Pan, Li;Zhao, Yuan;Yuan, Zhijie;Farouk, Mohammed Hamdy;Zhang, Shiyao;Bao, Nan;Qin, Guixin
Molecules and Cells
/
v.40
no.2
/
pp.109-116
/
2017
Soybean agglutinin (SBA) is an anti-nutritional factor of soybean, affecting cell proliferation and inducing cytotoxicity. Integrins are transmembrane receptors, mediating a variety of cell biological processes. This research aims to study the effects of SBA on cell proliferation and cell cycle progression of the intestinal epithelial cell line from piglets (IPEC-J2), to identify the integrin subunits especially expressed in IPEC-J2s, and to analyze the functions of these integrins on IPEC-J2 cell cycle progression and SBA-induced IPEC-J2 cell cycle alteration. The results showed that SBA lowered cell proliferation rate as the cell cycle progression from G0/G1 to S phase (P < 0.05) was inhibited. Moreover, SBA lowered mRNA expression of cell cycle-related gene CDK4, Cyclin E and Cyclin D1 (P < 0.05). We successfully identified integrins ${\alpha}2$, ${\alpha}3$, ${\alpha}6$, ${\beta}1$, and ${\beta}4$ in IPEC-J2s. These five subunits were crucial to maintain normal cell proliferation and cell cycle progression in IPEC-J2s. Restrain of either these five subunits by their inhibitors, lowered cell proliferation rate, and arrested the cells at G0/G1 phase of cell cycle (P < 0.05). Further analysis indicated that integrin ${\alpha}2$, ${\alpha}6$, and ${\beta}1$ were involved in the blocking of G0/G1 phase induced by SBA. In conclusion, these results suggested that SBA lowered the IPEC-J2 cell proliferation rate through the perturbation of cell cycle progression. Furthermore, integrins were important for IPEC-J2 cell cycle progression, and they were involved in the process of SBA-induced cell cycle progression alteration, which provide a basis for further revealing SBA anti-proliferation and anti-nutritional mechanism.
Park, Joong-Hyun;Park, Kyu-Sang;Cha, Seung-Kyu;Lee, Keon-Il;Kim, Min-Jung;Park, Jong-Yeon;Kong, In-Deok;Lee, Joong-Woo
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
/
v.8
no.4
/
pp.219-225
/
2004
The pelvic ganglia provide autonomic innervations to the various urogenital organs, such as the urinary bladder, prostate, and penis. It is well established that both sympathetic and parasympathetic synaptic transmissions in autonomic ganglia are mediated mainly by acetylcholine (ACh). Until now, however, the properties of ACh-induced currents and its receptors in pelvic ganglia have not clearly been elucidated. In the present study, biophysical characteristics and molecular nature of nicotinic acetylcholine receptors (nAChRs) were studied in sympathetic and parasympathetic major pelvic ganglion (MPG) neurons. MPG neurons isolated from male rat were enzymatically dissociated, and ionic currents were recorded by using the whole cell variant patch clamp technique. Total RNA from MPG neuron was prepared, and RT-PCR analysis was performed with specific primers for subunits of nAChRs. ACh dose-dependently elicited fast inward currents in both sympathetic and parasympathetic MPG neurons $(EC_{50};\;41.4\;{\mu}M\;and\;64.0\;{\mu}M,\;respectively)$. ACh-induced currents showed a strong inward rectification with a reversal potential near 0 mV in current-voltage relationship. Pharmacologically, mecamylamine as a selective antagonist for ${\alpha}3{\beta}4$ nAChR potently inhibited the ACh-induced currents in sympathetic and parasympathetic neurons $(IC_{50};\;0.53\;{\mu}M\;and\;0.22\;{\mu}M,\;respectively)$. Conversely, ${\alpha}-bungarotoxin$, ${\alpha}-methyllycaconitine$, and $dihydro-{\beta}-erythroidine$, which are known as potent and sensitive blockers for ${\alpha}7$ or ${\alpha}4{\beta}2$ nAChRs, below micromolar concentrations showed negligible effect. RT-PCR analysis revealed that ${\alpha}3$ and ${\beta}4$ subunits were predominantly expressed in MPG neurons. We suggest that MPG neurons have nAChRs containing ${\alpha}3$ and ${\beta}4$ subunits, and that their activation induces fast inward currents, possibly mediating the excitatory synaptic transmission in pelvic autonomic ganglia.
