본 연구는 환경샘플 중 병원균을 진단하기 위한 목적을 가진다. 최소 챔버 칩에서 환경 샘플 중 병원균을 농축하고 mRNA를 증폭하여 효과적이고 간단한 진단방법을 고안하였다. PDMS로 면적 $1.5\;cm{\times}\;1.5\;cm$, 높이 $100\;{\mu}L$의 칩을 제작하여 유리에 부착시켰다. RNase에 의한 진단 오류 또는 실패를 막고자 RNase away 처리를 하고, RNA와 PDMS의 결합을 막기 위해 BSA 처리를 하였다. 수질에 있는 병원균은 매우 적은 농도로 존재하므로 농축의 과정이 필요하다. 농축의 방법에는 여러 가지가 있으나 본 연구에서는 유리 비드를 칩 내에 삽입하고 저농도의 시료를 주입함으로서 고농도로 농축을 하는 방법을 사용하였다. 그러나 부피가 작은 칩 내에서 수행하기에는 내부 압력이 작용하여 문제가 발생하여 $100\;{\mu}m$의 유리 비드를 사용하고 유리비드의 칩 내부 이탈을 방지하기 위하여 댐을 만들어 농축에 가장 적합한 칩의 형태를 잡았다. 시료의 주입속도에 따라 내부 압력이 상승하여 댐의 기능이 상실하여 유리 비드가 이탈하게 되므로 그것을 방지하기 위하여 칩 내에 댐을 강화하여 만들고 내부압력 증가가 방지되는 최적의 댐을 개발하여 시료의 주입 속도 5 mL/min까지 유리 비드의 이탈을 막았다. 유리 비드에서의 RNA 농축은 pH 5에서 효과적이고 pH가 증가할수록 유리 비드와 RNA의 결합이 끊어지는 현상을 보였으므로 시료에 pH 5의 버퍼를 첨가하여 농축을 진행하고 중성의 NASBA 용액을 주입하여 유리비드에서 탈착된 농축된 고농도의 RNA를 증폭하였다. NASBA는 항온 수조에서 온도에 변화 없이 $41^{\circ}C$에서 1시간 30분 동안 진행하며 증폭된 mRNA는 직접 확인하였다. 이 방법은 LOC 기술을 적용하여 저농도의 시료를 효과적으로 측정할 수 있도록 편리한 바이오 칩을 개발함으로써 대용량의 샘플 중 극 저농도의 대장균을 효과적으로 검출할 수 있는 장점을 가지고 있다.
본 연구는 지카바이러스, 메르스, coronavirus disease-19 (COVID-19) 등의 감염병 방역 및 의료현장에서 사용할 수 있는 의료용 공기정화호흡기(powered air purifying respirators, PAPR)의 항균성 보호복의 후드와 필터를 개발하였다. PAPR은 전동팬 본체 및 필터, 배터리팩, 후드로 구성되며 보호복의 후드 소재는 뛰어난 흡습성, 풍압, 외부충격을 견딜 수 있는 폴리프로필렌 슐폰레이스(spunlace) 부직포 직물(SFS)을 사용하였다. 사용자의 감염위험을 낮추기 위해 후드의 외피에는 피톤치드계 물질을 사용하여 99.9%의 안티-박테리얼(antibacterial) 효과를 얻었으며 내피에는 친수가공을 하여 흡수성을 25% 향상시켰다. 의료용 보호복 후드에 필요한 인공혈액 침투저항성, 건조미생물 침투저항성, 습식세균 침투저항성, 그리고 박테리오파아지 침투저항성을 평가한 결과 2~6 단계의 합격평가를 받았다. 한편, 항균 처리된 슐폰레이스(spunlace filter, SF) 헤파 필터(high efficiency particulate air, HEPA)의 성능을 평가한 결과 우수한 항균성, 분진제거율, 차압 효과를 확인하였다.
Zoonoses are those diseases and infections that are naturally transmitted between vertebrate animals and man. At present, approximately 175 diseases caused by virus, rickettsia, bacteria, protozoa and helminthes as well as some of arthropods and the number is continually increasing. Although zoonoses are generally recognized as significant health problems, the actual prevalence and incidence of zoonotic infections is difficult to determine. Medical services in a rural area are scarce and ill persons may have little chance to see a physician. Furthermore, a lack of physician awareness and of appropriate diagnostic support is made often misdiagnosis. In rural Korea, parasitic disease is still important subject in the field of zoonotic infections considering its number and morbidity. Recently there was conspicuous reduction of soil-transmitted parasitic diseases (i.e. ascariasis. hookworms, trichuriasis), but clonorchiasis. intestinal trematodiases and taeniasis are a considerable problem. This is often significantly related to human behavioral patterns based on socio-economic and cultural conditions and linked with the local biologic and physical environment. The most of all parasitic zoonoses to man and animals are the food-transmitted parasitic diseases, and domestic animals such as dog, cat, pig, as well as fat and some mammals, ruminants and birds are act as reservoir hosts. In the present topics, current problems of parasitic zoonoses caused by protozoan infections (i. e. toxoplasmosis, pneumocystosis and cryptosporidiosis) which are the most common opportunistic in AIDS or immunocompromised persons, trematode infections (i.e. clonorchiasis, paragonimiasis and some intestinal tremadodiases). cestode infections such as cysticercosis and sparganosis, and some nematode infections of anisakiasis, thelaziasis and strongyloidiasis, are discussed here those on the occurrence in man and animals and the source of transmission as well as prevention and control measures in Korea.
