Ethylenediammonium chromate, $C_2H_{10}N_2{\cdot}CrO_4$ 결정구조는 a=6.667(2), b=8.845(2), c=11.827(2) ${\AA}$, 사방정계(Orthorhombic), 공간군 $P2_12_12_1$, 공간군 번호 19이며, Z=4, V=697.4(3) ${\AA}{^3},\;Dc=1.696gcm^{-3},\;{\mu}=1.594mm^{-1}$이었다. 구조분석은 중금속법으로 풀었으며, 최소 자승법으로 정밀화하였고, 최종 신뢰도 값들은 1204개의 회절반점에 대하여 $R_1=0.0254,\;R_w=0.070,\;R_{all}=0.0255$, S=1.133이었다. 두가지 이온들의 자료들은 기존 유사물질들의 자료에 상응하였으며, Ethylenediammonium 이온은 trans 구조로써 주위의 음이온과 사이에 많은 수소결합으로 연결되어 있다.
Excessive presence of heavy metals in environment may contaminate plants and fruits grown in that area. Rapid on-site monitoring of heavy metals can provide useful information to efficiently characterize heavy metal-contaminated sites and minimize the exposure of the contaminated food crops to humans. This study reports on the evaluation of a bismuth-coated glassy carbon electrode for simultaneous determination of cadmium (Cd) and lead (Pb) in a NIST-SRM 1568a rice flour by anodic stripping voltammetry (ASV). The use of a supporting electrolyte 0.1 M $HNO_3$ at a dilution ratio (sample pretreated with acid digestion in a microwave oven: supporting electrolyte) of 1:1 provided well-defined, sharp and separate peaks for Cd and Pb ions, thereby resulting in strongly linear relationships between Cd and Pb concentrations and peak currents measured with the electrode ($R^2\;=\;0.97$, 0.99 for Cd and Pb, respectively). The validation test results for spiked standard solutions with different concentrations of Cd and Pb gave acceptable predictability for both spiked Cd and Pb ions with mean prediction errors of 6 to 30%. However, the applicability of the electrode to the real rice flour sample was limited by the fact that Cd concentrations spiked in the rice flour sample were overly estimated with relatively high variations even though Pb ion could be quantitatively measured with the electrode.
무에서 DEAE Bio-Gel, Con-A 및 Superose-6 칼럼을 이용하여 myrosinase를 정제하고 그 효소학적 특성을 검토한 결과 myrosinase(II)는 2개의 subunits를 가졌으며, 이들의 분자량은 SDS-GAGE상에서 각각 53 및 39 KD였다. 정제된 무효소의 비활성도는 37,500 units/mg이었으며, 정제도는 44배였다. 최적 활성 pH는 phosphate 및 Tris-HCl 완충액에서 $6.5{\sim}7.0$이었으며, pH7.0에서 그 효소활성이 가장 안정하였다. 활성 최적온도는 $37{\sim}38^{\circ}C$였고, 열안정성은 $30^{\circ}C$ 이하였다. 무 myrosinase에 대한 무기염의 영향은 구리 및 수은 이온은 효소 활성을 매우 저해하며, ascorbic acid의 농도별 영향은 1 mM일 때 최대활성을 나타내었다. Ascorbic acid analogue에 대한 활성은 dehydroascorbic acid에 대해서는 거의 없었으며, 나머지 analogue들도 ascorbic acid보다 상당히 활성이 낮았다. 무 myrosinase에 대한 환원제의 영향은 2-mercaptoethanol과 dithiothreitol에 의해서는 활성을 나타내지 않았으나, 이들을 ascorbic acid 등 2-mercaptoethanol과 함께 첨가하면 활성을 나타내었다.
