Lee, Seong Shin;Paradhipta, Dimas Hand Vidya;Lee, Hyuk Jun;Joo, Young Ho;Noh, Hyeon Tak;Choi, Jeong Seok;Ji, Keum Bae;Kim, Sam Churl
Animal Bioscience
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v.34
no.6
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pp.1029-1037
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2021
Objective: This study was conducted to investigate effects of antifungal substance and carboxylesterase-producing inoculant on fermentation indices and rumen degradation kinetics of whole crop rice (WCR) silage ensiled at different dry matter (DM) contents. Methods: Dual-purpose inoculants, Lactobacillus brevis 5M2 and Lactobacillus buchneri 6M1, confirmed both activities of antifungal and carboxylesterase in the previous study. The WCR at mature stage was chopped, and then wilted to obtain three different DM contents consisting of 35.4%, 43.6%, and 51.5%. All WCR forages were applied distilled water (CON) or mixed inoculants with 1:1 ratio at 1×105 colony forming unit/g (INO), and ensiled into 20 L mini silo (5 kg) in quadruplicates for 108 d. Results: The INO silages had lower lactate (p<0.001) and butyrate (p = 0.022) with higher acetate (p<0.001) and propionate (p<0.001) than those of CON silages. Ammonia-N (p<0.001), lactate (tendency; p = 0.068), acetate (p = 0.030), and butyrate (p<0.001) concentrations of INO silages decreased linearly with increasing DM content of WCR forage. The INO silages presented higher lactic acid bacteria (p<0.001) with lower molds (p<0.001) than those of CON silages. Yeasts (p = 0.042) and molds (p = 0.046) of WCR silages decreased linearly with increasing DM content of WCR forage. In the rumen, INO silages had higher the total degradable fraction (p<0.001), total volatile fatty acid (tendency; p = 0.097), and acetate (p = 0.007), but lower the fractional degradation rate (p = 0.011) and propionate (p<0.001) than those of CON silage. The total degradable fraction (p<0.001), total volatile fatty acid (p = 0.001), iso-butyrate (p = 0.036), and valerate (p = 0.008) decreased linearly with increasing DM content of WCR forage, while the lag phase (p<0.001) was increased linearly. Conclusion: This study concluded that application of dual-purpose inoculants on WCR silage confirmed antifungal and carboxylesterase activities by inhibiting mold and improving rumen digestibility, while increase of wilting times decreased organic acids production and rumen digestibility.
Dimas Hand Vidya Paradhipta;Myeong Ji Seo;Seung Min Jeong;Young Ho Joo;Seong Shin Lee;Pil Nam Seong;Hyuk Jun Lee;Sam Churl Kim
Animal Bioscience
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v.36
no.5
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pp.720-730
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2023
Objective: This study investigated the effects of corn silage as a source of microbial inoculant containing antifungal and carboxylesterase-producing bacteria on fermentation, aerobic stability, and nutrient digestibility of fermented total mixed ration (FTMR) with different energy levels. Methods: Corn silage was used as a bacterial source by ensiling for 72 d with an inoculant mixture of Lactobacillus brevis 5M2 and L. buchneri 6M1 at a 1:1 ratio. The corn silage without or with inoculant (CON vs MIX) was mixed with the other ingredients to formulate for low and high energy diets (LOW vs HIGH) for Hanwoo steers. All diets were ensiled into 20 L mini silo (5 kg) for 40 d in quadruplicate. Results: The MIX diets had lower (p<0.05) acid detergent fiber with higher (p<0.05) in vitro digestibilities of dry matter and neutral detergent fiber compared to the CON diets. In terms of fermentation characteristics, the MIX diets had higher (p<0.05) acetate than the CON diets. The MIX diets had extended (p<0.05) lactic acid bacteria growth at 4 to 7 d of aerobic exposure and showed lower (p<0.05) yeast growth at 7 d of aerobic exposure than the CON diets. In terms of rumen fermentation, the MIX diets had higher (p<0.05) total fermentable fraction and total volatile fatty acid, with lower (p<0.05) pH than those of CON diets. The interaction (p = 0.036) between inoculant and diet level was only found in the immediately fermentable fraction, which inoculant was only effective on LOW diets. Conclusion: Application of corn silage with inoculant on FTMR presented an antifungal effect by inhibiting yeast at aerobic exposure and a carboxylesterase effect by improving nutrient digestibility. It also indicated that fermented feedstuffs could be used as microbial source for FTMR. Generally, the interaction between inoculant and diet level had less effect on this FTMR study.
Through an analysis of T-2 and HT-2 toxins in corn and brown rice, the effect of enzymatic deacetylation of T-2 toxin on HT-2 toxin was investigated. Gas chromatography (GC) with electron capture detection and high-performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detection were used for quantitative determination. T-2 toxin was converted into HT-2 (84-86%) within 15 min in the presence of crude protein extracts from corn and brown rice. The absence of T-2 conversion was observed for autoclaved samples, in which the enzymes were inactivated. When phosphate buffered saline, followed by methanol, was used as the extraction solvent, recoveries of T-2 toxin spiked at 50 and 200 ${\mu}g/kg$ were from 60 to 87%, whereas those of HT-2 in the autoclaved samples were 0%. In non-autoclaved samples, recoveries of HT-2 were 37-66%, whereas those of T-2 were negligible. However, the conversion of T-2 into HT-2 was not observed when samples were extracted by methanol/water.
