The Chitinase which hydrolyzes the chitin, $\beta-1,$ 4-polymer of N-acetyl glucosamine, was purified from the culture broth of Streptomyces sp. 115-5 strain. The homogeneity of enzyme was reveali by CM-Sephadex C-50 column chromatography and polyacrylamide gel electrophoresis. The purified enzyme hydrolyzed chitin and chitosan, but not cellulose. And with chitin as the substrate, a Km value of 3.6mg per ml and a Vmax of $100\mu$ mole per hr were found. The activation energy for the reaction was 3.66 Kcal per mole. The M. W. was estimated 56,000 daltons, and PI as 3.0. The chitinase was inhibited by the addition of glucose, glucuronic acid, sorbitol and xylose as product inhibitors and its inhibition pattern by glucose was estimated pure competitive type.
Fibrinolytic enzyme was purified from the fruiting bodies of Lepista nuda, using DEAE-Cellulose chromatography, Phenyl Sepharose chromatography, and Mono-S column chromatography. The substance has a molecular weight of 30006.62 Da as measured by MALD-TOF mass spectrometry. The N-terminal amino acid sequence of the enzyme was Tyr-Pro-Ser-Pro-Ser-His-Gln-Thr-Ala-Val-Asn-Ala-Ile-Ile-X. The activity of the enzyme was inhibited by PMSF, indicating that the enzyme is a serine protease. No inhibition was found with E-64, pepstatin, and EDTA. It has broad substrate specificity for synthetic peptides. The enzyme was stable up to $30^{\circ}C$. The enzyme hydrolyzes both Aa and y chains of human fibrinogen but did not show any reactivity for $B{\beta}$ chain of human fibrinogen.
담자균류인 말징버섯 Calvatia craniformis의 성분을 연구하기 위하여 그 균사체를 액내 배양하여 열수 추출한 후 ethanol로 침전시켜 단백 결합 다당체를 분리하였다. 이 성분을 DEAE-cellulose ion exchange, Sepharose CL-4B gel filtration 그리고 Concanavalin A Sepharose 4B affinity chromatography를 실시하여 총 6가지 분획(Fr. A~F)으로 정제하였다. 이들을 각각 10또는 20mg/kg/day의 용량으로 마우스의 복강에 투여하였을때, 육종 180 고형암에 디하여 41.7~74.1%의 종양억제율을 나타내었고 $\beta$-형 다당체인 Fr. F가 종양 억제율이 가장 높았다. 화학 분석에 의해, 이 성분은 4기의 단당 mannose, xylose, galactose, glucose로 구성된 87.2% polysaccharide와 1.9%의 Protein 및 1.3%의 hexosamine 함유하고 있고 이 성분의 분자량은 5.5 $\times$$10^4$ dalton이었다. 이 성분을 calvatan이라 명명 하였다.
The effect of riboflavin feeding on lipid emtabolism in rat were studied. 70 male Sprague-Dawley rats were divided into 7 diet group ; control, riboflavin, cholesterol, MLHP (methyl linoleate hydroperoxide) cholesterol plus MLHP, cholesterol plus riboflavin, cholesterol plus MLHP plus riboflavin. After 4 weeks formular feeding sera of animals were collected, then checked cholesterol, triglyceride, phospholipid levels and lipoprotein by use of cellulose acetate papter. The results were as follows ; 1) Marked increase of triglyceride and phospholipid levels were found in the group feeding with cholesterol, cholesterol plus MLHP. 2) Combined riboflavin feeding prevented the increase of triglyceride and phospholipid levels in the group of cholesterol, cholesterol plus MLPH. 3) Also combined riboflavin feeding prevented the increase of $\beta$-lipoprotein fraction in cholesterol feeding group. Our results demonstrate that riboflavin has an inhibitory effects on the derangements of lipid metabolism due to administration of cholesterol, cholesterol plus MLHP.
