Chun, Jung Nyeo;Song, In Sung;Kang, Dong-Hoon;Song, Hye Jin;Kim, Hye In;Suh, Ja Won;Lee, Kong Ju;Kim, Jaesang;Won, Sang
Molecules and Cells
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제26권2호
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pp.175-180
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2008
$I{\kappa}B$ kinase (IKK), the pivotal kinase in signal-dependent activation of nuclear factor-${\kappa}B$ (NF-${\kappa}B$), is composed of multiple protein components, including IKK ${\alpha}/{\beta}/{\gamma}$ core subunits. To investigate the regulation of the IKK complex, we immunoaffinity purified the IKK complex, and by MALDI-TOF mass spectrometry identified a splice variant of zinc finger protein 268 (ZNF268) as a novel IKKinteracting protein. Both the full-length and the spliced form of the ZNF268 protein were detected in a variety of mammalian tissues and cell lines. The genes were cloned and expressed by in vitro transcription/translation. Several deletion derivatives, such as KRAB domain (KRAB) on its own, the KRAB/spacer/4-zinc fingers (zF4), and the spacer/4-zinc fingers (zS4), were ectopically expressed in mammalian cells and exhibited had different subcellular locations. The KRAB-containing mutants were restricted to the nucleus, while zS4 was localized in the cytosol. TNF-${\alpha}$-induced NF-${\kappa}B$ activation was examined using these mutants and only zS4 was found to stimulate activation. Collectively, the results indicate that a spliced form of ZNF268 lacking the KRAB domain is located in the cytosol, where it seems to play a role in TNF-${\alpha}$-induced NF-${\kappa}B$ activation by interacting with the IKK complex.
질전환에 적합한 국화 스프레이 타입 품종을 선발하기 위해서 국내 연구기관에서 육성된 39개 품종 및 일본품종인 스탠다드 타입 신마를 모아 재분화율과 아그로박테리움 감염도를 조사하였다. 잎과 마디 절편체로부터의 신초 재분화를 위하여 IAA $0.5mg{\cdot}L^{-1}$와 BAP $1.0mg{\cdot}L^{-1}$가 첨가된 MS 배지를 사용하였다. 잎 절편체로부터의 신초 재분화는 BRM 품종이 가장 높았고 VS, WW, YTM 품종순으로 분화되었다. 이전에 형질전환재료로 보고된 바 있는 신마는 PK, SPP 품종과 유사한 수준을 보였다. 마디 절편체로부터의 신초 재분화는 PA 품종에서 가장 높았으며 WW 품종이 다음으로 확인되었다. 40개의 국화 품종을 대상으로 아그로박테리움에 대한 감염도를 조사한 결과, 잎 절편체에서는 WPP, YNW, VS, PP, WW, FA, PA, YMN 품종이 가장 높았고 마디 절편체에서는 WPP, PA, PK, YNW 품종이 가장 높았다. 이상의 결과를 종합해 볼 때 국화의 잎 절편체를 이용한 형질전환은 VS와 WW 품종이 가장 적합한 반면에 마디형질전환에는 PA 품종이 가장 적합한 것으로 확인되었다.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제27권4호
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pp.314-320
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2001
Matrix metalloproteinases have long been viewed as ideal candidates for proteinases that enables tumor cells to permeated basement membrane defenses and invade surrounding tissue. There is growing evidence that the MMPs have an expanded role, as they are important for the creation and maintenance of a microenvironment that facilitates growth and angiogenesis of tumors at primary and metastatic sites. MT-MMPs are not secreted but instead remaining attached to cell surfaces. Although not all of the MT-MMPs are fully characterized, MT-MMPs have important role in localizing and activating secreted MMPs. The MMP genes are transcriptionally responsive to a wide variety of oncogene, growth factors, cytokine, and hormones. Currently, a number of MMP inhibitors are being developed and some have reached clinical trials as anti-metastatic or anti-cancer therapies. MT1-MMP is involved in the activation of proMMP-2. MT1-MMP is significant not only as a tumor marker but as a new target for chemotherapy against cancer. The purpose of this study was to evaluate the effects of protein kinase C inhibitor(genistein) on the proliferation of HT1080 and expression of MT1-MMP mRNA. Human fibrosarcoma cell line HT1080 was cultured and divided 2 groups. The experimental group was treated with $100{\mu}M$ genistein and incubated 12h, 24h for $[3^H]-thymidine$ uptake assay and northern hybridization individually. And the control group was treated with same amount of PBS for the above procedures. $[3^H]-thymidine$ incorporation was measured with ${\beta}$ ray detector. And RT-PCR and northern blotting for MT1-MMP mRNA was performed. The results were as follows 1. $[3^H]-thymidine$ uptake was reduced in experimental group with statistical significance. 2. MT1-MMP mRNA expression was significantly reduced in experimental group. These results showed that protein kinase C inhibitor (genistein) inhibited proliferation of HT1080 and almost completely blocked transcription of MT1-MMP mRNA. So, it is possible to use the protein kinase inhibitor (genistein) as anti-metastatic and anti-proliferative agent.
