Glutamic acid can be crystallized inside cation exchange column when displacer NaOH concentration is high enough to concentrate displaced glutamic acid beyond its solubility limit. Resulting crystal layer of glutamic acid was moved with liquid phase through the column, and thus could be eluted from the column and recovered in fraction collector. For the purpose of enhancing crystal recovery, effects of operating parameters on the crystal formation were investigated. The increase in the degree of crosslinking of resin favored crystal recovery because of its low degree of swelling. Higher concentration of displacer NaOH was advantageous. If NaOH concentration is too high, however, crystal recovery was lowered due to the solubility-enhancing effects of high pH and ionic strength. The decrease of mobile phase flow rate enhanced crystal recovery because enough time to attain local equilibrium could be provided, but film diffusion would control the overall crystal formation with extremely low flow rate. Lower temperature reduced solubility of glutamic acid and thus favored crystal formation unless the rate of ion exchange was severely reduced. The ion exchange operated by displacement mode coupled with crystallization was advantageous in reducing the burden of further purification steps and in preventing purity-loss resulted from overlapping between adjacent bands.
$N^{G}$ -Mono[$^{14}$ C-Methyl]-L-arginine을 방사선화학적 방법으로 mono [$^{14}$ C]-Methylamine 으로부터 합성한후 양이온 교환수지에 흡착시킨 다음 암모니아수로 용출시켜 정제하였으며 flavianic acid를 사용하여 결정상태로 얻었다. 한편 flavianate와 음이온 교환수지 를 함께 실온 이하의 온도에서 교반혼합함으로서 유리 상태의 amino acid를 쉽게 만들수 있으며 박층크로마토그라피, 박층전기영동 및 섬광분광분석법으로 순도를 조사하였다.
This research was carried out to investigate the correlation between soil chemical properties and bioactive compounds of Acer tegmentosum Maxim. The methods of determining bioactive compounds were determined by high performance liquid chromatography, that contained (-)-gallocatechin (0.04±0.01 ~ 0.43±0.28%), salidroside (0.90±0.06 ~ 3.86±0.59%), tyrosol (0.03±0.00 ~ 0.43±0.00%), (-)-catechin (0.05±0.01 ~ 0.37±0.14%), 6'-O-galloylsalidroside (0.02± 0.01 ~ 0.31±0.06%), (-)-epicatechin-gallate (0.01±0.00 ~ 0.04±0.01%). The soil chemical properties analysis such as soil pH, electric conductivity (EC), organic matter (OM), total nitrogen (TN), available phosphate (Avail. P2O5), exchangeable cation and cation exchange capacity (CEC) were performed following the standard manual. The correlation analysis between soil chemical properties and bioactive compounds of A. tegmentosum, soil pH, available phosphate and exchangeable cation (Ca2+ and Mg2+) were negatively correlated with content of salidroside. On the other hand, soil exchangeable cation (Na+) showed positive correlation with content of salidroside. The results of this study was able to investigate the correlation between soil chemical properties and bioactive compounds of A. tegmentosum.
After oral administration of 14C-labelled $N^G$-mono[methyl-14C]-L-arginine into rats, 38.2 % and 14.7 % of the administered radioactivity bad been recovered in the urine and stool during 10 days. In the urine, 59.4 % of the radioactivity was recovered in the first 24-hours and used for the indentification of the formation of methylamine. The strong cation-exchange resin column chromatography showed 6.3 %, 7.4 %, 4.9 %, and 81.5 % of the distributions of radioactivity of the neutral, monomethylamine, basic, and uneluted portions, respectively. The radioactivity of monomethylamine portion reeluted into the column chromatography was 39.5 %. The radioactivities corresponding monomethylamine in the column chromatography, thin-layer chromatography, and thin-layer electrophoresis were 39.5 %, 37.3 %, and 28.8 % of the recovered radioactivity, respectively.
자색고구마 (자미) anthocyanin 색소의 분석을 위하여 1% HCl 함유 methanol로 추출한 자색고구마 색 소액을 Amberlite IRC-50 양이온교환수지관을 통과시켜 정체하고 paper chromatography로 개별색소를 분리, 3개의 band를 얻었다. Paper chromatography에 의해 분리된 각 개별색소 에 대해 부분가수분해, aglycone의 확인, acyl group의 확인, 결합당의 확인, paper chromatography 그리고 HPLC 등을 기초로 한 각종 기기분석 결과 자색고구마의 anthocyanin 색소는 caffeic acid와 ferulic acid로 acylation된 peonidin-3-diglucoside-5-glucoside의 구조를 나타냄을 알 수 있었다.
A facile and convenient method was developed for the mass production of epigallocatechin gallate (EGCG) rich green tea extract (Er-GTE). The Er-GTE was successfully obtained from the crude water extract of green tea by the combination of two step purification, i.e., a simple adsorption process on the cation exchange resins (Trilite SCR-B) followed by the chromatography with Diaion HP-20 resins. The green tea extract produced by water extraction under $45^{\circ}C$ was subjected to adsorb on the strongly acidic cation exchange resin, Trilite SCR-B. The eluate passed through the resin was reabsorbed on Diaion HP-20 resin, which was subjected to elute with a mixture of water and alcohol by conventional chromatographical manner. The EGCG content in Er-GTE was estimated above 97% by HP-LC analysis and the newly developed method was regarded as the most suitable and appropriate process for the mass production of epigallocatechin gallate rich green tea extract (Er-GTE).
