In order to produce high concentration of sodium gluconate, optimization of the fermentation conditions, such as glucose concentration, inoculum size, dissolved oxygen concentration and glucose feeding method, was examined. When the glucose concentration was maintained in the range of 30∼50 g/L during the batch fermentation, glucose conversion yield and productivity were 92.2% and 6.0 g/L/hr, respectively. In the case of the low concentration below 30 g/L, the yield decreased by about 25%. As the inoculum size increased above 20%(w/v), lag phase was shortened but the productivity decreased. The dissolved oxygen level of 60∼70% was shown to be the threshold point for 75% of increase in the productivity of sodium gluconate. Finally, optimal glucose feeding rate was determined using various feeding methods such as exponential feeding, feeding based on the average glucose consumption rate and was determined using various feeding methods such as exponential feeding, feeding based on the average glucose consumption rate and on the oxygen uptake rate and etc. Our result shows that glucose feeding, based on the oxygen uptake rate is a very simple, efficient and robust method, especially when oxygen is consumed as a substrate for the bioconversion. Using the above glucose feeding strategy under the optimized condition, 255 g/L of sodium gluconate concentration, 12 g/L/hr of productivity and 95% of glucose conversion yield were achieved with A. niger ACM53.
Kim, Woohyun;Eom, Moon-Ho;Lee, Sang-Hyun;Choi, Jin-Dal-Rae;Park, Sunwon
Korean Chemical Engineering Research
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v.51
no.2
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pp.226-232
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2013
To produce biobutanol, fermentation processes using clostridia that mainly produce acetone, butanol and ethanol are used. In this work, a dynamic model describing the metabolic reactions in an acetone-butanol-ethanol (ABE)-producing clostridium, Clostridium acetobutylicum ATCC824, was proposed. To estimate the 58 kinetic parameters of the metabolic network model with experimental data obtained from a batch fermentor, we used an efficient optimization method combining a genetic algorithm and the Levenberg-Marquardt method because of the complexity of the metabolism of the clostridium. For the verification of the determined parameters, the developed metabolic model was evaluated by experiments where genetically modified clostridium was used and the initial concentration of glucose was changed. Consequently, we found that the developed kinetic model for the metabolic network was considered to describe the dynamic metabolic state of the clostridium sufficiently. Thus, this dynamic model for the metabolic reactions will contribute to designing the clostridium as well as the fermentor for higher productivity.
Kim, Hye-Jin;Park, Jin-Kyu;Jeong, Min-Kyo;Lee, Nam-hoon
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.15
no.1
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pp.171-177
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2007
In order to investigate the effect of the methanogenic bacteria in bacteria in leachate on the degradability of landfill waste, this study has created 4 cylinder-shape PVC lysimeters (Diameter: 30cm, Height: 200cm, Volume: 140L) and for the biological treatment and recirculation of the leachate, two anaerobic batch reactors (Diameter: 20cm, Height: 30cm) were created. To simulate a conventional landfill, no recycling was done in L1. In L2, 1,068ml of leachate (twice of rainfall amount) was recycled. In L3 and L4, the leachate was anaerobically digested in a dark room (with $35{\pm}1^{\circ}C$) for a week and them recycled by 1,064ml and 2,128ml, respectively, with recycled water only. In terms of cumulative $CH_4$ production, however, L3 and L4 were much higher (three times) than L1 and L2. Between L3 and L4, the latter was 1.23 times higher than the former in terms of cumulative CH4 production. In other words, the more the methanogenic bacteria-activated leachate is recycled, the more active the degradation due to active methane fermentation by the recyled methanogenic bacteria. And methane recovery is different according to the amount of recycled the methanogenic bacteria in leachate.
