In this study, two epididymal spermatozoa recovery methods in relation to sperm number, motility, viability and acrosome reaction were examined. Seven bulls were castrated and 7 testicles with epididymides were transferred to the laboratoy. Epididymis in each bull was randomly used for flushing and mincing methods with semen extender (Optixcell, IMV, France). The recovered spermatozoa with adjusted sperm concentration to $40{\times}10^6cells/mL$ was diluted with optixcell and cryopreserved. In experiment 1, the difference in the total number of spermatozoa using flushing and mincing methods was insignificant (2570.0 and $2505.2{\times}10^6cells/mL$, respectively). For experiment 2, the percentage of motile spermatozoa and motility parameters between flushing and mincing methods were studied through the use of sperm class analyzer after frozen-thawing. The percentage of total motile sperm between flushing and mincing methods was almost the same with $89.5{\pm}12.8$ and $91.4{\pm}7.9%$, respectively. The same is the case with experiment 3 wherein the viability and acrosomal integrity of frozen-thawed epididymal spermatozoa by flushing and mincing was insignificantly different. The results from the study showed that both flushing and mincing methods can be used for epididymal spermatozoa recovery in bull.
Jo, So-Yeon;Hwangbo, Yong;Lee, Sang-Hee;Cheong, Hee-Tae;Kim, Dong-Ku;Park, Choon-Keun
한국동물생명공학회지
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제36권4호
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pp.239-246
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2021
The immunological sperm separation method is economical compared to the existing sorting method, and it is promising for the development of new technologies by reducing sperm damage. Wholemom (WM) is a sex-regulating protein that comprises on immunoglobulin G coupled with magnetic nanoparticles (MNPs) that responds to surface proteins derived from the Y chromosome in cattle. Y sperms are restricted in motility as the WM aggregates them, and the magnet could separate the non-aggregated cells. This study was conducted to investigate the effect of WM treatment on the characteristics of bull sperm. After treating sperm with WM and incubation for 6 h, the motility parameters including total motility, progressive motility, velocity average path, velocity straight line, amplitude of lateral head displacement, and linearity were significantly higher in the WM treatment group than in the control group (p < 0.05). Sperm viability and acrosome reaction rates were similar in both groups during each incubation period (p > 0.05). In conclusion, the immunological sperm sexing procedure using a monoclonal antibody conjugated with MNPs did not affect the characteristics of bull sperm. This study suggests that compared to other techniques, the immunological method for sperm sexing could classify sperm quickly and efficiently without the use of expensive equipment.
Thirty Hanwoo cattle including bulls, cows, and steers (n = 10 each) were slaughtered and investigated for carcass traits (weight, meat color, fat color, yield index, maturity, marbling score, back-fat thickness, and firmness) and meat quality. The meat quality such as: pH, color, cooking loss, fatty acid, thiobarbituric acid reactive substance, warner-bratzler shear force, tensile tests, and texture profiles were analyzed on longissimus lumborum (LL) muscles of the carcasses at different aging times (3 d and 21 d). The results showed that steers and cows had higher back-fat thickness and marbling score, and a lower firmness (p < 0.001) than bulls. Bulls exhibited a lower meat quality indicating by higher cooking loss, thiobarbituric acid reactive substance content, warner-bratzler shear force and tensile test values (p < 0.01). Regarding the sensory property, the bull meat also had higher hardness, and lower tenderness, juiciness and flavor scores than the cow or steer meat (p < 0.01). Additionally, the bull meat had a higher polyunsaturated fatty acid and a lower monounsaturated fatty acid contents (p < 0.01). With increased aging time, the meat tenderness was improved in all the genders. Taken together, the present study demonstrated that the gender and aging time affected the carcass traits, fatty acid and sensory quality of beef. Postmortem aging could improve the meat tenderness of all genders especially bulls.
