교반배양시 배지에 첨가되는 에탄올의 농도가 증가할수록 $Cel^-$ mutant의 발생율이 증가하므로 $1.5\%$ 에탄올이 첨가된 배지의 경우 500 rpm보다 높은 교반속도를 유지해야 효과적으로 $Cel^-$ mutant의 발생이 억제되고 BC 생산량을 증가시킬 수 있다. 교반 배양과 같은 강한 shear stress의 배양환경 하에서는 진탕배양의 경우와 달리 $1.0\%$ 에탄올을 분할공급하더라도 BC 생산의 효율성을 높일 수 없었다. Phosphate ion이 첨가된 배지보다 첨가되지 않은 배지에서 BC 생산량이 더 높았다. 배지조성 중 아세트산의 농도를 $1.0\%$로 증가시키면 균체의 건조중량은 변화가 없었으나 BC 생산량이 감소되었다. 배양액의 pH 제어는 BC의 생산에는 영향을 미치지 않았으나 균체의 성장과 WSPS의 생산을 향상시켰다.
G. persimonensis-KJ145를 차용하여 BC 생산과 식초생산에 미치는 에탄올의 영향을 조사하였다. 그 결과 사과쥬스배지에 에탄올을 2%(v/v) 첨가하였을 때 BC의 생산성이 가장 좋았으며, 7%(v/v)를 첨가하였을 때 총산의 함량이 가장 높았다. BC와 식초를 동시 생산하기 위해서는 에탄올을 5%(v/v) 첨가하는 것이 가장 좋을 것으로 생각되며 발효과정 중의 식초 품질 변화에 대한 보다 자세한 연구가 요구되었다. BC와 식초 생산에 가장 효과적인 질소원은 CSL인 것으로 조사되었고 최적 농도는 15%(w/v)이었다. 배양시간의 영향을 조사한 결과 14일간 배양하는 것이 가장 많은 양의 BC를 생산하였으며, 최적조건에서 생산되는 BC 생산량은 7.55 g/L이었다.
This study was performed to determine effects of the supplementation of Kimchi lactic acid bacterial culture in extruded pellets (EP) on the growth, body composition, blood chemistry and immune response of olive flounder Paralichthys olivaceus. Four hundred eighty individuals averaging 16.1 g were randomly distributed into 12, 180 L flow-through tanks (forty fish per tank). Four concentrations of Kimchi lactic acid bacterial culture (KL) were prepared: Control (0%), 0.1%, 0.2% and 0.5%. Three concentrations (0.1%, 0.2% and 0.5%) of Kimchi lactic acid bacterial culture were each diluted to 10% of EP weight and then fully absorbed by EP for 10 minutes. Each diet was fed to triplicate groups of fish. Fish were hand-fed to apparent satiation twice a day for 8 weeks. At the end of the 8-week feeding trial, the plasma lysozyme and bacterial activities of fish were determined. In addition, the cumulative mortality of fish was monitored for 8 days after their artificial infection with Edwardsiella tarda. The weight gain, specific growth rate, feed efficiency ratio, protein efficiency ratio, protein retention, hepatosomatic index and condition factor of fish were not affected by dietary supplementation with KL. None of the proximate composition, plasma parameters, lysozyme or bactericidal activities of fish was affected by dietary supplementation with KL. However, the cumulative mortalities of fish fed EP containing 0.1% and 0.5% Kimchi lactic acid bacterial culture were relatively low compared to that of fish fed the control diet. In conclusion, dietary supplementation with KL did not effectively improve growth, feed utilization, body composition, plasma chemistry, lysozyme, bactericidal activities or immune response of olive flounder after E. tarda infection under these experimental conditions.
