본 연구는 Planktonic growth inhibition test와 CDC Biofilm Reactor를 사용한 Biofilm assay를 통해 S-PRG filler를 함유하는 치면열구전색제의 S. mutans에 대한 항미생물 효과를 기존의 치면열구전색제와 비교하고자 하였다. S-PRG 필러를 함유하는 치면열구전색제인 BeautiSealant, 불소를 방출하는 치면열구전색제인 Clinpro$^{TM}$ sealant, 불소 미방출 치면열구전색제인 Concise$^{TM}$ sealant를 실험군으로 선정하였다. 성장억제평가를 위해 치면열구전색제를 사용하지 않은 군을 음성 대조군으로 설정하였으며, 3개의 실험군 모두 대조군보다 유의할 정도로 낮은 집락 형성 단위를 보였고, Clinpro$^{TM}$ sealant가 BeautiSealant와 Concise$^{TM}$ sealant보다 유의할 정도로 낮은 집락 형성 단위를 보였다. BeautiSealant와 Concise$^{TM}$ sealant 군간에는 유의한 차이가 관찰되지 않았다. 바이오 필름 평가에서도 Clinpro$^{TM}$ sealant군이 BeautiSealant와 Concise$^{TM}$ sealant군들에 비해 유의할 정도로 낮은 집락 형성을 보였으며, BeautiSealant와 Concise$^{TM}$ sealant 군간에 유의한 차이는 관찰되지 않았다. 본 연구 결과 S-PRG filler를 포함하는 치면열구전색제인 BeautiSealant는 기존의 불소방출 치면열구전색제에 비하여 낮은 항미생물 효과와 높은 바이오 필름 형성능을 보였다.
Buffet-Bataillon, Sylvie;Bonnaure-Mallet, Martine;De La Pintiere, Armelle;Defawe, Guy;Gautier-Lerestif, Anne Lise;Fauveau, Severine;Minet, Jacques
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권4호
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pp.779-781
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2010
After preliminary tests indicated an increased number of heterotrophic bacteria, we investigated possible sources of contamination in a neonatal intensive care unit (NICU) water distribution system. Scanning electron microscopic examination of flexible metallic hoses associated with the system revealed the presence of a biofilm; partial 16S rDNA sequencing revealed that the biofilm contained Blastomonas natatoria. Purgation of the water system three times a day, reinforced faucet cleaning, decreasing the cold water temperature to $12^{\circ}C$, and six repeated chlorinations at concentrations as high as 2 mg/l were not sufficient to eradicate the bacterial contamination. Replacing all of the rubber-interior flexible metallic hoses with teflon-lined hoses, followed by heating the water to $70^{\circ}C$, successfully controlled the bacteria.
Hydrogen peroxide has been used in cleaning the piping of an advanced high-purity water system that supplies ultra-high purity water (UHPW) for 16 megabyte DRAM semiconductor manufacturing. The level of hydrogen peroxide-resistant bacteria in UHPW water was monitored prior to and after disinfecting the piping with hydrogen peroxide. Most of the bacteria isolated after hydrogen peroxide disinfection were highly resistant to hydrogen peroxide. However, the percentage of resistant bacteria decreased with time. The hydrogen peroxide-resistant bacteria were identified as Micrococcus luteus, Bacillus cereus, Alcaligenes latus, Xanthomonas sp. and Flavobacterium indologenes. The susceptibility of the bacteria to hydrogen peroxide was tested as either planktonic cells or attached cells on glass. Attached bacteria as the biofilm on glass exhibited increased hydrogen peroxide resistnace, with the resistance increasing with respect to the age of the biofilm regrowth on piping after hydrogen peroxide treatment. In order to optimize the cleaning strategy for piping of the high-purity water system, the disinfecting effect of hydrogen preoxide and peracetic acid on the bacteria was evaluated. The combined use of hydrogen peroxide and peracetic acid was very effective in killing attached bacteria as well as planktonic bacteria.
