A transgenic hairy root clone AG-04 of Astragalus membranaceus was obtained following co-cultivation of leaf explants with Agrobacterium rhizogenes ATCC15834. This clone was examined for its growth and production of cyclolanostane-type saponins, astragalosides I, II, and III, under various culture conditions. Among the five basal media tested, Shenk and Hildebrandt(SH)(18) medium was best for roots growth and astragalosides production. The maximum root biomass was obtained at inoculum size of 500 mg FRW per flask, initial sucrose concentration of 3%, and shaking speeds of 90 rpm. The astagalosides production was promoted when the hairy root clone AG-04 was cultured at shaking speeds of 120 rpm and light irradiation of 18 h. Astragaloside contents was also stimulated with high initial sucrose concentration, and the maximum astargalosides contents of 6.21 %/g DRW was obtained at initial sucrose concentration of 6%. The addition of chitosan(100 mg/L) to the culture medium was significantly increased astragalosides production. This was 2.1 times higher than that obtained in a control culture without chitosan.
This experiment was carried out to develop the mass propagation system for producing plug plantlets using stem cuttings of virus-tree microtubers in potato. Cocopeat, vermiculite, perlite and peatmoss were combined and used as plug nursery media to find out the best combination suitable for the growth of seedlings derived from microtubers. Seedling growth was favored in high temperature (above 2$0^{\circ}C$) and a long-day photoperiod(above 16 hours) condition, while stolons and microtubers formed in outdoor condition. Shoot and root multiplication was not affected by NAA 10mg /1 or IAA 10mg /1 treatment. At the early growth stage of plug plantlets, the number of leaves and roots and the length of root increased significantly when nodes from the upper (near to apex) part of shoots rather than from basal part were taken. But after transplanting, these differences among these characters were not observed. At ninety days after transplanting the plug plantlets in spring time, plant was around 70 to 80cm in height, and the number of stolons and tubers were ten and seven, respectively.
Fed-batch fermentations with different feeding media were carried out in order to increase the productivity of invertase expression using a recombinant Saccharomyces cerevisiae containing plasmid pRB58. Two batch cultures showed the expression of the SUC2 gene at a low concentration of glucose, suggesting that glucose concentration could be used as a control variable in a fed-batch operation mode. In the fed-batch culture by feeding the basal medium, cell mass and specific invertase activity did not increase much as compared with the simple batch culture. A series of fed-batch cultures revealed that the sucrose-supplemented medium increased cell mass whereas the enriched medium did specific invertase activity. To capitalize on the synergism of the sucrose-supplemented medium and the enriched medium, the sucrose-supplemented enriched medium was used as a feeding medium. The fed-batch culture using this medium resulted in a 2.4-fold increase in cell mass and a 1.9-fold enhancement in specific invertase activity compared with those of the batch culture. The increase in cell mass and specific invertase activity led to a marked increase in total invertase activity, 250U/ml, which was 6.3 times higher than that of the batch culture.
A Citrobacter sp. MB 2, azo dyes decolorizing bacterium, was isolated from the wastewater and soil and identified as Citrobacter sp.. It was examined that optimum conditions for culture media were 0.5% of sucrose, 1.0% of yeast extract, 0.1% of $K_2HPO_4$, 0.1% of $NaHCO_3$ per distilled water. The best efficient condition of culture was obtained at pH 7.0, $30^{\circ}C$ and aerobic shaking culture. The number of Citrobacter sp. MB2 in optimum medium was increased more than 7 fold compared to basal medium and 50 fold compared to nutrient broth. This strain was exhibited strong resistance against metal salts and antibiotics (ampicillin and penicillin G).