제주도에서 채집한 해양 해면 Halichondria panicea의 공생세균 군집구조를 배양에 의한 ARDRA와 비배양에 의한 DGGE 분석 방법에 의하여 조사하였다. 16S rRNA gene-ARDRA 분석을 위해 변형된 Zobell 배지와 Marine agar를 이용하여 120균주를 선별하고 제한효소, HaeIII와 MspI을 사용하여 ARDRA type을 구분하였다. ARDRA type으로부터 유래한 16S rRNA gene 염기서열 분석 결과, 알려진 세균 종과 96% 이상의 유사도를 나타내었으며 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Bacteroidetes, Firmicutes 등 3문 4강이 관찰되었다. 그 중 Alphaproteobacteria가 우점하였다. 같은 해면, H. panicea의 DGGE 분석을 위해 total genomic DNA로부터 16S rRNA gene를 증폭하여 DGGE fingerprinting을 수행한 결과 14개의 밴드가 관찰되었다. 각 밴드의 16S rRNA gene 염기서열은 알려진 세균의 염기서열과 100%의 유사성을 나타내었으며 대부분의 염기서열은 uncultured bacteria에 속하였다. DGGE 분석으로부터 미생물의 군집은 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Acidobacteria, Actinobacteira, Bacteroidetes, Cyanobacteria, Chloroflexi 등 6문 7강으로 나타났다. ARDRA와 DGGE 방법에 의해 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Bacteroidetes가 공통적으로 발견되었으나 전체적인 공생세균의 군집구조는 분석방법에 따라 차이를 나타내었다. 배양에 의한 방법보다 비배양 방법에서 더 다양한 세균군집구조를 나타내었다.
해양 해면 Asteropus simplex를 제주도에서 채집하여 배양에 의한 RFLP와 비배양에 의한 DGGE 분석 방법에 의해 세균군집 구조를 조사하였다. 16S rDNA-RFLP 분석을 위해 변형된 Zobell 배지와 MA를 이용하여 120균주를 선별하고 제한효소, HaeIII와 MspI을 사용하여 각각의 다른 RFLP 패턴으로 구분하였다. RFLP 패턴으로부터 유래한 16S rDNA 염기서열 분석결과, 알려진 세균 종과 94% 이상의 유사도를 나타내었으며 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Actinobacteria, Bacteroidetes, Firmicutes, 5개의 문이 관찰되었다. 그 중 Gammaproteobacteria가 우점하였다. 같은 해면, A. simplex의 DGGE 분석을 위해 total genomic DNA로부터 16S rDNA를 증폭하여 DGGE fingerprinting을 수행한 결과 12개의 서로 다른 밴드가 관찰되었다. 각 밴드의 16S rDNA 염기서열은 알려진 세균의 염기서열과 90% 이상의 유사성을 나타내었으며 대부분의 염기서열은 uncultured bacteria에 속하였다. DGGE 분석으로부터 미생물의 군집은 Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Deltaproteobacteria, Actinobacteria, Chloroflexi, Nitrospira, 7개의 문으로 나타났다. RFLP와 DGGE 방법에 의해 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Actinobacteria가 공통적으로 발견되었으나 전체적인 공생세균의 군집구조는 분석방법에 따른 차이를 나타내었다. 배양에 의한 방법보다 비배양 방법에서 더 다양한 세균군집구조를 나타내었다.
Bacterial cellulose는 초산균인 Gluconacetobacter xylinus에 의해 생산되며, 배양 배지의 표면에 나노섬유상의 막을 형성한다. 본 연구에서는 배지의 조성에서 탄소원을 달리하여 생산한 bacterial cellulose의 결정화도, 점도, 모폴로지와 역학적 물성을 살펴보았다. Gluconacetobacter sp. V6 균은 세 종류의 배양 배지에서 정치 상태로 배양되었다. 배양 배지로는 표준 Hestrin-Schramm 배지와 탄소원으로 glycerol 또는 molasses를 첨가한 개질 배지가 각각 사용되었다. 세포 성장과 셀룰로오스 수율은 molasses 배지와 glycerol 배지에서 증가하였다. Glycerol 배지를 사용한 배양은 결정화도와 고유점도, 파단응력과 같은 셀룰로오스의 물성을 향상시켰으나, molasses 배지를 사용한 배양은 셀룰로오스의 결정화도, 미결정의 크기, 고유점도를 감소시켰다. 요약하면, molasses 배지에서 셀룰로오스의 수율은 현저히 향상되었으나, 낮은 구조적 물성을 가졌다.