Qingfeng Xie;Zhuo Cao;Weiling You;Xiaoping Cai;Mei Shen;Zhangyong Yin;Yiwei Jiang;Xin Wang;Siyu Ye
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.34
no.2
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pp.249-261
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2024
New anti-lung cancer therapies are urgently required to improve clinical outcomes. Since ganodermanontriol (GDNT) has been identified as a potential antineoplastic agent, its role in lung adenocarcinoma (LUAD) is investigated in this study. Concretely, lung cancer cells were treated with GDNT and/or mycophenolate mofetil (MMF), after which MTT assay, flow cytometry and Western blot were conducted. Following bioinformatics analysis, carboxylesterase 2 (CES2) was knocked down and rescue assays were carried out in vitro. Xenograft experiment was performed on mice, followed by drug administration, measurement of tumor growth and determination of CES2, IMPDH1 and IMPDH2 expressions. As a result, the viability of lung cancer cells was reduced by GDNT or MMF. GDNT enhanced the effects of MMF on suppressing viability, promoting apoptosis and inducing cell cycle arrest in lung cancer cells. GDNT up-regulated CES2 level, and strengthened the effects of MMF on down-regulating IMPDH1 and IMPDH2 levels in the cells. IMPDH1 and IMPDH2 were highly expressed in LUAD samples. CES2 was a potential target for GDNT. CES2 knockdown reversed the synergistic effect of GDNT and MMF against lung cancer in vitro. GDNT potentiated the role of MMF in inhibiting tumor growth and expressions of CES2 and IMPDH1/2 in lung cancer in vivo. Collectively, GDNT suppresses the progression of LUAD by activating CES2 to enhance the metabolism of MMF.
The object of this study is to investigate the toxicity of fenvalerate [(RS)-$\alpha$-cyano-3 -phonoxybenzyl-(RS)-2-(4-ch1orophenyl)-3-methylbutyrate] and the effect of carbaryl on the toxicity of fenvalerate. Rats were treated with fenvalerate (50 mg/kg, 100 mg/kg), carbaryl (50 mg/kg, 100 mg/kg) or mixtures of the two compounds (fenvalerate+carbaryl: 50 mg/kg+50 mg/kg, 50 mg/kg+100 mg/kg) by oral administration for 1~3 weeks. Control groups were treated with corn oil. The experimental results were summarized as follows. 1. LD$_{50}$ values of fenvalerate and carbaryl in male rats were 385 mg/kg and 625 mg/kg respectively. When 50 mg/kg and 100 mg/kg of carbaryl were administratrd, LD$_{50}$values of fenvalerate were 265 mg/kg and 225 mg/kg respectively. 2. Biochemical parameters such as ALT, LDH and glucose in serum were much more increased in the groups treated with mixture than the groups treated with either one of fenvalerate or carbaryl. 3. The groups treated with carbaryl and mixture for 3 weeks, the contents of cytochrome P-450 in the liver were significantly increased. In renal microsomal fractions, however, no significant changes of drug metabolizing enzyme activities were observed. 4. The activities of aniline hydroxylase in hepatic microsomal fractions were increased in the groups treated with fenvalerate and mixture and activity was much more increased in the groups treated with mixture. 5. The activities of ATPase in the groups treated with fenvalerate were decreased than that of groups treated with mixture. TBA values and the activity of glucose-6 -phosphatase in the liver were not significantly changed. 6. In mixture treated groups, the activities of cholinesterase in serum and in the liver were more decreased than those of carbaryl treated groups. The activities of carboxylesterase in serum in the liver were slightly increased in mixture treated groups, but in fenvalerate treated groups, the activities of carboxylesterase were much more increased than those of control groups. 7. As a result of this study, when carbaryl was as the synergist of fenvalerate, carbaryl inhibited the activities of esterases, so the toxicity of fenvalerate was increased.sed.
Classification of esterase isozymes of the apterous green peach aphids (Myzus persicae Sulzer) collected in tobacco fields were investigated by the native polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). A total of twelve esterase bands were identified in adult apterous aphid, and the difference of enzyme band activity in the clones was observed at the first and second bands group. Esterases of green peach aphids reacted with specific substrate were more stained $\alpha$-naphthyl acetate than $\alpha$-naphthyl propionate, and $\alpha$-naphthyl acetate more than $\beta$-naphthyl acetate. Twelve esterases on the basis of inhibition by the three types of inhibitors (organophosphates: 2.5$\times$10$^{-3}$ M paraoxon, 4$\times$10$^{-3}$ M DFP; eserine sulfate : 2$\times$10$^{-3}$ M eserin; sulfhydryl reagents: 2$\times$10$^{-3}$ M p-HMB) were classified into three class, namely, cholinesterase (ChE) I, II, carboxylesterase (CE) and arylesterase (ArE), and these classes contained 3, 4, 3 and 2 isozymes, respectively.
