본 연구는 게르마늄 강화 효모의 제조 공정을 위한 최적의 조건을 잡고 제조된 게르마늄 강화 효모 내의 게르마늄의 결합 상태 확인을 목적으로 하였으며, 그 결과는 다음과 같다. 균체와 게르마늄 용액 혼합 비율 1 : 0.5(50%)로 하여 균체와 게르마늄 배양시 최적 조건인 pH 6.5, 온도 $35^{\circ}C$ 그리고 배양 시간은 20시간 배양하는 것이 높은 함량의 게르마늄을 효모 균체 내로 유입시켜 게르마늄 강화 효모를 생산하였으며, 이의 배양 과정을 통해 생산된 게르마늄 강화 효모는 배양 과정 동안의 구조적 변화에 의해 효모 내에 유입된 무기 형태인 $GeO_2$ 게르마늄과는 다른 구조를 형성하고 있었다. 또한 NMR 및 FTIR 실험을 실시한 결과 게르마늄 강화 효모의 발효 과정에 첨가한 무기 형태의 $GeO_2$가 배양 과정 동안 균체 내에서 게르마늄이 유입되는 과정에서 게르마늄이 단백질(혹은 펩타이드)과 결합하여 구조에 변화를 형성하였으며, 인공위액 안에서 투석막을 이용한 투석 전후에 따른 게르마늄 총량에서 투석 전후에 따른 차이가 나타나지 않았다. 따라서 게르마늄 강화 효모는 생합성 기법을 이용하여 게르마늄을 강화한 유기 게르마늄 생산방법으로 배양 과정을 통해 구조적으로 안전한 유기 게르마늄을 형성하여 인공위액 조건에서도 해리되지 않는 것으로 보여지며, 각종 암, 성인병의 예방과 치료, 인체 면역력의 증진 등 건강 증진을 위한 새로운 기능성 원료로의 활용이 기대되며, 이에 대한 지속적인 연구가 사료된다.
현대인들은 가정생활과 직업환경 속에서 다양한 종류의 전자기파에 노출되며 전자기파 노출에 따른 생체위해성은 공중보건학적으로 중요한 이슈로 대두되었다. 현재까지 많은 체외 및 체내실험 결과에서 전자기파 노출이 세포대사, 내분비, 면역, 신경, 생식, 태아발달에 영향을 미치는 것으로 보고되었다. 세포나 개체 수준에서 시행된 실험연구에서는 전자기파 노출에 의해 세포내부 자유기의 증가, DNA 손상과 암발생, 발생기형, 생식기능 저하가 나타난다. 역학조사결과 전자기파 노출은 생명을 위협하는 질병인 백혈병, 뇌암, 근위축성 측삭경화증, 우울증, 자살, 알츠하이머와 상관성이 보고되었다. 이러한 생체기능 변화는 전자기파의 주파수, 노출기간, 강도 (에너지)에 따라 다르게 나타난다. 전자기파 노출은 곤충, 어류, 양서류, 파충류, 조류 등 야생동물에서도 동물행동, 번식, 생리기능의 변화를 초래한다. 본 소고에서는 인간보건학적 측면과 생태계에서 나타난 전자기파의 위해성을 전자기파의 종류, 노출시간에 따라 세포 및 개체 수준에서 보고된 위해성 자료를 정리하였다.
In inflammatory responses, induction of cytokines and other immune regulator genes in macrophages by pathogen-associated signal such as lipopolysaccharide (LPS) plays a crucial role. In this study, the gene expression profile changes by LPS treatment in the macrophage/monocyte lineage cell line RAW264.7 was investigated. A 60-mer oligonucleotide microarray of which probes target 32381 mouse genes was used. A reverse transcription-in vitro translation labeling protocol and a chemileuminescence detection system were employed. The mRNA expression levels in RAW264.7 cells treated for 6 h with LPS and the control vehicle were compared. 747 genes were up-regulated and 523 genes were down-regulated by more than 2 folds. 320 genes showing more than 4-fold change by LPS treatment were further classified for the biological process, molecular function, and signaling pathway. The biological process categories that showed high number of increased genes include the immunity and defense, the nucleic acid metabolism, the protein metabolism and modification, and the signal transduction process. The chemokine-cytokine signaling, interleukin signaling, Toll receptor signaling, and apoptosis signaling pathways involved high number of genes differentially expressed in response to LPS. These expression profile data provide more comprehensive information on LPS-target genes in RAW264.7 cells, which will be useful in comparing gene expression changes induced by extracts and compounds from anti-inflammatory medicinal herbs.