Present study analyzed the changes in peripheral blood testosterone concentrations and testicular cytogram in relation to age and semen quality in crossbred males. Three different age groups of crossbred males viz. bull calves (6 months, n = 5), young bulls (15 months, n = 5) and adult bulls (4 to 6 years, n = 8) were utilized for the study. Testicular fine needle aspiration cytology technique was used to quantify testicular cytology and their indices. Peripheral blood testosterone concentrations were measured using enzyme-linked immunosorbent assay method. Semen samples collected from adult bulls were microscopically evaluated for quality parameters. Mean peripheral blood testosterone concentrations in bull calves, young bulls and adult bulls were $2.28{\pm}0.09ng/mL$, $1.42{\pm}0.22ng/mL$ and $5.66{\pm}1.08ng/mL$ respectively, and that in adult bulls were significantly different (p<0.01) from young bulls and bull calves. There was no significant difference between the proportion of different testicular cells in bull calves and young bulls. Between young and adult bulls, significant differences (p<0.01) were observed in the proportion of spermatocytes, spermatozoa, and sperm: Sertoli cell ratio. The proportions of Sertoli cells showed a significant difference (p<0.01) between the three age groups. The number of primary spermatocytes had a positive correlation with peripheral blood testosterone concentrations in bull calves (r = 0.719, p<0.01). Number of Sertoli cells per 100 germ cells was negatively correlated with blood testosterone concentration in young bulls (r = -0.713, p<0.01). Among different semen parameters in adult bulls, ejaculate volume (r = 0.790, p<0.05) had positive relationship, and sperm motility had significant negative correlation (r = -0.711, p<0.05) with testosterone concentrations. The number of Sertoli cells and Sertoli cell index had a positive correlation with various semen quality parameters (p<0.001). Results of the present study conclude that number of Sertoli cells and Sertoli cell index are good indicators of semen quality, but peripheral blood testosterone concentrations may not have a direct relationship with various seminal attributes in crossbred bulls.
The decreased fertility is frequently thought to be problem of cattle production. However, studies figure out that number of these problems is related to bull factors especially in artificial insemination setting. Therefore, this study was designed to investigate the fertility status of bull by their estimated relative conception rate of cows that were inseminated by frozen semen from Korean proven bulls. Here we use the non-return rate (NRR) to access the bull fertility whereas, the NRR was define as the proportion of bulls that semen were used to inseminate cows and the number of cows that did not return for another service within 60 days. The data from 54,388 artificial inseminations (AI) were analyzed from 88 KPN semen. The NRRs of highest and lowest fertile bull were 83.81 and 51.33%, respectively. And mean NRR was 68.27%. In comparison to previously reported study, our data shows 17.38% higher NRR and the absolute value of difference in 50%>NRR and 50%
The experiment was conducted for a period of 56 days with twelve Bangladeshi bull calves of average body weight of $127.20{\pm}11.34$ kg. The calves were divided into 3 groups having 4 animals in each. The animals were fed urea-treated rice straw designated as A) 4% urea-treated rice straw, B) 4% urea+4% soybean-treated rice straw and C) 4% urea+6% soybean-treated rice straw. In addition, all the animals were supplied 2 kg green grass, 350 g Til-oil-cake and 100 g common salt per 100 kg body weight of animals. Straw was treated with 4% urea solution and soybean meal at 4 and 6% were added to treated straw and kept for 48 h in double layer polythene bags under anaerobic condition. Urea treatment improved crude protein (CP) content of rice straw from 2.68 to 8.70% and it was further increased by 10.74 and 12.12% with the addition of 4 and 6% soybean meal. Dry matter (DM) intake (kg) was higher (p<0.05) in C (4.2) followed by B (4.1) and A (4.0). Crude protein intake was significantly higher (p<0.05) in group B and C than group A. Total live weight gains were 20.2, 24.8 and 25.6 kg for calves of group A, B and C respectively (p<0.01). The addition of soybean meal to treated rice straw did not affect the coefficients of digestibility of DM, OM, EE and NFE. However, CP and CF digestibility were significantly higher in group B and C (p<0.05). The values for digestible crude protein (DCP), digestible ether extract (DEE), digestible nitrogen free extract (DNFE) and total digestible nutrients (TDN) were significantly (p<0.05) higher in diet C and B in comparison to diet A, but there were no significant difference in digestible organic matter (DOM) and digestible crude fibre (DCF) value among the groups. It may be concluded that 4% urea treated rice straw can be fed to growing bull calves with 2 kg green grass and a small quantity of concentrate without any adverse effect on feed intake and growth. Moreover, soybean meal at 4 and 6% can be added to urea treated rice straw at the time of treatment for rapid hydrolyzing of urea, which resulted an improvement in nutrient digestibility and better utilization of rice straw for growth of growing bull calves.