This study evaluated the additive impact of ethylenediamine tetraacetic acid (EDTA) on erythrosine-mediated photodynamic therapy (PDT) against Streptococcus mutans (S. mutans) biofilm by measuring colony-forming units and applying confocal laser scanning microscopy. Fifty-six bovine incisors, free from dental caries or structural defects, were utilized in this study. Dentin specimens were created by cutting with a low-speed diamond disk under a continuous flow of water, resulting in dimensions of 6.0 mm × 3.0 mm × 2.0 mm. The specimens were categorized into 4 groups: Control, EDTA, PDT, and EDTA + PDT. S. mutans ATCC 25175 was employed to establish biofilm on the dentin specimens. A 17% EDTA solution was applied for 1 min. For PDT, erythrosine served as the photosensitizer. Finally, a light-emitting diode source (385 - 515 nm) was employed in this study. The PDT group exhibited a significantly lower bacterial count than both the control and EDTA groups (p < 0.001). The EDTA + PDT group demonstrated a significantly reduced bacterial count compared to the other 3 groups (p < 0.001). This study demonstrated that EDTA enhances the antimicrobial efficacy of PDT on S. mutans biofilm. Even at a low concentration of photosensitizer, the combination of EDTA and PDT yields a significant antibacterial effect.
Song, Won sub;Lee, Jae-Kwan;Park, Se Hwan;Um, Heung-Sik;Lee, Si Young;Chang, Beom-Seok
Journal of Periodontal and Implant Science
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제47권4호
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pp.219-230
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2017
Purpose: The purpose of this study was to compare the characteristics of single- and dualspecies in vitro oral biofilms made by static and dynamic methods. Methods: Hydroxyapatite (HA) disks, 12.7 mm in diameter and 3 mm thick, were coated with processed saliva for 4 hours. The disks were divided into a static method group and a dynamic method group. The disks treated with a static method were cultured in 12-well plates, and the disks in the dynamic method group were cultured in a Center for Disease Control and Prevention (CDC) biofilm reactor for 72 hours. In the single- and dual-species biofilms, Fusobacterium nucleatum and Porphyromonas gingivalis were used, and the amount of adhering bacteria, proportions of species, and bacterial reduction of chlorhexidine were examined. Bacterial adhesion was examined with scanning electron microscopy (SEM) and confocal laser scanning microscopy (CLSM). Results: Compared with the biofilms made using the static method, the biofilms made using the dynamic method had significantly lower amounts of adhering and looser bacterial accumulation in SEM and CLSM images. The proportion of P. gingivalis was higher in the dynamic method group than in the static method group; however, the difference was not statistically significant. Furthermore, the biofilm thickness and bacterial reduction by chlorhexidine showed no significant differences between the 2 methods. Conclusions: When used to reproduce periodontal biofilms composed of F. nucleatum and P. gingivalis, the dynamic method (CDC biofilm reactor) formed looser biofilms containing fewer bacteria than the well plate. However, this difference did not influence the thickness of the biofilms or the activity of chlorhexidine. Therefore, both methods are useful for mimicking periodontitis-associated oral biofilms.
Biofilm 내부의 항생제 내성 박테리아의 성장형태는 만성감염과 질병을 발생한다. 인위적 형성한 biofilm의 체외실험 모델 시스템 통한 항생제 침투 실험을 수행하였다. 항생제 내성 균주 (E. coli, S. aureus)는 항생제 내성균주 은행으로부터 획득하였다 Ca-alginate bead를 인위적 biofilm으로 사용하였고, 세포 생존률을 향상시키기 위해 공기 압축을 이용한 세포 포획 실험도 측정되었다. biofilm의 항생제 감수성은 항생제의 농도 따라 최저 저해 농도 (MIC)를 이용하여 측정되었다. bead생성에 따른 안정성은 bead를 형성하지 않은 세포와 비교하여 감소하였다. 항생제에 민감한 E. coli의 경우 시간이 지남에 따라 균체수도 감소하였으나, 항생제 내성 E. coli는 일정한 균체수를 유지하였다. bead형성 후 항생제 투여 효과는 항생제 내성이 있고, 낮은 농도의 항생제를 처리할수록 더 높은 생존률을 보였다.