Soil acidification is one of major problems limiting crop growth and especially becoming increasingly serious in China owing to excessive use of nitrogen fertilizer. Only the STOP1 of Arabidopsis was identified clearly sensitive to proton rhizotoxicity and the molecular mechanism for proton toxicity tolerance of plants is still poorly understood. The main objective of this study was to investigate the transcriptomic change in plants under the low pH stress. The low pH as a single factor was employed to induce the response of the wheat seedling roots. Wheat cDNA microarray was used to identify differentially expressed genes (DEGs). A total of 1057 DEGs were identified, of which 761 genes were up-regulated and 296 were down-regulated. The greater percentage of up-regulated genes involved in developmental processes, immune system processes, multi-organism processes, positive regulation of biological processes and metabolic processes of the biological processes. The more proportion of down-regulation genes belong to the molecular function category including transporter activity, antioxidant activity and molecular transducer activity and to the extracellular region of the cellular components category. Moreover, most genes among 41 genes involved in ion binding, 17 WAKY transcription factor genes and 17 genes related to transport activity were up-regulated. KEGG analysis showed that the jasmonate signal transduction and flavonoid biosynthesis might play important roles in response to the low pH stress in wheat seedling roots. Based on the data, it is can be deduced that WRKY transcription factors might play a critical role in the transcriptional regulation, and the alkalifying of the rhizosphere might be the earliest response process to low pH stress in wheat seedling roots. These results provide a basis to reveal the molecular mechanism of proton toxicity tolerance in plants.
Receptor activator of NF-kB ligand (RANKL) is known to play a major role in bone metabolism and the immune system, and its recombinant form has been expressed in bacterial systems for research since the last two decades. However, most of these recombinant forms are used after purification or directly using living cells. Here, there were cell extracts of recombinant Lactococcus lactis expressing mouse RANKL (mRANKL) used to evaluate its biological activity in mice. Mice were divided into three groups that were fed phosphate-buffered saline (PBS), wild-type L. lactis IL1403 (WT_CE), and recombinant L. lactis expressing mRANKL (mRANKL_CE). The small intestinal transcriptome and fecal microbiome were then profiled. The biological activity of mRANKL_CE was confirmed by studying RANK-RANKL signaling in vitro and in vivo. For small intestinal transcriptome, differentially expressed genes (DEGs) were identified in the mRANKL_CE group, and no DEGs were found in the WT_CE group. In the PBS vs. mRANKL_CE gene enrichment analysis, upregulated genes were enriched for heat shock protein binding, regulation of bone resorption, and calcium ion binding. In the gut microbiome analysis, there were no critical changes among the three groups. However, Lactobacillus and Sphingomonas were more abundant in the mRANKL_CE group than in the other two groups. Our results indicate that cell extracts of mRANKL_CE can play an effective role without a significant impact on the intestine. This strategy may be useful for the development of protein drugs.
Milk from dairy cows has long provided a high quality source of protein and selected micronutrients as calcuim to most populations. Recently, a relationship between disease risk and consumption of specific bovine ${\beta}$-casein fraction either A1 or A2 genetic variants has identified. Populations, which consume milk contain high containing high levels of ${\beta}$-casein A2 variants, have a lower incidence of cardiovascular disease and type 1 diabetes. Furthermore, consumption of milk with the A2 variants may be associated with less severe symptoms of autism and schizophrenia. The mechanism of action focuses on ${\beta}$-casein A1 and related forms preferentially that are able to produce a bioactive opioid peptide, ${\beta}$-casomorphin-7(${\beta}$-CM-7) during digestion. Infants may absorb ${\beta}$-CM-7 due to an immature gastrointestinal tract. Adult, on the other hand, appear to reap the biological activity locally on the intestinal brush boarder. ${\beta}$-CM-7 can potentially affect numerous opioid receptors in the nervous, endocrine, and immune system. Whether there is a definite health benefit to milk containing the A2 genetic variant is unknown and requires further investigation.