The hypochlorite ion ($OCl^-$) is a widely used disinfecting agent in pig rearing in Korea, but its residual effect on $CH_4$ production from pig slurry is unclear. The objective of this study was to investigate the inhibition effects of residual $OCl^-$ on $CH_4$ production during the initial anaerobic digestion stage of pig slurry. Three organic concentrations (9.9, 26.2 and 43.7 g/L) of volatile solids (VS) were tested with the addition of 52.3 mg/L $OCl^-$, ten times of the typical concentration used in Korea, or without $OCl^-$ (Control) in anaerobic batch culture. The culture was run under mesophilic ($38^{\circ}C$) conditions for 20 d. At the lowest organic concentration with $OCl^-$, the VS degradation was 10.3% lower (p<0.05) than Control, while at the higher organic concentration with $OCl^-$, it did not differ from Control. $CH_4$ yields were higher in the control treatments than their $OCl^-$ counterpart cultures, and $CH_4$ yields of Control and $OCl^-$ treatments at the organic concentrations of 9.9, 26.2 and 43.7 g/L differed in the probability level (p) of 0.31, 0.04, and 0.06, respectively. Additionally, $CH_4$ concentration increased steeply and reached 70.0% within 4 d in the absence $OCl^-$, but a gradual increase up to 60.0% was observed in 6 d in the $OCl^-$ treated cultures. The $R_m$ (the maximum specific $CH_4$ production rate) and ${\lambda}$ (lag phase time) of 9.9 g/L with $OCl^-$ were 8.1 ml/d and 25.6 d, while the $R_m$ was increased to 15.1 ml/d, and ${\lambda}$ was reduced to 11.4 d in PS-III (higher organic concentration) with $OCl^-$. The results suggest that a prolonged fermentation time was necessary for the methanogens to overcome the initial $OCl^-$ inhibitory effect, and an anaerobic reactor operated with high organic loadings was more advantageous to mitigate the inhibitory effect of residual hypochlorite ion.
The secretory overexpression of Clostridium thermocellum endoglucanase A gene (celA) was examined in Saccharomyces cerevisiae using Kluyveromyces marxianus exoinulinase (INU1) signal sequence and GAL10 promoter. The two plasmids, pYEG-CT1 with its own signal sequence, and pYInu-CT1 with INU1 signal sequence were introduced to S. cerevisiae SEY2102 and S. cerevisiae 2805 host strains, respectively, and then each transformant was selected on the synthetic defined media lacking uracil. The expression level and secretion efficiency of endoglucanase A was increased by $18{\sim}22%$ and 11%, respectively, by INU1 signal sequence over celA signal sequence. By considering the high level of expression (361 unit/I), plasmid stability (89%), and secretion efficiency (70%), S. cerevisiae 2805 harboring plasmid pYInu-CT1 was selected as the opti-mal host vector system for the production of cellulose-degrading enzyme and recombinant yeast probiotic. The total expression and secretion efficiency of endoglucanase A was 418 unit/l and 73%, respectively, in the batch fermentation of S. cerevisiae 2805/pYlnu-CT1 on galactose medium. The mo-lecular weight of secreted endoglucanase A was found to be greater than 100 kDa, presumably due to the N-linked glycosylation.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.25
no.1
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pp.15-21
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2017
In the present work, the synergistic effect of seaweed addition on organic acid production from sludge was investigated. The batch experiment was conducted at various mixing ratios of sewage sludge and seaweed (100:0, 75:25, 50:50, 25:75, 0:100 on a COD basis) under the substrate concentration of 20 g COD/L. The fermentation temperature was conducted under mesophilic condition ($35^{\circ}C$) and a heat-treated ($90^{\circ}C$ for 20 min) anaerobic digester sludge was used as a seeding source to suppress the methanogenic activity, The results showed that the amount of organic acid production increased as the content of seaweed increased: organic acids were 1.45, 3.22, 4.28, 5.24 and 4.82 g COD/L for the mixing ratio of 100:0, 75:25, 50:50, 25:75 and 0:100 respectively. The synergistic effect was calculated based on the organic acid production of individual sludge and seaweed, and was found to be 0.92, 1.14, 1.26 g COD/L at the mixing ratio of 75:25, 50:50 and 25:75, which indicates that 40% of synergy was obtained when 25% of seaweed was added. The synergistic effect could be ascribed to the high C/N ratio and biodegradability of seaweed.