Infections of Toxoplasma gondii and Babesia microti are reported in many wild animals worldwide, but information on their incidence and molecular detection in Korean wild fields is limited. In this study, the prevalence of T. gondii and B. microti infection in blood samples of 5 animal species (37 Chinese water deer, 23 raccoon dogs, 6 roe deer, 1 wild boar, and 3 Eurasian badgers) was examined during 2008-2009 in Gangwon-do (Province), the Republic of Korea (=Korea) by using serological and molecular tests. The overall seropositivity of T. gondii was 8.6% (6/70); 10.8% in Chinese water deer, 4.3% in raccoon dogs, and 16.7% in roe deer. PCR revealed only 1 case of T. gondii infection in Chinese water deer, and phylogenic analysis showed that the positive isolate was practically identical to the highly pathogenetic strain type I. In B. microti PCR, the positive rate was 5.7% (4/70), including 2 Chinese water deer and 2 Eurasian badgers. Phylogenetic analysis results of 18S rRNA and the ${\beta}$-tubulin gene showed that all positive isolates were US-type B. microti. To our knowledge, this is the first report of B. microti detected in Chinese water deer and Eurasian badger from Korea. These results indicate a potentially high prevalence of T. gondii and B. microti in wild animals of Gangwon-do, Korea. Furthermore, Chinese water deer might act as a reservoir for parasite infections of domestic animals.
Levans produced from Microbacterium laevaniformans were isolated, characterized, and fractionated by molecular weight. TLC, HPLC, and GC-MS analyses of the exopolysaccharide showed that it was a fructan-type polymer and was composed of (2,6)- and (2,1)-glycosidic linkages. $^{13}C$-NMR analysis proved that the polysaccharide was mainly a $\beta$-(2,6)-linked levan-type polysaccharide. To investigate the cytotoxicity of the acetone-precipitated levan fractions such as M1, M2, and M3, HepG2, P388D1, U937, SNU-1, and SNUC2A cell lines were screened. Among the cell lines tested, the cytotoxicity of M1- M3 fractions were detected from only SNU-1 and HepG2 cells at the dosage level of $100-800\mu\textrm{g}ml$. The M2 fraction M_r$, 80,000) at 400 $mu{g/ml}$ had the greatest cell growth inhibition (84.6%) on SNU-1, while the M1 $(M_r$, 50,000) at $800\mu\textrm{g}ml$ showed the greatest (46.32%) on HepG2. To obtain more uniform M_r$ fractions of levan, the levan was further fractionated from S1 $(M_r$ 1,000,000) to S5 $(M_r$ 10,000) using gel permeation chromatography. Again, the S1-S5 fractions had strong cytotoxicity on SNU-1 and HepG2 cell lines. The greatest inhibition effects of S4 $(M_r$ 80,000) on SNU-1 and S5 $(M_r$ 10,000) on HepG2 were shown to be 49.5% and 73.0%, respectively. The cytotoxicity of the levan fractions was more effective on SNU-1 than on HepG2. Although the relationship between the Mw and the cytotoxicity was not clear, smaller $M_r$, fractions of levan showed greater growth inhibition effect on the cancer cell lines in general. Therefore, it was indicated that a specific Mw class of levan is responsible for the effective cytotoxicity.