The gastrointestinal exposome represents the integration of all xenobiotic components and host-derived endogenous components affecting the host health, disease progression and ultimately clinical outcomes during the lifespan. The human gut microbiome as a dynamic exposome of commensalism continuously interacts with other exogenous exposome as well as host sentineling components including the immune and neuroendocrine circuit. The composition and diversity of the microbiome are established on the basis of the luminal environment (physical, chemical and biological exposome) and host surveillance at each part of the gastrointestinal lining. Whereas the chemical exposome derived from nutrients and other xenobiotics can influence the dynamics of microbiome community (the stability, diversity, or resilience), the microbiomes reciprocally alter the bioavailability and activities of the chemical exposome in the mucosa. In particular, xenobiotic metabolites by the gut microbial enzymes can be either beneficial or detrimental to the host health although xenobiotics can alter the composition and diversity of the gut microbiome. The integration of the mucosal crosstalk in the exposome determines the fate of microbiome community and host response to the etiologic factors of disease. Therefore, the network between microbiome and other mucosal exposome would provide new insights into the clinical intervention against the mucosal or systemic disorders via regulation of the gut-associated immunological, metabolic, or neuroendocrine system.
Intestinal epithelial cells (IEC) play an important role in the mucosal immune system. IEC-derived mediators of inflammatory cascades play a principal role in the development of colon inflammation. The aim of this study was to investigate the inhibitory effect of aqueous extracts of Schizandra chinensis fruits (SC-Ex) on the production of inflammatory mediators by the human colonic epithelial cells. HT-29 cells were stimulated with dextran sulfate sodium in the presence or absence of SC-Ex to examine the cytoprotection and production of IL-8 and reactive oxygen species (ROS). It was shown that dextran sulfate sodium (DSS) caused the reduction of cell viability and production of IL-8 and ROS in DSS-treated HT-29 cells. We observed that the treatment of SC-Ex protected significantly cell proliferation from DSS-induced damage in dose-dependent manner. SC-Ex (10 and 100 ${\mu}g$/ml) also suppressed DSS-induced production of IL-8 mRNA and protein. Moreover, DSS-induced ROS production was inhibited markedly by the treatment of 100 ${\mu}g$/ml SC-Ex. These results suggest that SC-Ex has the protective effects on DSS-induced cell damage and the release of inflammatory mediators in the intestinal epithelial cells.
Peptidoglycan in inserts and mammals is well known to improve biological functions in the host's immune system. However, it is unclear how Peptidoglycan exerted its anti-inflammatory capacity especially in clam worm (Marphysa sanguinea). In this experiment, the anti-inflammatory and antioxidant effects of clam worm extract treated with (PCWE) peptidoglycan (Micrococcus luteus) in RAW264.7 cells were examined by measuring MDA, catalase, SOD, GSH-Px and inflammatory cytokines (nitric oxide, iNOS, interleukin-$1{\beta}$ and tumor necrosis factor-${\alpha}$). PCWE significantly increased the activities of catalase, SOD and GSH-Px and decreased the level of MDA. Interestingly, PCWE induced activities of SOD and GSH-Px more than clam worm extract without peptidoglycan (CWE). In addition, PCWE decreased NO production, iNOS, COX-2, TNF-${\alpha}$ and IL-$1{\beta}$ better than CWE. Taken together, these results indicate that PCWE has the potential as a natural antioxidant and a therapeutic for inflammation-related diseases.
Microglial activation is thought to play a role in the pathogenesis of many brain disorders. Therefore, understanding the response of microglia to noxious stimuli may provide insights into their role in disorders such as stroke and neurodegeneration. Many genes involved in this response have been identified individually, but not systematically. In this regards, the microarray system permitted to screen a large number of genes in biological or pathological processes. Therefore, we used microarray technology to evaluate the effect of oxygen glucose deprivation (OGD) and reperfusion on gene expression in microglia under ischemia-like and activating conditions. Primary microglial cultures were prepared from postnatal mice brain. The cells were exposed to 4 hrs of OGD and 1 h of reperfusion at $37^{\circ}C$. Isolated mRNA were run on GeneChips. After OGD and reperfusion, >2-fold increases of 90 genes and >2-fold decrease of 41 genes were found. Among the genes differentially increased by OGD and reperfusion in microglia were inflammatory and immune related genes such as prostaglandin E synthase, $IL-1{\beta}$, and $TNF-{\alpha}$. Microarray analysis of gene expression may be useful for elucidating novel molecular mediators of microglial reaction to reperfusion injury and provide insights into the molecular basis of brain disorders.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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