This study was undertaken to investigate the effects of dicarboxylic acid supplementation, as replacement antibiotics, of on in vitro ruminal parameters and milk yield and milk composition in lactating cows. in vitro treatments were 1) Con (4 g of basal diet), 2) CM (4 g of basal diet + 0.05 ml of monensin), 3) CR (4 g of basal diet + 0.1 ml of dicarboxylic acid) and in vivo treatments were 1) Con (25 kg of basal diet/head/day), and 2) CR (25 kg of basal diet + 5 g of dicarboxylic acid/head/day), respectively. A total 10 lactating dairy cows ($649{\pm}19kg$ average body weight, $99{\pm}65$ average milking days) were divided in to two groups according to mean milk yield and number of days of postpartum. The cows fed a basal diet during adaptation (2 wk) and experimental diets during the treatment periods (4 wk). In the first in vitro experiment, there were no statistical differences between treatments in pH, gas production, and ammonia-N and lactic acid concentration during incubation. However, dry matter digestibility was significantly higher in CR treatment compared to control or CM treatment (P<0.05). Total VFA was tended to higher in CR treatment than those of control and CM treatment (P>0.05). In the second experiment, milk yield was significantly higher in treatment (40.39 kg) compared to control (35.19 kg), (P<0.05). Milk composition and MUN were not changed by dietary supplementing dicarboxylic acid. Therefore the present results reporting that supplementation of dicarboxylic acid might enhance the stabilization of ruminal fermentation and increase the milk yield of lactating cows.
This paper describes the use of a discrete mathematical model to represent the basic mechanisms of regulation of the bacteria E. coli in batch fermentation. The specific phenomena studied were the changes in metabolism and genetic regulation when the bacteria use three different carbon substrates (glucose, glycerol, and acetate). The model correctly predicts the behavior of E. coli vis-a-vis substrate mixtures. In a mixture of glucose, glycerol, and acetate, it prefers glucose, then glycerol, and finally acetate. The model included 67 nodes; 28 were genes, 20 enzymes, and 19 regulators/biochemical compounds. The model represents both the genetic regulation and metabolic networks in an integrated form, which is how they function biologically. This is one of the first attempts to include both of these networks in one model. Previously, discrete mathematical models were used only to describe genetic regulation networks. The study of the network dynamics generated 8 $(2^3)$ fixed points, one for each nutrient configuration (substrate mixture) in the medium. The fixed points of the discrete model reflect the phenotypes described. Gene expression and the patterns of the metabolic fluxes generated are described accurately. The activation of the gene regulation network depends basically on the presence of glucose and glycerol. The model predicts the behavior when mixed carbon sources are utilized as well as when there is no carbon source present. Fictitious jokers (Joker1, Joker2, and Repressor SdhC) had to be created to control 12 genes whose regulation mechanism is unknown, since glycerol and glucose do not act directly on the genes. The approach presented in this paper is particularly useful to investigate potential unknown gene regulation mechanisms; such a novel approach can also be used to describe other gene regulation situations such as the comparison between non-recombinant and recombinant yeast strain, producing recombinant proteins, presently under investigation in our group.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.29
no.1
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pp.54-61
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2007
The influences of pH were investigated for anaerobic hydrogen gas production under the constant pH condition ranged from pH 3 to 10. Carbon dioxide and hydrogen gas were main components of the gas but methane was not detected in the produced gas when sucrose was added in enrichment medium. When the modified Gompartz equation was applied for the statistical analysis of experimental data, a hydrogen production potential and maximum gas production rate at pH 5 were 1,182 mL and 112.46 mL/g dry wt biomass/hr. The hydrogen conversion ratio was 22.56%. The butyrate/acetate ratios at pH 5 and pH 6 are 1.63 and 0.38. Higher butyrate/acetate ratio produced more hydrogen gas generation. The Haldane equation model was used to find the optimum pH and fitted well with the experimental data$(r^2=0.98)$. The optimum pH and specific hydrogen production were 5.5 and 119.61 mL/g VSS/h.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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