Chaiyabutr, N.;Preuksagorn, S.;Komolvanich, S.;Chanpongsang, S.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제13권10호
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pp.1359-1366
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2000
An experiment was carried out to study plasma levels of hormones and metabolites of crossbred Holstein cattle during late pregnancy (28 days pre partum), early lactation (30 days post partum), mid-lactation (120 days post partum) and late lactation (210 days post partum). Two breed types of Holstein $Friesian{\times}Red$ Sindhi (50:50 = 50%HF) and Holstein $Friesian{\times}Red$ Sindhi (87.5:12.5 = 87.5%HF) were divided into four groups of four animals each. Two groups of each breed were fed with either rice straw treated with 5% urea or pangola hay (Digitaria decumbens) as the source of roughage throughout the experiments. There were a substantial increases in the mean levels of total triiodothyronine ($T_3$), insulin and glucagon at the onset of lactation, and maintained in a high levels during lactation advance for all groups of experiments. The mean levels of prolactin and thyroxine ($T_4$) were not significantly different among groups of animals, but the plasma cortisol concentration was slightly higher in both groups of 50%HF in comparison with those of 87.5%HF animals. The mean levels of plasma growth hormone (GH) of both groups of 87.5%HF animals feeding on either hay or urea treated rice straw markedly rose in the early period of lactation and markedly reduced in mid- and late lactation. These changes were accompanied with changes of milk yield. In contrast to 50%HF animals, plasma GH levels were considerably higher in the late pregnant period than in the early period of lactation and it remained constant as its value at the early lactation throughout the experimental period. The high levels of both plasma progesterone and estradiol concentration significantly declined after parturition and remained low through lactating period. The plasma glucose level in the 50%HF animals feeding on either hay or urea treated rice straw was higher than the 87.5%HF animals in all periods of experiments. Changes in plasma FFA levels of both types of crossbred animals were depended on the endocrine status during late pregnancy and lactation. The levels of plasma FFA of 50%HF animals were significantly higher (p<0.05) than those of 87.5%HF animals during late pregnancy. Both plasma ${\beta}$-hydroxybutyrate and lactate concentrations were not affected by feeding on either hay or urea treated rice straw during late pregnancy and lactation. These data demonstrate that there were no differences in the physiological performances in the same crossbred animals fed either hay or urea treated rice straw. The 87.5%HF animal has the genetic potential for a high milk yield and homeorhetic adaptation for mammary function differed from 50%HF animals during periods of lactation. Altering lactation persistency in 87.5%HF is regulated mainly by chronically acting growth hormones through the period of lactation.
월성 원자력 발전소의 TRF 시설에서 수집된 트리튬을 metal hydride 형태로 보관하고 있는 500 kCi급 트리튬 1차 저장용기를 발전소 밖의 폐기물 저장고로 안전하게 운반하기 위하여 트리튬 운반용기를 개발하였다. B형 운반용기의 기술기준을 적용하여 구조평가, 열평가, 방사선차폐평가, 격납평가 등을 수행하여 운반용기의 안전성을 분석하였다. 트리튬 운반용기는 정상운반조건 및 사고운반조건에서도 격납 경계가 손상되지 않는다고 평가되었다. 붕괴열로 인한 운반용기 내부 저장용기의 온도상승은 수치해석 결과, 원통형 모델에서는 $134.8^{\circ}C$로 나타났다. 운반사고 조건에 대한 열 평가로서 $800^{\circ}C$ 외부환경에 30분간 노출되었을 경우에는 단열재만의 열차폐를 고려하여 계산한 결과, 약 $405^{\circ}C$로 나타났으며, 내부 온도 상승은 1차 격납 경계인 1차 저장용기의 허용 온도인 $550^{\circ}C$에도 미치지 못하였다. 격납 차폐 평가에서도 사고조건인 $800^{\circ}C$의 외부 환경에 노출된 경우에서도 충분히 운반용기의 격납 성능을 유지할 수 있다고 판단되었다. 방사선에 대한 차폐 특성을 조사한 결과, 트리튬에서 발생된 ${\beta}-ray$ 선량은 1차 저장용기 외부 표면에서 0으로 계산되었다. 이상과 같이 500 kCi 급 트리튬 운반용기에 대한 안전성을 평가한 결과, 운반사고조건에서도 트리튬 운반용기는 전혀 이상이 없는 것으로 나타났다.