양이온교환 고성능액체크로마토그래피에서 라이소자임을 분석하고, 실험결과인 크로마토그램을 통해 모멘트 분석을 수행하였다. 용리 인산완충용액은 1.0, 0.75, 0.5 M의 소금을 포함하였다. 실험변수는 유량, 용리 완충용액중 소금 농도, 시료의 농도로 하였다. General rate (GR) model을 도입하여 1차와 2차 모멘트를 해석하였다. 1차 모멘트 해석에서 평형상수 K를 구할 수 있으며, 이는 $L/u_0$ vs. $({\mu}_1-t_0)/(1-{\varepsilon}_e)(1-{\varepsilon}_i)$]를 도식화했을 때의 기울기이다. 2차 모멘트 해석에서 입자내 확산계수는 이론단수 실험자료에서 계산하였다. 모멘트 분석결과를 통해 여러 물질전달 현상이 이론단 상당높이(HETP)에 주는 영향을 알아보기 위해 van Deemter plot을 작성하고, 총괄 이론단 상당높이($H_{total}$)에 기여하는 $H_{ax}$, $H_f$, 그리고 $H_d$를 조사하였다. 그 중 입자내 확산계수를 나타내는 $H_d$가 가장 지배적이었고, 외부 물질전달 계수를 나타내는 $H_f$의 영향이 가장 미미했다.
비철특수합금중 아연(II) 구리(II)와 마그네슘(II)을 양이온 교환수지(Dowex 50w${\times}$8, 80-100 mesh)와 음이온 교환수지(IRA-400)을 이용하여 이온교환크로마토그라프로서 분리하는 방법을 연구 하였다. 이온교환수지는 25 ${\times}$ 2cm ID 칼럼에 넣고 흐르는 속도는 0.30 ml/min으로 조절하였다. 아연(II), 구리(II), 마그네슘(II)와 같은 비철금속 이온들을 분리하기 위한 좋은 용리액의 조건은 다음과 같다. 0.5M $NaNO_3$ (pH 3.1), 0.2~0.5M HCl + 50~90% Acetone과 1M HAc + 0.1M NaAcf(pH 3.7)였으며 0.1M NaAc + 1M NaAc(pH 3.7), 0.5M HCl + 50% Acetone이 가장 좋은 용리액으로 판명되었다. 분리된 용출액은 원자흡광 광도계로 측정하였으며 특히 아연 (II)은 음이온 교환수지에서 0.12N HCl과 1.5N $NH_4OH$ 수용액으로 분리하고 E.D.T.A로 적정하였다.
Major cellulase components, such as three endoglucanases (endoglucanases I, II, and III) and one exoglucanase (exoglucanase II), were isolated from a commercial cellulase (Meicelase TP 60) derived from the fungus Trichoderma viride by a series of chromatography procedures. These procedures were the gel filtration on Bio-Gel, the anion exchange on DEAE-Bio-Gel A, the cation exchange on SP-Sephadex C50, and the affinity chromatography on Avicel cellulose. The average molecular weights determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoretic analysis were 51,000, 59,000, 41,000 and 62,000 Da for endoglucanases I, II and III and exoglucanase II, respectively. The extinction coefficients, ${\varepsilon}^{1%}$ 280 nm, of these enzymes were 11.7, 3.3, 7.2 and 11.3, respectively. Among them, the endoglucanase II showed the very low value of the coefficient compared with the others. On the other hand, it was found that endoglucanase II and III were of more random hydrolytic mode on carboxymethylcellulose as compared with those of endoglucanase I and exoglucanase II. Especially, endoglucanase I showed less random action than that of exoglucanase II. In the hydrolysis of insoluble cellulose by the enzyme components, cellobiose was the major product, but glucose was the major product by endoglucanase III.
Membrane-bound alcohol dehydrogenase(ADH) was purified to homogeneity from the acetic acid producing bacteria, Acetobacter sp. KM. The enzyme was solubilized and extracted with Triton X-100 and purified using the Mono-Q ion exchange chromatography and Superose 12 gel filtration chromatography. The enzyme was purified to 12-fold with a yield of 30%. The molecular weight of the purified enzyme was to be 335 KDa. SDS-PAGE of the enzyme showed two subunits with molecular weights of 79 KDa and 49 KDa. It indicated that the enzyme consisted of three subunits of the 79 KDa and two subunits of the 49 KDa. The purified .ADH preferentially oxidized straight chain aliphatic alcohol except methanol. Formaldehyde, acetaldehyde and glutaraldehyde were also oxidized. The apparent Km for ethanol was 1.04 mM and the optimum pH and temperature were 5.0∼6.0 and 32$^{\circ}C$, respectively. V2O5 and divalent cation such as ZnCl2 and NiCl2 inhibited enzymatic activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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