To investigate the interaction between whey and soybean protein, thermal changes of component proteins were analyzed by column chromatography and gel electrophoresis. In the Sephadex G-200 chromatography of the mixture treated at above $80^{\circ}C$, the amount of low molecular weight proteins and high molecular aggregates were increased. This implicated that dissociation of 1ls globulin into subunits and the formation of soluble aggregates between these subunits and whey proteins that contain thiol and disulfide groups. These interaction between soy proteins and ${\beta}-lactoglobulin$, ${\alpha}-lactalbumin$, and proteose-peptone 3 were confirmed by gel electrophoresis. Bovine serum albumin, Immunoglobulin-G(H), Lactoferrin, 1ls-subunits(basic and acidic), and subunit of 7s globulin were also considered to interact each other depending on the condition of the salt solutions.
An olive-green mutant was generated in Synechocystis sp. strain PCC 6803 by inactivation of the sll0396 gene. Whole-cell absorption spectra of the mutant revealed the missing of phycocyanin peak. An investigation of the low-temperature fluorescence emission spectra revealed that the $sll0396{\Omega}$ mutant has a reduced amount of phycocyanin. Western blot analysis showed that the mutant contained less phycocyanin ${\beta}$- and ${\alpha}$-subunits and lacked the 30- and 32-kDa linker polypeptides, and northern blot analysis revealed that the transcription of the 1.4-kb cpcBA gene encoding the phycocyanin ${\beta}$- and ${\alpha}$-subunits was lower in the mutant. The Sll0396 protein has a DNA-binding motif and shares homology with known response regulators. Our results indicate that Sll0396 plays a regulatory role in the transcription of the phycocyanin genes during phycobilisome synthesis.
The alkaline invertase ($\beta$-D-fructofuranoside fructohydrolase, EC 3.2.1.26) was isolated and characterized from the hypocotyls of mung bean (Phaseolus radiatus L.). The enzyme was purified by consecutive step using diethylaminoethyl (DEAE)-cellulose anion exchange, 1st Sephadex G-200, DEAE-Sephadex A50 and 2nd Sephadex G-200 chromatography. The overall purification was about 77-fold with a yield of about 6%. The finally purified enzyme exhibited a specific activity of about 48 $\mu$mol of glucose produced mg-1 protein min-1 at pH 7.0 and appeared to be a single protein by nondenaturing polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE). The enzyme had the native molecular weight of 450 kD and subunits molecular weight of 63 kD and 38 kD as estimated by Sephadex G-200 chromatography and SDS-PAGE, respectively, suggesting that the enzyme is a heteromultimeric protein composed of two types of subunits. On the other hand, the enzyme appeared to be not a glycoprotein according to the results of Con A chromatography and glycoprotein staining. The enzyme had a Km for sucrose of 19.7 mM at pH 7.0 and maximum activity around pH 7.5. The enzyme was most active with sucrose as substrate, compared to raffinose, cellobiose, maltose and lactose. These results indicate the alkaline invertase is a $\beta$-fructofuranosidase.
Jin Seo;Park, Woonmee;Hwang, Eun-Seong;Lee, Je-Ho;Hong, Seung-Hwan
The Korean Journal of Zoology
/
v.38
no.2
/
pp.204-211
/
1995
In an effort to develop a new therapeutic strategy for human gene therapy of solid ovarian tumor, we studied the expression of the p53 tumor suppressor Sene as well as regulatory subunits of cyclic AMP (cAMP)-dependent protein kinase in human ovarian carcinoma cells. Four cell lines (2774, Caov-3, SK-OV-3 and OVCAR-3) were selected for the analyses. The p53 transcript and protein were detected only in the 2774 cell line by Northern and Western Bnalysis. In the relatively fast growing cell line, SK-OV-3, the %rope 1 a regulstorv subunit (RIA of CAMP-dependent protein kinase was the highest among the four cell lines. The expression level of $RII\beta$ protein was low in the four cell lines examined. These results maw point to a direction to select the target gene(sl to be employed for gene therapy to control the ovarian cancer.