벼잎의 산성용액 추출물로부터 ion exchange chromatography chitin affinity chromatography chromatofocusing gel slicing 등의 방법으로 단백질 RCG-2를 순수분리하였다. 본 단백질은 chitin과 laminarin을 가수분해하므로 chitinase와 ${\beta}-1,3-glucanase$ 활성을 함께 보유하고 있는 것으로 나타났으며, 이외에도 M. lysodeiktikus cell wall을 가수분해하는 lysozyme 활성도 보유하는 것으로 판명되었다. 분자량이 29.77 kd인 본 효소의 chitinase 활성은 pH 4.0에서, ${\beta}-1,3-glucanase$ 활성은 pH 7.0에서 최대로 나타났고, 최적온도는 두 효소 활성 모두 $40^{\circ}C$ 이었다. chitin에 대한 $K_M$ 값은 7.86 mM, $V_{max}$는 $0.025\;{\mu}M/min$, laminarin $({\beta}-1,3-glucan)$에 대한 것은 각각 5.95 mM, $0.16{\mu}\;M/min.$ 이었으며, 정제된 효소는 chitin을 chitooligosaccharide로 분해하는 것으로 나타나서 endochitinase로 판명되었다.
The humanized anti-hepatocyte growth factor (HGF) monoclonal antibody (mAb) YYB-101 is a promising therapeutic candidate for treating various cancers. In this study, we developed a bioprocess for large-scale production of YYB-101 and evaluated its therapeutic potential for tumor treatment using a xenograft mouse model. By screening diverse chemically defined basal media formulations and by assessing the effects of various feed supplements and feeding schedules on cell growth and antibody production, we established an optimal medium and feeding method to produce 757 mg/l of YYB-101 in flask cultures, representing a 7.5-fold increase in titer compared with that obtained under non-optimized conditions. The optimal dissolved oxygen concentration for antibody production was 70% $pO_2$. A pH shift from 7.2 to 7.0, rather than controlled pH of either 7.0 or 7.2, resulted in productivity improvement in 5 L and 200 L bioreactors, yielding 737 and 830 mg/ml of YYB-101, respectively. The YYB-101 mAb highly purified by affinity chromatography using a Protein A column and two-step ion exchange chromatography effectively neutralized HGF in a cell-based assay and showed potent tumor suppression activity in a mouse xenograft model established with human glioblastoma cells.
Vanadium-incorporated aluminophosphate microporous molecular sieve VH-SAPO-42 has been studied by electron spin resonance(ESR) and electron spin-echo modulation (ESEM) spectroscopies to determine the vanadium location and interaction with various adsorbate molecules. The results are interpreted in terms of V(IV) ion location and coordination geometry. Assynthesized VH-SAPO-42 contains only vanadyl species with distorted octahedral or trigonal bipyramidal coordination. Vanadium incorporated into H-SAPO-42 occupied extra-framework site. After calcinations in $O_2$ and exposure to moisture, only species A is observed with reduced intensities. Species A is identified as a $VO(H_2O)_2^{2+}$ complex coordinated to three framework oxygen atoms bonded to aluminum. When hydrated VH-SAPO-42 is dehydrated at elevated temperature by calcination, species A loses its water ligand and transforms to $VO^{2+}$ ions coordinated to three framework oxygens (species B). Species B reduces its intensities significantly after treatment with $O_2$ at high temperature, thus suggesting oxidation of $V^{4+}$ to $V^{5+}$. When dehydrated VH-SAPO-42 makes contact with $D_2O$ at room temperature, the ESR signal of species A is regained. The species is assumed as a $VO(O_f)_3(D_2O)_2$ by considering three framework oxygens. Adsorption of deuterated methanol on dehydrated VH-SAPO-42 results in another new vanadium species D, which is identified as a $VO(CD_3OH)_2$ complex. When deuterated ethylene is adsorbed on dehydrated VH-SAPO-42, another new vanadium species E identified as a $VO(C_2D_4)^{2+}$, is observed. Possible coordination geometries of these various complexes are discussed.
본 실험에서는 인간 전과립 세포를 회분배양 조건 에서 10%의 혈청을 포함하는 배지로 배양하였다. 이 와같은 조건에서 세포의 비성장율은 0.374C1/day) 이고 세포내 존재하는 살균활성을 가진 목적 단백질 의 생산성은 0.435(mg/10' viable cells)으로 나타났 다. 세포내 존재하는 목척 단백질의 순수 분리를 위 해 sephadex G-75, sephadex G-100, Bio→Rex70 을 이용해 분리하였다. 정제된 목적 단백질은 감수성 균주, E. coli IFO 13168과 St. aureus IFO 3060 을 표준 균주로 살균 측정을 하였을 때, 기존의 항생 물질은 균주에 대해 40~701땅1m!에서 활성을 나타 낸 반면, 정제된 목적 단백질은 G(+)균(St. aureus IFO 3060)에서는 $0.5\mu\textrm{g}$/ml이고, G(-)균(E. coli IFO 13168)에서는 $0.4\mu\textrm{g}$/ml에서 살균 활성을 보였다. 따라서 AMF가 기존 항생물질보다 살균 활성이 강력한 단백질임을 알 수 있다. 해당 분자량을 측정 하기 위해 SDS-PAGE로 측정한 결과 약 15,000 Dalton의 분자량을 갖고 있음이 확인됐다.