A tetraparental chimeric bull was successfully produced by aggregating bovine IVF embryos of F1 (female Holstein${\times}$male Japanese Black) and F1(female Japanese Brown${\times}$male Limousin) and culturing in vitro without the zona pellucida at Yamaguchi Research Station in Japan. In the microsatellite genotyping, 12% (28/228) microsatellite primer sets ware potentially useful for this parentage analysis in the chimeric bull, 78.6% (22/28) of microsatellite present in the chimeric bull were uniquely contributed from the Japanese Black and 21.4% (6/28) from Limousin. This chimeric bull semen was used in producing IVF embryos. The chromosome preparations were made from peripheral lymphocytes. Based on chromosome analysis the Chimera had apparently normal chromosomes (29 acrocentric pairs, one large sub metacentric X chromosome and one small sub metacentric Y chromosome). The proportion of acrosome reacted spermatozoa after 1 h of incubation was higher (p<0.01) with the Chimera than with the Holstein and in Japanese Brown bulls. But did not differ from Japanese Black and Limousin bull sperm. Fertilization rates observed after 5 h of sperm-oocyte incubation with Chimera sperm were higher (p<0.05) than with Japanese Brown and (p<0.01) than with Holstein sperm, but did not differ from Japanese Black and Limousin sperm. The cleavage rates of IVF oocytes inseminated with Chimera sperm were also higher (p<0.001) compared with Holstein, (p<0.01) Japanese Brown and (p<0.05) Limousin, but did not differ from Japanese Black sperm. The blastocyst rates of IVM oocytes inseminated with sperm were higher (p<0.05) than in Limousin, Japanese Brown and Holstein, but did not differ from Japanese Black. Chimeric cattles were produced by aggregation of parthenogenetic (Japanese Brown) and in vitro fertilized (Holstein) bovine embryos at the Yamaguchi Research Station in Japan and by aggregation of parthenogenetic (Red Angus) and in vitro fertilized (Holstein) embryos at the St. Gabriel Research Station in Louisiana. The aggregation rate of the reconstructed demi-embryos cultured in vitro without agar embedding was significantly lower than with agar embedding. The aggregation was also lower when the aggregation resulted from a whole parthenogenetic and IVF-derieved embryos cultured without agar than when cultured with agar. The development rate to blastocysts, however, was not different among the treatment. To verify parthenogenetic and the cells derieved from the male IVF embryos in blastocyst formation, 51 embryos were karyotyped, resulting in 27 embryos having both XX and XY chromosome plates in the same sample, 14 embryos with XY and 10 embryos with XX. The viability and the percentage of zonafree chimeric embryos at 24 h following cryopreservation in EG plus T with 10% PVP were significantly greater than those cryopreserved without PVP. Pregnancies were diagnosed in both stations after the transfer of chimeric blastocysts. Twin male and single chimeric calves were delivered at the Yamaguchi station, with each having both XX and XY chromosomes detected. Three pregnancies resulted from the transfer of 40 chimeric embryos at the Louisiana station. Two pregnancies were Jost prior to 4 months and one phenotypically chimeric viable male born.
The study was conducted to evaluate the seminal attributes and cryobanking of Achhami (Bos indicus) bull semen. Of two Achhami bulls, 8 ejaculates from each bull were evaluated for seminal attributes. For semen freezing and cryo-banking, 4 ejaculates (having ≥2 mL semen volume, ≥75% of sperm motility and ≥1,000 × 106 cells/mL of sperm concentration) from each bull were used. Semen samples were diluted in egg-yolk-tris-citrate extender using a two-step dilution protocol, and were frozen in liquid nitrogen (LN2) vapour in a styrofoam box. The mean semen volume, colour, sperm mass activity, motility, viability, concentration, abnormal acrosome, midpiece and tail and, abnormal head of two Achhami bulls were 4.4 ± 0.5 mL vs. 2.5 ± 0.2 mL, 2.5 ± 0.1 vs. 2.4 ± 0.1, 3.5 ± 0.1 vs. 3.5 ± 0.1, 77.0 ± 1.1% vs. 78.3 ± 1.3%, 94.4 ± 0.5% vs. 91.0 ± 0.6%, 1137.7 ± 73.7 × 106 cells/mL vs. 1060.0 ± 44.3 × 106 cells/mL, 10.2 ± 0.5% vs. 10.3 ± 0.5% and 6.7 ± 0.5% vs. 8.2 ± 0.3%, respectively. The post-thawed sperm motility and viability were 53.0 ± 2.0% vs. 50.0 ± 0.0% and 80.2 ± 0.4% vs. 73.2 ± 0.7%, while evaluating by computer-assisted sperm analysis (CASA) system, the percentage of the progressive motility, fast motility, slow motility, local motility and immotile sperm were 75%, 68%, 7.4%, 16.6% and 8.6%, respectively. A total number of 620 doses semen straw were cryo-banked. Due to the acceptable post-thawed sperm motility and viability recorded, cryopreservation of Achhami semen is hereby recommended so as to preserve the Achhami breed. For further validation, the fertility will be observed from the produced frozen semen.