Bifidobacterium bifidum OFR9 that exhibits acquired resistance to rifampicin and fluoroquinolones was selected by MNNG and multi-step mutation method. To investigate the resistance mechanism to rifampicin in the strain, RNA polymerase from B. bifidum parent strain and rifampicin-resistance OFR9 was partially purified and its sensitivity to rifampicin was assayed. The profile of RNA polymerase preparation of B. bifidum parent and B. bifidum OFR9 is similar to that of E. coli RNA polymerase that includes the basic subunits of ${\beta}$`, ${\beta},\;{\sigma},\;{\alpha}$ but which are a little different in size when they are compared with E. coli RNA polymerase subunits. RNA polymerase isolated from the parent strain was inhibited by 1${\mu}$g/ml rifampicin but that from B. bifidum OFR9 was not affected by 100${\mu}$g/ml concentration of rifampicin. RNA polymerase activity of B. bifidum OFR9 was maintained over 90% through that rifampicin concentration. This result is consistent with MIC values of in vitro test. It can be concluded that the mechanism of rifampicin resistance in B. bifidum OFR9 is due to an alteration of RNA polymerase.
Soybean is an important crop because its seed has very high protein relative to others. The quality of soy protein is limited by the concentration of the sulfur-containing amino acids in the amino acid profile. Among the supply of various forms of 0.4mM sulfur as S nutrition during seed fill. only 0.4mM L-methionine can inhibit ${\beta}$-subunit synthesis completely and produce the highest glycinin-containing seeds. Compared to 0.4mM sulfate control, seeds supplied by 0.4mM L-methionine have lower ${\alpha}$-, no ${\beta}$-subunit, and highly increased glycinin without altering total protein concentration. Supply of 0.2mM cystine (0.4mM S) did not affect the accumulative pattern of seed storage protein (SSP) subunits. In the supply of L-methionine, 0.2mM treatment showed higher glycinin in seeds but 0.05mM resulted in lower glycinin than tile sulfate control. The relative abundance of ${\alpha}^`$-subunit was not altered by any N or S nutrition. Under 5mM nitrogen, protein concentration was increased about 3-5% by substituting ammonia for nitrate during seed fill independent of nutrition. The increase resulted in the only increase of 7S protein, mainly ${\beta}$-subunit. Our data suggest that the regulatory system of SSP genes responds to the balance between N and S assimilates supplied from mother plant. and controls the di fferential synthesis of their subunits for the maximum protein accumulation in developing soybean seed.
A 2-D gel protein analysis of Lactobacillus reuteri ATCC 55739 produced spots corresponding to subunits of the pyruvate dehydrogenase complex, as identified by N-terminal protein sequencing. Oligonucleotide probes specific for the subunits of the pyruvate dehydrogenase complex were synthesized ,md used to screen a L. reuteri genomic library to clone the structural genes. Two positive clones were isolated and identified as having the same 2.2 kb insert. A pdhB encoding the $\beta$-subunit of El subunit (pyruvate dehydrogenase component) of the pyruvate dehydrogenase complex was located in the middle of the insert. Furthermore, a 5' truncated pdhA encoding the $\alpha$-subunit of the E1 subunit and a 3' truncated pdhC encoding the E2 subunit (dihydrolipoamide acetyltransferase) were also located upstream and downstream of the pdhB, respectively.
A $\beta$-fructofuranosidase of garlic (Allium sativum L. ; Seosan) was purified by ammonium sulfate fractionation and gel filtration chromatography with a recovery of 8.3%. The molecular mass of the purified enzyme was estimated to be 79kDa by SDS-PAGE, which revealed two subunits of 41kDa and 38kDa. Maximum enzyme activity was observed at pH 5.0 and 40$^\circ C$ and the enzyme was stable over the pH range of 4.0-6.0 and below 50$^\circ C$. The Km value for sucrose was 15.5mM and the enzyme activity was significantly inhibited by bivalent metal ions(Hg$^2+$, Cu$^2+$, Cd$^2+$) and EDTA.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.