The enamel matrix derivative (EMD) has been recently used in the periodontal regenerative techniques. The present study was established to investigate the influence of EMD on human periodontal ligament cells using expression of mRNA of periodontal ligament specific gene (PDLs)17, PDLs22, type I collagen when EMD applied to periodontal ligament cells. Periodontal ligament cells were obtained from a healthy periodontium and cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) plus 10% fetal bovine serum and ${\beta}-glycerophosphate$ with ascorbic acid. Test groups were two; One adds EMD in culture media and another added EMD and Dexamethasone (DEX) in culture media. Positive control group added DEX in culture media, and negative control group adds niether of EMD nor DEX. $Emdogain^{(R)}$ (Biora, Sweden, 30 mg/ml) was diluted by 75 ${\mu}g/ml$ concentration to culture media. For reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), total RNA isolated on days 0, 7, 14 and 21. mRNA of PDLs17 was expressed on days 14 and 21 in EMD or DEX group, and expressed on days 7, 14 and 21 in EMD plus DEX group, the other side, expressed on days 21 in negative control group. mRNA of PDLs22 expressed on days 7, 14 and 21 in EMD group, and expressed on days 14 and 21 in DEX group, and expressed on days 7, 14 and 21 in EMD plus DEX group. Negative control group expressed on days 14 and 21. Type I collagen was expressed on all days and all groups. These results indicate that EMD promotes differentiation of periodontal ligament cells, and this is considered to offer basis that can apply EMD to periodontal tissue regeneration technique.
Purpose: The aim of this study is to evaluate the effect and potential of electron beam (E-beam) irradiation treatment to the synthetic bony mixtures composed of hydroxyapatite (HA; Bongros$^{(R)}$, Bio@ Co., Korea) and tricalcium phosphate (${\beta}$-TCP, Sigma-Aldrich Co., USA), mixed at various ratios and of type I collagen (Rat tail, BD Biosciences Co., Sweden) as an organic matrix. Methods: We used 1.0~2.0 MeV linear accelerator and 2.0 MeV superconductive linear accelerator (power 100 KW, pressure 115 kPa, temperature $-30{\sim}120^{\circ}C$, sensor sensitivity 0.1~1.2 mV/kPa, generating power sensitivity 44.75 mV/kPa, supply voltage $5{\pm}0.25$ V) with different irradiation dose, such as 1, 30 and 60 kGy. Structural changes in this synthetic bone material were studied in vitro, by scanning electron microscopy (SEM), elementary analysis and field emission scanning electron microscope (FE-SEM), attenuated total reflection (ATR), and electron spectroscopy for chemical analysis (ESCA). Results: The large particular size of HA was changed after E-beam irradiation, to which small particle of TCP was engaged with organic collagen components in SEM findings. Conclusion: The important new in vitro data to be applicable as the substitutes of artificial bone materials in dental and medical fields will be able to be summarized.
이상의 결과를 종합해 볼 때, 높은 수준의 포도당 섭취는 공복혈당과 공복혈당면적을 높이고 혈중 인슐린 농도와 아티포넥틴의 수준을 낮추어 혈당조절 능력을 억제시켰다. 반면, 높은 수준의 과당 섭취는 인슐린을 요구하지 않는 과당대사의 특이성으로 인해 혈당조절에는 효과적으로 보인다. 그러나 고과당 섭취는 간 조직 및 혈중 중성지방의 농도를 높이고 염증조절복합체 구성단백질의 발현을 조절하여 전염증인자의 발현을 증가시켰다. 이는 간조직에 있어 과당이 포도당보다 높은 수준의 염증반응을 유도하여 NAFLD의 발병과 진행에 보다 유의적인 영향을 준다는 것을 보여준다. 본 연구의 제한점은 일상에서 과당이나 포도당을 단독으로 섭취하는 경우가 드물다는 점과 3주라는 짧은 중재기간에 의한 실험 결과라는 것이다. 앞으로의 연구는 단순당을 장기간 섭취했을 때 혈청과 간 조직을 포함한 다른 대사 관련조직에서 나타나는 변화에 초점을 맞출 필요가 있으며, 염증조절복합체가 염증인자의 발현을 증가시키는 기전을 구체화하는 것이 요구된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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