혈액성분과 경제형질들 간의 상관관계를 규명하는 일은 한우의 능력을 예측하고 예견되는 능력에 맞추어 사양관리와 판매처를 결정할 수 있고, 기존의 종축선발 체계와 결합시킴으로서 선발의 정확도를 향상시킬 수 있는 효과를 기대할 수 있으므로 나름대로 중요한 의미를 갖는다. 본 연구는 축산기술연구소에서 사육하고 있는 한우 866두의 혈액 중 호르몬과 대사물질을 분석하여 혈액성분과 경제형질과의 표현형 상관관계를 분석하고 혈액 내 유용한 생리적인 형질을 발굴하여 능력이 우수한 개체의 조기선발 가능성 구명과 선발 기술을 개발하여 한우개량에 또 다른 방법을 제시 하고자 실시하였다. 혈청성분들과 경제형질들 간의 표현형 상관계수를 거세우와 비거세우로 구분하여 추정한 결과 혈청성분들과 도체형질들 간의 주요 상관은 다음과 같다. 24개월 출하체중과 상관도가 높은 혈청은 거세우에서는 BUN이었고 비거세우에서는 albumin과 IGF-1이었으며, 비육말기 21∼24개월령의 일당증체량과 상관도가 높은 혈청은 거세우에서는 cal-cium이었고 비거세우에서는 albumin으로 증체와 관련 있는 혈청은 거세우에서는 calcium 비거세우에서는 albumin으로 나타났다. 육질과 관련 있는 등지방 두께 및 지방교잡도와 상관도가 가장 높은 혈청은 거세우와 비거세우 모두 BUN이었고, 육량등급의 근간이 되는 육량지수와 상관도가 높은 혈청은 거세우에서는 calcium이었으며 비거세우에서는 testosterone이었으나 육질과 상관이 높은 BUN은 거세우와 비거세우 모두가 육량지수와는 음의 상관을 나타내었다.
Objective: Owing to the lack of a breeding index for efficient and quick fertility evaluations of Holstein bulls when using traditional or genome-wide detection methods, this study aimed to determine whether in vitro fertilization (IVF) could be used as an indicator of conception rate of artificial insemination (AI). Methods: Conventional and sexed frozen semen from nine bulls were used for IVF and AI. Results: The IVF and AI conception rates of each bull were confirmed to be positively correlated between the conventional frozen and sexed frozen semen. The correlation coefficient R values of nine bulls between IVF and AI methods were 0.73 and 0.97 for the conventional frozen and sexed frozen semen, respectively. The average conception rate of three bulls undergoing AI was 69.5% and 64.2%, 61.8% and 58.8%, and 48.2% and 46.2% in first-, second-, and third-born cows when conventional frozen and sexed frozen semen were used, respectively, which showed a positive correlation with the fertilization rate in the same parity. We propose an evaluation standard to assess the fertilization ability of bulls based on their IVF test results, which is categorized into three grades: grade one, normal fertility bull with an AI conception rate of 40%±5% and IVF rate of 45% to 60%; grade two, higher fertility bull with an AI conception rate of 50%±5% and IVF rate of 61% to 80%; and grade three, highest fertility bull with an AI conception rate of 60%±5% and IVF rate of >80%. Conclusion: These findings reveal that IVF results can be used as a breeding index for bulls to evaluate their AI conception ability, which may shorten the time required to select bulls for breeding.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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