Changes in activity and classification of esterase isozymes during the tire cycle or Plodia inteipunctella (Hiibner) were investigated by the native polyacrylamide gel electrophoresis. The stage specificity in esterase activity and isozyme pattern was observed throughout the larvalpupal-adult transformation. The activity esterase was highest at the 3-day old adult stage, and the lowest level at the prepupal stage. A total of 12 esterase bands were identified throughout the development, and the bands showing high enzyme activity was observed in the middle part of gel. Twelve esterases on the basis of inhibition by the three types of inhibitors (organophosphates, eserine sulfate and sulfhydryl reagents) were classified into three class, namely, carboxylesterase (CE), arylesterase (ArE) and cholinesterase (ChE), and these classes contained 7, 3 and 2 isozymes, respectively.
The potential for a given anticholinesterase pesticide to exhibit age-related toxicity is essential information for an accurate and proper risk assessment of that compound. This investigation was designed to study the age-related toxicity of active metabolites of four organophosphates using in vitro detoxification measurement. The blood samples were collected from 1 month and 18 months old rats. The $IC_{50}$ values of mouse brain recombinant AChE of chlorpyrifos-oxon, diazoxon, malaoxon and paraoxon were 10.35, 112.84, 151.28 and 18.43 nM, respectively. When the plasma of young rats, and $CaCI_2$were added, the $IC_{50}$ values of mouse brain recombinant AChE of chlorpyrfos-oxon, diazoxon, malaoxon and paraoxon were 31.89, 164.25, 139.94 and 16.36 nM, respectively. The $IC_{50}$ values of mouse brain recombinant AChE of chlorpyrifos-oxon, diazoxon, malaoxon and paraoxon were changed to 136.840, 1244.45, 654.54 and 52.66 nM by A-esterases In adult rats. These results suggest that four organophosphates have a potential toxicity to exhibit age-related sensitivity.
Young Ho Joo;Seung Min Jeong;Jiyoon Kim;Myeong Ji Seo;Chang Hyun Baeg;Seong Shin Lee;Byeong Sam Kang;Ye Yeong Lee;Jin Woo Kim;Sam-Churl Kim
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.43
no.3
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pp.148-155
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2023
This study was aimed to isolate bacterial inoculants producing chitinase and evaluate their application effects on corn silage. Four corn silages were collected from four beef cattle farms to serve as the sources of bacterial inoculants. All isolates were tested against Fusarium graminearum head blight fungus MHGNU F132 to confirm their antifungal effects. The enzyme activities (carboxylesterase and chitinase) were also measured to isolate the bacterial inoculant. Based on the activities of anti-head blight fungus, carboxylesterase, and chitinase, L. buchneri L11-1 and L. paracasei L9-3 were subjected to silage production. Corn forage (cv. Gwangpyeongok) was ensiled into a 10 L mini silo (5 kg) in quadruplication for 90 days. A 2 × 2 factorial design consists of F. graminearum contamination at 1.0104 cfu/g (UCT (no contamination) vs. CT (contamination)) and inoculant application at 2.1 × 105 cfu/g (CON (no inoculant) vs. INO (inoculant)) used in this study. After 90 days of ensiling, the contents of CP, NDF, and ADF increased (p<0.05) by F. graminearum contamination, while IVDMD, acetate, and aerobic stability decreased (p<0.05). Meanwhile, aerobic stability decreased (p<0.05) by inoculant application. There were interaction effects (p<0.05) on IVNDFD, NH3-N, LAB, and yeast, which were highest in UCT-INO, UCT-CON, CT-INO, and CT-CON & INO, respectively. In conclusion, this study found that mold contamination could negatively impact silage quality, but isolated inoculants had limited effects on IVNDFD and yeast.
A functional screen of 60,672 fosmid metagenomic clones amplified from marine sediment obtained from the Dokdo islets in Korea identified the gene EstES1, whose product, EstES1, displayed lipolytic properties on tributyrin-supplemented media. EstES1 is a 576 amino acid protein with a predicted molecular weight of 59.4 kDa including 37 N-terminal leader amino acids. EstES1 exhibited the highest sequence similarity (44%) to a carboxylesterase found in Haliangium ochraceum DSM14365. Phylogenetic analysis indicated that EstES1 belongs to a currently uncharacterized family of lipases. Within the conserved domain, EstES1 retains the catalytic triad that consists of the consensus penta-peptide motif, GESAG. EstES1 demonstrated a broad substrate specificity toward the long acyl group of ethyl esters (C2-C12), and its optimal activity was recorded toward p-Nitrophenyl butyrate (C4) at pH 9.0 and $40^{\circ}C$ (specific activity of 255.4 U/mg). The enzyme remained stable in the ranges of $60-65^{\circ}C$ and pH 9.0-10.5 and in the presence of methanol, ethanol, isopropanol, and dimethyl sulfoxide. Therefore, EstES1 has potential for use in industrial applications involving high temperature, organic solvents, and/or alkaline conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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