\beta$-lactoglobulin를 분리하기 위해서 구배용매 조성법을 사용하였다. 각 이동상의 조성에 따른 최적의 이동상 조성(Buffer A/Buffer B=100/0 - 30/70 vol%, gradient time 1 min, 30/70 - 10/90 vol%, gradient time 2 min)을 실험적으로 얻었고 4 ml/min의 이동상 유속에서 3분내에 $\alpha$-lactalbumin, $\beta$-lactoglobulin를 분리 할 수 있었다. 유청 단백질 중에 $\alpha$-lactalbumin, $\beta$-lactoglobulin을 HPMC을 적용하여 분리하였고, 유청 단백질의 기능적 성질, 분리 방법에 대해 알아보았다.

• 대한화학회지
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• 제38권9호
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• pp.660-666
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• 1994

이웃하는 란탄족 원소의 분리에서 온도와 흐름속도의 영향을 치환크로마토그래피로 연구하였다. 일렬로 연결된 두 컬럼에 Amberlite 120 양이온 교환수지를 채워서 충전용과 분리용으로 나누어 사용하였다. 보유이온은 $H^+$을, 흐름용액은 0.012M과 0.015M의 EDTA 용액을 사용하였다. 실험중에는 관의 온도를 90$^{\circ}C$로 유지하였으며 이온교환수지 관 속에 생기는 기포를 줄이기 위해 일정한 압력을 걸었다. 용출액은 ICP-AES로 직접 분석하였다. 이 실험에서 란탄족 원소쌍 La: Ce, Ce :Pr, Pr: Nd에 대한 분리인자는 각각 4.6, 2.8, 1.9이었으며 이것은 25$^{\circ}C$에서 이론적으로 얻은 것보다 큰 값이다. 흐름속도를 2.5 ml/min에서 1.5 ml/min로 줄이면 이론단해당높이(HETP)도 1.60 cm에서 0.88 cm로 줄었다. 따라서 용리액의 흐름속도를 줄이고 온도를 높이므로써 분리효율을 증가시킬 수 있었다. 이 실험에서 99.9% 이상의 순수 란탄족 원소에 대한 회수율은 49∼77%이었다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제10권2호
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• pp.77-83
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• 1971

증량제의 특성 중 Sumithion 분제의 주성분 분해에 영향을 미치는 요인을 밝힐 목적으로 시험하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 가. 증량제의 특성 중 수분함량, 흡습성, C.E.C. 활성천, 염기총량, 표면적 등이 Sumithion 분제의 주성분 분해에 영향을 미치는 요인이 됨을 알았고, 나. 증량제에 의한 Sumithion의 분해산물은 Dimethyl phosphorothionate와 3-methyl-4-nirophenol 및 이의 유연화함은, n-hexane, ethyl ether 불용, methyl alcohol, ethyl, alcohol가용의 화함물이 있음을 알았다. 다. 증량제의 종류별로는 벤토나이트, 규조로, 카올린, 활석의 순으로 분해율이 높았다. 라. 그리고 증랑제의 Sumithion 분제 주성분 변화에 영향을 미치는 특성 중 수분과 염기가 가장 대표적인 주성분 분해 요인으로 보인다.

• 한국식품과학회지
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• 제12권4호
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• pp.305-312
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• 1980

우리나라에서 처음 재배(栽培)를 시작한 elderberry anthocyanin의 화학구조(化學構造)를 동정하고 함량(含量)을 측정(測定)하였다. Elderberry열매에서 1% HCl MeOH로 추출(抽出)하여 얻은 색소농축액(色素濃縮液)을 Amberlite IRC-50 양(陽)이온교환수지관을 통과시켜 정제(精製)하고 paper chromatography로 개별색소(個別色素)를 분리(分離)하였다. 각(各) 개별색소(個別色素)에 대해 부분산가수분해(部分酸加水分解), acyl group, 결합당(結合糖), aglycone의 확인(確認), paper chromatography로 얻은 $R_f$값, spectral data 등을 기초로 구조를 확인(確認)하였다. 확인(確認)된 elderberry중(中)의 5가지 색소(色素)는 cyanidin-3-glucoside, cyanidin-3,5-diglucoside, cyanidin-3,5-diglucoside with p-coumaric arid, cyanidin-3-xyloglucoside-5-glucoside, cyanidin-3-xyloglucoside-5-glucoside with p-coumaric acid이었다. 총 anthocyanin양은 elderberry 1g당 3.13mg이고 개별색소(個別色素)의 비(比)는 cyanidin-3-glucoside 4.3%, cyanidin-3,5-diglucoside 28.3%, cyanidin-3,5-diglucoside with p-coumaric arid 12.9%, cyanidin-3-xyloglucoside-5-glucoside 38.3%, cyanidin-3-xyloglucoside-5-glucoside with p-coumaric acid가 16.2%이었다.