5-$HT_{3}$ receptor;5-$HT_{3A}$ receptor channel activity;Novel 5-$HT_{3}$ receptor channel current blockers;Chlorophenyl substituted piperazinylethylaminomethylpyrazoles; The 5-$HT_{3A}$ receptors are one of ligand-gated ion channels and are known to be involved in visceral pain, anxiety, or anticancer agent-induced nausea and vomiting. In present study, we designed novel skeletons based on the developed 5-$HT_{3}$ receptor antagonists and evaluated their effects on 5-$HT_{3A}$ receptor channel currents ($I_{5-HT}$) of a series of pyrazole derivatives having N-chlorophenylpiperazine functionality (6-9). We found that most of N-p-chlorophenyl substituted piperazinyl-pyrazole derivatives (7b, 7c, 7e and 7h) exhibited the high potency for the inhibition of $I_{5-HT}$, whereas the compound without chloride (6) or with m-chlorophenyl group (a serious of 8 and 9) showed the low potency. These result indicate that p-chlorophenyl group is might play an important role for increasing the inhibitory potency on $I_{5-HT}$.
Seawater adaptability of steelhead trout increases along with the increase in the size of the fish, independent of parr-smolt transformation. Three 96 h seawater challenge tests were conducted to determine the size at which seawater adaptability of steelhead trout develops. Plasma Na+ and Cl- levels, moisture content, gill Na+/K+ ATPase activity, and mortality during the 96 h after direct transfer to seawater (32 ppt) were determined. Plasma Na+ and Cl- levels in 50 g fish continuously increased during the 96 h after the transfer to seawater (p<0.05), but the levels in 100 and 150 g fish leveled off after 24 h (p<0.05). Both 100 and 150 g size steelhead trout maintained muscle moisture content (%) better than 50 g size fish (p<0.05). Gill Na+/K+ ATPase activity in the 100 g size group increased in a time-dependent manner after transfer to seawater (p<0.05), whereas activity in the 50 and 150 g sizes did not increase (p>0.05), for which a possible explanation was discussed. A mere 2.6% mortality in both the 50 and 150 g size groups was observed. In conclusion, the current results indicate that 50 g size steelhead trout did not show development of a high level of hypoosmoregulatory capacity, whereas fish in the 100 and 150 g size groups showed a high level in our experimental conditions. Therefore, the steelhead trout larger than a 100 g size is recommended for transfer to seawater culture.
콩 유용성분 탐색의 일환으로 그리고 향후 콩 ferritin 항체 및 유전자 확보를 목표로 발아된 콩으로부터 ferritin을 분리 정제하여 그 몇가지 특성을 조사하였다. 72시간 발아된 콩으로부터 ammonium sulfate 침전(0.55 saturation), DEAE-cellulose, Sephacryl S-300, Bio-Scale Q2 column chromatographies를 통하여 ferritin을 분리하였다. 정제된 콩 ferritin은 SDS-PAGE 분석에서 21 kDa의 크기를 나타냈으며, Sephacry S-300을 통한 겔거르기 chromatography와 non-denaturing 폴리아크릴아마이드 전기영동 분석에서 $510{\sim}560\;kDa$의 크기로 측정 되었다. 또한, immunodiffusion test에서 anti-soybean ferritin antiserum과 상호 반응하였다. 원자흡광광도계와 표준 철 용액을 이용한 정제된 콩 ferritin 중의 철 함유량은 833 mol Fe/mol protein 이었으며, 이는 호박씨로부터 분리한 ferritin보다 31배 더 많은 양의 철 함유량 이었다. 정제된 콩 ferritin중의 철은 horse spleen ferritin 중의 철과 유사하게 iron staining 되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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