Since 2000 severe rots on aerial and underground parts of paprika (Capsicum annum L.) has occurred in most surveyed glasshouses throughout the country. A total of 56 isolates of a fungus were consistently isolated from various plant parts such as fruit, stem, branch, and root collected from 16 farms in five provinces. Anamorph stage of the fungus was identified as Fusarium solani based on its morphological characteristics. However, the fungus readily produced a sexual structure of perithecia on infected plant tissues and on agar media. Since the fungus formed abundant perithecium by a single isolate, it was considered as a homothallic strain of Nectria haematococca, the teleomorph of F. solani. Irregularly globose perithecia with orange to red color formed sparsely to gregariously on dead tissues of fruits and basal stems at the late infection stage, which is a diagnostic sign for the disease. Perithecia ranged from 125 to 220 ${\mu}m$ in diameter varied among isolates. Asci enveloping eight ascospores were cylindrical and measured 60-80x8-12 ${\mu}m$. Ellipsoid to obovate ascospores are two-celled and measured 11-18x4-7 ${\mu}m$. Ascospores were hyaline, slightly constricted at the central septum, and revealed longitudinal striations that is characteristic of the species. This fungus that has never been reported in Korea has previously become a threat to paprika cultivation because of its strong pathogenicity and nationwide distribution.
We have investigated several factors influencing adventitious shoot induction from the Populus deltodies bartr. leaf segments. To obtain in vitro materials, at first, stem segments from ex vivro were tested for axillary bud breaking on the five macronutrients levels of two differenr media. WPM was better both in bud breaking and leaf expansion than MS medium. The amount of NH$_{4}$NO$_{3}$ added in the medium did not seem to affect axillary bud breaking, significantly and subsequent shoot elongation from the stem segments of P. deltodies. However, other components in WPM might have played important roles in axillary bud breaking and shoot elongation. Regenerability from three sections (the distal, the middle and the base) of leaves cultured on WPM supplemented with TDZ and NAA combinations appeared to be different; middle and basal sections of leaves produced more organogenic sites than those of top section on WPM and those sesctions produced the highest ogranogenic sites on the same medium supplemented with 0.01 mg/l TDZ and 0.02mg.l NAA. Among 3 carbon sources tested for adventitious shoot elongation, fructose seemed to be stimulating the elongation of adventitious shoots. Sucrose and glucose added in the medium resulted in the necrosis which caused dying of adventitious shoots, eventually.
An efficient method for the rapid propagation of Smilax china from axillary buds was established. Plants with thick leafage were selected from Korea native S. china population. Axillary buds of S. china collected from selected plant and were cultured in various culture media (2MS, MS, 1/2MS, WPM, B5 and SH medium). Shoot was induced from axillary bud on MS basal medium after 4 weeks of culture. 1/2MS medium showed a higher growth rate than those of the others, while the lowest shoot growth was obtained in 2MS medium. Among the sucrose concentrations, 5% sucrose was the optimum level for shoots growth from axillay buds. Among cytokinins, $0.5mgL^{-1}$ 6-benzylaminopurine (BAP) treatment showed the best performance on shoot multiplication, yielding average shoot multiplication forming about 2.4. Rooting was induced directly near the base of the shoot on 1/2MS medium containing with three-auxins ${\alpha}-napthalene$ acetic acid (NAA), indole acetic acid (IAA) and ${\beta}-indolebutyric$ acid (IBA) (0.5 and $1.0mgL^{-1}$). The $1.0mgL^{-1}$ IBA treatments induced earliest rooting with maximum of root number and root growth. These rooted plantlets were successfully transferred to pots for 4 weeks hardening process, and were transferred to soil with above 90% survival rate.