This study aimed to investigate the biofilm formation, bacterial regrowth, and bacterial community structure in the granular-activated carbon (GAC) filter adsorbers (FAs) used in water treatment plants. In 2005 and 2006, raw water, settled water, GAC FA by depth, and filtered water were collected twice a year from water treatment plants (WTPs) B and S. The number of heterotrophic bacteria, including mesophilic and psychrophilic bacteria, in such collected waters was investigated along with the total number of coliforms therein. Heterotrophic bacteria were detected in most samples, mainly at the surface layers of the GAC FAs, and fewer such bacteria were found in the lower and bottom layers. An increase in the bacterial number, however, was observed in the samples from various depths of the GAC FAs in WTPs B and S compared with the surface layers. An increase in the bacterial number was also detected in the filtered water. This may indicate that there is a regrowth of the bacteria in the GAC FA. Considering, however, that heterotrophic bacteria were not found in the filtered water, it can be deduced that most bacteria are removed in the chlorination process. Coliforms were detected at the surface layer of the GAC FAs, but their regrowth was not observed. MicroLog systems were used to identify the bacteria community distribution. Eight genera and 14 species, including Pseudomonas spp., were detected in WTP B, and 8 genera and 9 species, including Aeromonas spp., in WTP S. Further studies are required to elucidate their role in the biofilms in water treatment processes.
녹농균(Pseudomonas aeruginosa)과 비브리오 불니피쿠스균(Vibrio vulnificus)은 그람 음성의 병원균들로써, quorum sensing(QS) 기전을 통해 병원성을 발현하는 세균들이다. 이들 병원균의 감염은 많은 경우 생물막 형성에 의해 매개된다고 알려져 있는데, 이에 본 연구에서는 P. aeruginosa와 V. vulnificus를 대상으로 QS 기전의 유무에 따른 생물막 형성의 시간적 추이를 분석해 보았다. 그 결과 P. aeruginosa의 경우 QS 기전이 결핍된 균주가 야생형에 비해 초기 부착은 더 잘 하였으나, 이후 생물막 구조의 성숙 능력은 야생형에 비해 현저히 떨어짐을 알 수 있었다. 이러한 특성 때문에 야생형과 QS 결핍 균주의 생물막 형성을 시간의 추이에 따라 정량적으로 비교해 보면 초기 10시간 정도 까지는 QS 결핍 균주가 더 많은 생물막을 형성하다가, 이후 야생형이 더 많이 생물막을 형성하는 역전 현상이 관찰되었다. V. vulnificus는 P. aeruginosa와는 달리 QS 결핍 균주가 야생형보다 더 많은 생물막을 형성한다고 보고된 균주이다. 이 균주에서 같은 방식으로 생물막 형성을 조사해 본 결과, 108시간의 장시간 동안에도 항상 QS 결핍 균주가 야생형 보다 더 많은 생물막을 형성하여, 역전 현상은 관찰되지 않았다. 이 결과는 P. aeruginosa의 경우에는 QS 기전이 초기 부착은 저해하는 방향으로, 성숙과정은 촉진시키는 방향으로 작용하며, V. vulnificus에서는 일관되게 생물막 형성을 저해하는 방향으로 작용함을 보여주는 것이다. 따라서 생물막 제어를 위한 타겟으로 QS기전을 이용할 때에는 제어하고자 하는 생물막 형성 단계와 세균 종을 함께 고려하여야 한다고 제안한다.
Objectives: The quorum-sensing-inhibitory and anti-biofilm activities of the methanol extract of E. globulus leaves were determined against clinically isolated multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa. Methods: The preliminary anti-quorum-sensing (AQS) activity of eucalyptus was investigated against a biosensor strain Chromobacterium violaceum ATCC 12472 (CV12472) by using the agar well diffusion method. The effect of sub-minimum inhibitory concentrations (sub-MICs) of the methanol extract of eucalyptus on different quorum-sensing-regulated virulence factors, such as swarming motility, pyocyanin pigment, exopolysaccharide (EPS), and biofilm formation, against clinical isolates (CIs 2, 3, and 4) and reference PA01 of Pseudomonas aeruginosa were determined using the swarm diameter (mm)-measurement method, chloroform extraction method, phenol (5%)-sulphuric acid (concentrated) method, and the microtiter plate assay respectively, and the inhibition (%) in formation were calculated. Results: The preliminary AQS activity (violacein pigment inhibition) of eucalyptus was confirmed against Chromobacterium violaceum ATCC 12472 (CV12472). The eucalyptus extract also showed concentration-dependent inhibition (%) of swarming motility, pyocyanin pigment, EPS, and biofilm formation in different CIs and PA01 of P. aeruginosa. Conclusion: Our results revealed the effectiveness of the E. globulus extract for the regulation of quorum-sensing-dependent virulence factors and biofilm formation at a reduced dose (sub-MICs) and suggest that E. globulus may be a therapeutic agent for curing and controlling bacterial infection and thereby reducing the possibility of resistance development in pathogenic strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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