• Mass Spectrometry Letters
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• 제9권1호
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• pp.30-36
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• 2018

A quantitation method for free amino acids in human serum was developed using a stepwise-dilution method and a bimodal cation exchange (CEX)/hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC)-tandem mass spectrometry system equipped with an electrospray ionization source (ESI/MS/MS). This method, which was validated using quality control samples, was optimized for enhanced selectivity and sensitivity. Dithiothreitol (DTT) was used as a reducing agent to prevent the oxidation of a serum sample ($50{\mu}L$), which was then subjected to stepwise dilution using 3, 30, and 90 volumes of acetonitrile containing 0.1% formic acid. Chromatographic separation was performed on an Imtakt Intrada Amino Acid column ($50mm{\times}3mm$, $3{\mu}m$) in mixed mode packed with CEX and HILIC ligands embedded in the stationary phase. Underivatized free amino acids were eluted and separated within 10 min. As a result of the validation, the precision and accuracy for the inter- and intraday assays were determined as 2.11-11.51% and 92.82-109.40%, respectively. The lowest limit of quantification (LLOQ) was $0.5-4.0{\mu}g/mL$ and the matrix effect was 80.22-115.93%. The proposed method was successfully applied to the quantitative analysis of free amino acids in human serum.

• 분석과학
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• 제14권4호
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• pp.291-299
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• 2001

사용후핵연료내 핵분열생성물중 Sm 동위원소 정량을 위한 분리 및 정제에 관한 연구를 수행하였다. 일차적으로 핵분열생성물 대신 여러 비방사성 금속이온(Cs, Ba, Gd, Eu, Sm 및 Nd)들로 구성된 모의용액을 시료로 사용하였다. Sm은 AG $1{\times}8$ 음이온교환수지관에서 1 M $HNO_3$/90% MeOH 용액으로 세척 후 0.5 M $HNO_3$/80% MeOH 용액으로 용리하였다. 용출액에 함유되어 있는 미량의 Ba을 제거하기 위하여 0.2 M alpha-hydroxyisobutyric acid 용액(pH 4.5-4.6)으로 전처리한 AG $50W{\times}8$ 양이온교환수지관에서 정제하였으며, 순수한 Sm을 90% 이상 분리, 회수할 수 있었다. 실제 PWR 사용후핵연료에 함유되어 있는 Sm의 분리 및 정제에 적용하여 용출액을 질량분석한 결과 Gd, Eu, Pm, Nd 및 BaO에 의한 동중원소 영향이 나타나지 않았다. $^{154}Sm$ 스파이크를 이용한 동위원소희석 질량분석법으로 사용후핵연료 중의 Sm 및 각각의 성분 동위원소($^{147}Sm$, $^{148}Sm$, $^{149}Sm$, $^{150}Sm$, $^{151}Sm$, $^{152}Sm$ and $^{154}Sm$)들을 정량하였다.