Aminoacyl tRNA synthetases of bacteria are known as potential targets for new anti-microbial agents. To isolate new inhibitors of bacterial methionyl-tRNA synthetases from natural sources, a new target-oriented screening system using whole cells which are over-expressing a target enzyme was developed. Approximately 8,000 culture broths of microorganisms from soils were tested by this screening system. Among them, ten culture broths was found to contain inhibitory activity against methionyl -tRNA synthetases of Escherichia coli. For the validation of the screening system, this new method was compared with in vitro enzymatic method. Seven out of 10 culture broths showed inhibitory activity against methionyl-tRNA synthetases of E. coli. This result showed that the new screening system was comparable to the enzyme assay. Thus we believe that our screening system as a new method can be applied for the screening of new antibiotics inhibiting bacterial methionyl-tRNA synthetases from natural products.
To elucidate the role and mechanism of microbes, we combined culture-dependent and culture-independent approaches to investigate differences in gut bacterial composition between sows and weaned pigs. Under anaerobic conditions, several nonselective and selective media were used for isolation from fecal samples. All isolated bacteria were identified and classified through 16S rRNA sequencing, and the microbiota composition of the fecal samples was analyzed by metagenomics using next generation sequencing (NGS) technology. A total of 278 and 149 colonies were acquired from the sow and weaned pig fecal samples, respectively. Culturomics analysis revealed that diverse bacterial genus and species belonged to Firmicutes, Actinobacteria, Proteobacteria, and Bacteroidetes were isolated from sow and weaned pigs. When comparing culture-dependent and culture-independent analyses, 191 bacterial species and 2 archaeal bacterial species were detected through culture-independent analysis, and a total of 23 bacteria were isolated through a culture-dependent approach, of which 65% were not detected by metagenomics. In conclusion, culturomics and metagenomics should be properly combined to fully understand the intestinal microbiota, and livestock-derived microbial resources should be informed by culturomic approaches to understand and utilize the mechanism of host-microbe interactions.
The differential enhanced degradation of cis- and trans-1,3-D was observed in the previous two studies performed by Ou et al. (1995) and especially Chung et al. (1999). This study was initiated to investigate the involvement of microorganisms in the differential enhanced degradation of the chemicals. As expected, microorganisms were responsible for the enhanced degradation of the chemicals. A mixed bacterial culture capable of degrading 1,3-D was isolated from an enhanced soil sample collected from a site treated with 1,3-D. Similar to the enhanced soil, the mixed culture degraded trans-1,3-D faster than cis-1,3-D. This mixed culture could not utilize cis- and trans-1,3-D as a sole source of carbon for growth. Rather, a variety of second substrates were evaluated to stimulate the differential enhanced degradation of the two isomers. As a result, the mixed culture degraded cis- and trans-1,3-D only in the presence of a suitable second substrate. Second substrates that had the capacity to stimulate the degradation included soil leachate, tryptone, tryptophan, and alanine. Other substrates tested, including soil extract, glucose, yeast extract, and indole (ailed to stimulate the degradation of the two isomers. Therefore, it appeared that the degradation of cis- and trans-1,3-D was a cometabolic process. The mixed culture was composed of four morphologically distinctive bacterial colonies.
The biological wastewater treatment system is known to have an important role in reducing the quantify of enteric virus in water environments. To clarify the roles of activated sludge microbes in decreasing the virus infectivity, the behavior of the virus in bacteria, protozoa, and metazoa was examined by pure or mixed culture system using poliovirus type 1(Lsc, 2ab strain). In the bacterial culture systems, the virus infectivity in the liquid phase decreased by a reversible adsorption of the virus to the bacteria or bacterial flocs. On the other hand, in the protozoa and the metazoa culture systems using T. pyriformis and P. erythrophthalma, respectively, with a variety of bacterial strains as prey, the main virus decrease mechanism of reversible adsorption in early stage was changed to irreversible predation, which was not eluted in this study. The virus decrease was more effective in the P. erythrophthalma culture system, which had high predation and floc forming abilities. However, in the mixed culture system of Z. ramigera and P. erythrophthalma, the more rapid reversible adsorption of virus to Z. ramigera flocs preceded the irreversible predation of P. erythrophthalma.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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