One of the most economically viable processes for the bioconversion of many lignocellulosic waste is represented by white rot fungi. Phanerochaete chrysosporium is one of the important commercially cultivated fungi which exhibit varying abilities to utilize different lignocellulosic as growth substrate. Examination of the lignocellulolytic enzyme profiles of the two organisms Phanerochaete chrysosporium and Rhizopus stolonifer show this diversity to be reflected in qualitative variation in the major enzymatic determinants (ie cellulase, xylanase, ligninase and etc) required for substrate bioconversion. For example P. chrysosporium which is cultivated on highly lignified substrates such as wood (or) sawdust, produces two extracellular enzymes which have associated with lignin deploymerization. (Mn peroxidase and lignin peroxidase). Conversely Rhizopus stolonifer which prefers high cellulose and low lignin containg substrates produce a family of cellulolytic enzymes including at least cellobiohydrolases and ${\beta}-glucosidases$, but very low level of recognized lignin degrading enzymes.
Chitin, a polymer of N-acetylglucosamine ($\beta$-1,4 linked 2-acetamido-D-glucose), is a cellulose-like biopolymer present richly in the exoskeleton of crustaceans and in cell walls of fungi, insects and yeast. Chitosan is derived from chitin by deacetylation, to different degrees, in the presence of alkali. [l]. Recent studies for chitin and chitosan have been concentrated in bioactivities such as antitumor activity, immuno-enhancing effects, enhancing protective effects against infection with some pathogens in mice, and antimicrobial activeity [2]. (omitted)
The softening of the femented vegetables and the fruits was resulted from the degradation of pectin substances, cellulose, hemicellulose by polygalacturonase(PG), pectinesterase(PE), Cx-cellulase, $\beta$-galctosidase. The conversion of insoluble pectin to soluble pectin in cell wall-middle lamella was a major factor in the changes of firmness. Ca2+ was substantially increased firmness. However, Ca2+ could be removed from cell wall by chelating agents such as oxalic acid and citric acid. And Ca2+ was replaced with Na+ by ion exchange reaction. Ca2+ deficient tissue was vulnerable to attack by PG. Preheating treatment and Ca2+ addition is most effective in inhibiting the vegetable food softening and in increasing middle lamella-cell wall regidity, which PE activation by preheating treatment and Ca2+ addition could created more anionic carboxyl groups for cationic materials binding such as Ca2+ and chitosan and for polypectategel formation. Excessive demethylation by PE was associated with loosening of middle lamella cell wall components and softening.
Thirty seven species of Fusarium were evaluated for their ability of producing extracellular enzymes using chromogenic medium containing substrates such as starch, cellobiose, CM-cellulose, xylan, and pectin. Among the tested species Fusarium mesoamericanum, F. graminearum, F. asiaticum, and F. acuminatum showed high ${\beta}$-glucosidase acitivity. Xylanase activity was strongly detected in F. proliferatum and F. oxysporum. Strong pectinase activity was also found in F. oxysporum and F. proliferatum. Amylase activity was apparent in F. oxysporum. No clear activity in cellulase was found from all the Fusarium species tested.