• 한국식품과학회지
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• 제22권6호
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• pp.711-715
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• 1990

식품 및 의약품 원료로 이용되고 있는 Iysozyme을 난백으로부터 이온교환 크로마토그래프를 이용하여 연속추출하였다. 사용된 수지는 지금까지 수율, 순도, 작동용이성에서 가장 효과적이라고 밝혀져 있는 Duolite C-464 양이온교환수지를 선택하여 $Na^+$형으로 $pH\;7.9{\pm}0.1$로 평형화하여 사용하였다. 조제용 자동 Liquid Chromatography(LC) system(column size ; i.d. 50 mm, bed volumn ; 1020 ml)에서 수지 평형화, 난백접촉, rinse, lysozyme용출 순으로 cycle을 연속적으로 반복하면서 시행하고 그 재현성을 관찰하기 위해 각 cycle별 rinse끝점과 용출끝점의 UV level을 비교하였다. 그 결과 rinse끝점은 19 cycle까지 30% 이하를 유지하였다. 용출 끝점은 17 cycle까지는 30% 이하에서 비교적 안정하였으나 18 cycle 이후 부터는 50% 이상으로 용출능력이 현저하게 감소하였다. 또한, 회수율 비교에서 17cycle까지는 90% 이상을 유지하다가 18cycle에서는 72%, 19 cycle에서는 65%로 격감하였다. 본 추출 정제 lysozyme은 전기영동상 단일 band로 나타났고, densitometer로 측정한 순도는 99% 이상이었다.

• 분석과학
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• 제26권3호
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• pp.182-189
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• 2013

본 연구에서는 HPLC-ICP-MS를 이용하여 여러 식품에 포함된 셀레늄의 화학종을 분리하고 정량 하였다. 양이온 교환 크로마토그래피를 사용할 때에 무기셀레늄 화학종의 분리는 효율적이나 유기셀레늄 화학종은 분리가 완전하지 못한 반면, 역상 이온쌍 크로마토그래피에서는 유기와 무기 셀레늄 화학종들을 모두 잘 분리 할 수 있었다. $C_8$ 컬럼($Symmetryshield^{TM}\;RP_8$, 3.5 ${\mu}m$, $4.6{\times}150$ mm)을 이용하여 최적조건(이동상; 5% 메탄올, ion-pairing reagent; 0.05% nonafluorovaleric acid, 흐름속도; 0.9 mL $min^{-1}$)하에서 표준물 Se(IV), Se(VI), SeCys (selenocystein), SeMet (selenomethionine), Se-M-C (seleno methyl cystein)를 성공적으로 분리하였다. 시료에서의 셀레늄화학종의 추출은 마이크로파를 이용한 추출과 효소(protease I, trypsin, protease XIV)를 이용한 추출을 사용하였는데 시료에 따라 서로 다른 효율과 결과를 보여주었다. 식물성 시료인 마늘 시료는 protease I, 동물성 시료인 돼지고기와 고등어 시료는 protease I + trypsin이 가장 효율적인 추출을 보여주었다. 각 시료의 최적 조건을 선택하여 셀레늄 화학종을 추출하고 분리 정량한 결과 이들에는 주로 무기 Se, SeCys, SeMet이 수 ${\mu}g$ $g^{-1}$ 내지 수 십 ${\mu}g$ $g^{-1}$ 수준으로 포함되어 있음을 알 수 있었다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제31권5호
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• pp.1192-1198
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• 2010

Pharmaceuticals and personal care products (PPCPs) are emerging contaminants in the aquatic environment. Many pharmaceuticals are not completely removed during wastewater treatment, leading to their presence in wastewater treatment effluents, rivers, lakes, and ground water. Here, we developed analytical methods for monitoring ten pharmaceuticals from surface water by LC/ESI-MS/MS. For sample clean-up and extraction, MCX (mixed cation exchange) and HLB (hydrophilic-lipophilic balance) solid-phase extraction (SPE) cartridges were used. The limits of detection (LOD) in distilled water and the blank surface water were in the range of 0.006 - 0.65 and 1.66 - 45.05 pg/mL, respectively. The limits of quantitation (LOQ) for the distilled water and the blank surface water were in the range of 0.02 - 2.17 and 5.52 - 150.15 pg/mL, respectively. The absolute recoveries for fortified water samples were between 62.1% and 125.4%. Intra-day precision and accuracy for the blank surface water were 2.9% - 24.1% (R.S.D.) and -16.3% - 16.3% (bias), respectively. In surface wastewater near rivers, chlortetracycline and acetylsalicylic acid were detected frequently in the range of 0.017 - 5.404 and 0.029 - 0.269 ng/mL, respectively. Surface water near rivers had higher levels than surface water of domestic treatment plants.