The effects of rice hull (RH) powder on the anticarcinogenic activity of submerged-liquid cultures of Agaricus blazei Murill (AB) were assessed for mouse ascites cancers induced by mouse Sarcoma S-180 (S-180) cancer cells. Optimal growth of AB mycelia in the basal liquid culture medium, containing soybean meal, was achieved by culturing at $25^{\circ}C$ for 5 days, when evaluated by $\beta$-glucan content, Brix, and mycelial weight, relative to other culture conditions. Hot-water extract (HWE) of the submergedliquid culture of AB mycelia grown at $25^{\circ}C$ for 5 days exhibited a stronger anticarcinogenic activity, relative to HWE from other culture conditions. No such effects were obtained from AB mycelial cultures by alternative temperature-controlling cultures. Both cytotoxicity for S-180 cells and anticarcinogenic potentials for mouse ascites cancer of the HWE from AB mycelia grown in the basal medium containing 1% RH powder for 5 days at $25^{\circ}C$ were significantly (p<0.05) enhanced, relative to HWE from the AB mycelia culture of the basal medium without RH powder. These results indicate that HWE of submerged-liquid culture of AB mycelia, incubated in media containing 1% RH powder at $25^{\circ}C$ for 5 days, enhanced anticarcinogenic activity against S-180 cell-induced mouse ascites cancer, and suggest that RH powder is an excellent ingredient for the improvement of the anticarcinogenic potentials of the submerged-liquid culture of mushroom mycelia.
Park, Chang-Kyu;Tu, Qi;Cho, Ju-Hyun;Yu, Kwang-Won;Jeong, Heon-Sang;Lee, Hyeon-Yong;Jeong, Jae-Hyun
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.42
no.1
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pp.82-89
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2010
To obtain functional materials from a submerged culture of Hericium erinaceum, a suitable basal medium for flask culture was screened and the optimal culture conditions in a jar fermenter were investigated with the addition of ginseng extracts (GE) to the basal liquid medium. Of all tested basal liquid media, the mushroom complete medium (MCM) supplemented with 0.5% of GE produced the highest mycelial dry weight (MDW) of 5.91 g/L in the flask, which reached a plateau at $25^{\circ}C$, pH 5.5 after 10 days. The submerged culture conditions for the mass production of mycelia in a 50 L jar fermenter were also optimal at $25^{\circ}C$, pH 5.5, 120 rpm agitation speed and 0.4 vvm aeration rate. Under these conditions, the maximum MDW was produced, which reached a value of 4.28 g/L within 5 days. When we investigated the effects of the amount of GE in the MCM on the production of MDW in the jar fermenter, the addition of 5% GE (HE-GE-5) under the optimal culture conditions produced the maximum MDW (4.93 g/L). In addition, the crude polysaccharide of HE-GE-5 contained mainly neutral sugars (63.2%) with considerable amounts of uronic acid (19.3%) and a small amount of proteins (8.8%) and it had potent immunostimulation properties.
Lee, Su Young;Shin, Ju Young;Lee, Young Ah;Ahn, Chang Ho;Kim, Yae Jin;Park, Pil Man;An, Hye Ryun;Lee, Ka Youn;Jung, Hyun Hwan
Korean Journal of Plant Resources
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v.35
no.5
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pp.652-658
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2022
This study was conducted to induce somatic embryogenic callus (SEC) derived from petals in rose. The petal explants of 3 cultivars ('Ice Wing', 'Orange Eye' and 'Pink Beauty') with different flower colors were placed on three types media (MS, SH and WPM) supplemented with 11 mg/L 2,4-D, respectively, and then cultured in the dark for 47 days. Calluses were formed at explants of all three cultivars. Also, 'Ice Wing', which were cultured in the SH as the basal medium, showed the highest callus formation rate. However, somatic embryos were generated from only petal-derived callus of 'Ice Wing', which were induced on the WPM as the basal medium, transferred it to SH basal medium supplemented with 3 mg/L 2,4-D, and 300 mg/L L-proline, and cultured for 5 weeks. The SEC has been proliferated every four weeks at the subculture interval. In addition, as a results of making a comparison of expression of RhSERK3 and RhSERK4, which is used as signal for generation of somatic embryo from callus in rose, between the SEC and petal-derived callus from 'Ice Wing' by RT-qPCR, the former showed 10 times higher RhSERK3 expression and 700 times higher RhSERK4 expression than the latter.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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