탄수화물분해효소 ${\beta}$-amylase(BA), ${\alpha}$-amylase(BAA), $cellulose+{\beta}$-glucanase(CBG)를 쌀과 함께 침지하여 쌀가루를 제조한 뒤 이 효소처리 쌀가루 100%를 이용하여 쌀쿠키를 제조해 쿠키의 품질 특성을 조사하였다. 효소처리 쌀쿠키 반죽의 밀도는 탄수화물 분해효소의 종류 및 효소처리의 유무에 따른 유의차를 나타내지 않았다. 효소처리 쌀쿠키의 퍼짐성은 비효소처리 쌀쿠키에 비해 크게 나타났으며 효소 ${\beta}$-amylase와 ${\alpha}$-amylase를 이용하여 제조한 쌀가루 쿠키를 제조했을 때 쿠키의 퍼짐성이 큰 것을 확인하였다. 효소처리 쌀쿠키 BA, BAA, CBG의 수분함량은 3.20~3.90%로 비효소처리 쌀쿠키 비해 유의적으로 낮은 수분함량을 나타내었다(P<0.05). 쌀쿠키의 색도 측정결과, 효소처리 쌀쿠키의 L값은 비효소처리 쌀쿠키에 비해 유의적으로 낮은 값을 나타냈으며, a와 b값은 효소처리 쌀쿠키가 비효소처리 쌀쿠키에 비해 유의적으로 낮은 값을 나타내었다(P<0.05). 쌀쿠키의 경도는 효소처리 쌀쿠키가 비효소처리 쌀쿠키에 비해 높은 경도를 나타내었으나 효소의 종류에 따른 차이를 나타내지 않았다. 관능적 특성으로 쌀쿠키의 특성강도 평가에서 쿠키의 고소한 향과 균열의 정도는 효소의 유무 및 효소의 종류에 따른 차이가 나타나지 않았다. 갈색의 정도와 쿠키의 고소한 맛의 강도는 비효소처리 쌀쿠키에 비해 효소처리 쌀쿠키에서 높게 나타났으며 효소 ${\alpha}$-amylase와 ${\alpha}$-amylase로 처리한 쌀가루로 제조한 쌀쿠키(BA)가 갈색의 정도와 쿠키의 고소한 맛이 적당한 강도를 나타내었다. 경도는 효소 처리 쌀쿠키의 강도가 유의적으로 높았으며 효소의 종류에 따른 유의적인 차이는 나타내지 않아 기계적 경도와 관능적인 측면의 경도가 유사한 결과를 나타내었다. 바삭함은 경도의 강도 평가와 유사한 경향을 나타내었다. 기호도 검사 결과에서, 비효소처리 쌀쿠키는 향, 외관, 맛, 조직감 및 전반적인 기호도에서 유의적으로 낮은 기호도를 나타내었다(P<0.05). 효소 ${\alpha}$-amylase를 이용한 쌀쿠키 BAA는 향, 맛 조직감에서 높은 점수를 받아 전반적인 기호도에서 높게 나타나 효소 ${\alpha}$-amylase를 0.1%의 농도로 처리하여 제조한 쌀가루로 쿠키를 제조할 때 일반 쌀쿠키에 비해 향, 맛, 조직감에서도 좋은 기호도를 나타내는 것으로 나타나 쿠키의 소재로 적합할 것으로 사료된다.
식품에서의 쓴 맛 펩타이드의 형성 기작 및 분해에 의한 제거 방법을 알아보기 위하여 카제인 가수 분해물에서 쓴 맛 펩타이드를 분리하여 그 특성을 조사하였다. Bacillus subtilis가 생산하는 염기성 단백부내 효소를 순수 분리된 ${\alpha}_{s1}$-카세인과 ${\beta}$-카제인에 처리하여 카제인 가수 분해물을 만들고, 이 가수 분해물에서 용매 추출, Sephadex G-25 겔 크로마토그래피, 고성능 액체 크로마토그래피를 이용해 쓴 맛 펩타이드를 순수 분리했다. 고성능 액체 크로마토그래피는 역상 칼럼인 octadecylsilica 칼럼을 사용했고, 0.1% TFA와 80% $CH_3CN$의 linear gradient 방법을 이용했다. ${\alpha}_{s1}$-카제인 가수분해물에서 3가지 쓴 맛 펩타이드를 분리하였는데, BP-I은 $CH_3CN$ 34%에서, BP-II는 35%, BP-III는 26%에서 각각 용출되었다. ${\beta}$-카제인 가수 분해물에서 2가지 쓴 맛 펩타이드를 분리했는데, BP-IV는 $CH_3CN$ 40%에서, BP-V는 42%에서 용출되었다. 분리된 다섯 가지 펩타이드 중 BP-V가 가장 소수도가 높았으며, 쓴 맛은 BP-I과 BP-II가 가장 강했다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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