Rapid immunochromatography test (RICT) kits are commonly used for the diagnosis of canine parvovirus (CPV) because of their rapid turnaround time, simplicity, and ease of use. However, the potential for cross-reactivity and low sensitivity can yield false-positive or false-negative results. There are 4 genotypes of CPV. Therefore, evaluating the performance and reliability of RICT kits for CPV detection is essential to ensure accurate diagnosis for appropriate treatment. In this study, we evaluated the performance of commercial RICT kits in the diagnosis of all CPV genotypes. The cross-reactivity of 6 commercial RICT kits was evaluated using 8 dog-related viruses and 4 bacterial strains. The limit of detection (LOD) was measured for the 4 genotypes of CPV and feline panleukopenia virus. The tested kits showed no cross-reactivity with the 8 dog-related viruses or 4 bacteria. Most RICT kits showed strong positive results for CPV-2 variants (CPV-2a, CPV-2b, and CPV-2c). However, the 2 kits produced negative results for CPV-2 or CPV-2b at a titer of 105 FAID50/mL, which may result in inaccurate diagnoses. Therefore, some kits need to improve their LOD by increasing their binding efficiency to detect all CPV genotypes.
Foreign molecules, including viruses and bacteria-derived toxins, can also induce airway inflammation. However, to the best of our knowledge, the roles of these molecules in the development of airway inflammation have not been fully elucidated. Herein, we investigated the precise role and synergistic effect of virus-mimicking double-stranded RNA (dsRNA) and staphylococcal enterotoxin B (SEB) in macrophages and epithelial cells. To identify cytokine expression profiles, both the THP-1-derived macrophages and BEAS-2B epithelial cells were stimulated with dsRNA or SEB. A total of 21 cytokines were evaluated in the culture supernatants. We observed that stimulation with dsRNA induced cytokine production in both cell types. However, cytokine production was not induced in SEB-stimulated epithelial cells, compared to the macrophages. The synergistic effect of dsRNA and SEB was evaluated observing cytokine level and intracellular phospho-signaling. Fifteen different types were detected in high-dose dsRNA-stimulated epithelial cells, and 12 distinct types were detected in macrophages; those found in macrophages lacked interferon production compared to the epithelial cells. Notably, a synergistic effect of cytokine induction by co-stimulation of dsRNA and SEB was observed mainly in epithelial cells, via activation of most intracellular phosphor-signaling. However, macrophages only showed an accumulative effect. This study showed that the type and severity of cytokine productions from the epithelium or macrophages could be affected by different intensities and a combination of dsRNA and SEB. Further studies with this approach may improve our understanding of the development and exacerbation of airway inflammation and asthma.
Objective: The ecosystem of an animal farm is composed of various elements, such as animals, farmers, plants, feed, soil, and microorganisms. A domesticated animal's health is largely connected with the reservoir of bacteria and viruses in animal farms. Although a few studies have focused on exploring the gut microbiome of animals, communities of microbiota and viruses in feedlots have not been thoroughly investigated. Methods: Here, we collected feces and dust samples (4 groups: cattle feces, C_F; horse feces, H_F; cattle dust, C_D; and horse dust, H_D) from cattle and horse farms sharing the same housing and investigated their microbiome/virome communities by Illumina sequencing. Results: Dust groups (C_D and H_D) showed higher microbial diversity than feces groups (C_F and H_F) regardless of animal species. From the microbial community analysis, all the samples from the four groups have major phyla such as Proteobacteria (min 37.1% to max 42.8%), Firmicutes (19.1% to 24.9%), Bacteroidetes (10.6% to 22.1%), and Actinobacteria (6.1% to 20.5%). The abundance of Streptococcus, which commonly recognized as equine pathogens, was significantly higher in the horse group (H_D and H_F). Over 99% among the classified virome reads were classified as Caudovirales, a group of tailed bacteriophages, in all four groups. Foot-and-mouth disease virus and equine adenovirus, which cause deadly diseases in cattle and horse, respectively, were not detected. Conclusion: Our results will provide baseline information to understand different gut and environmental microbial ecology between two livestock species.
Heat stroke in a dog is a life-threatening syndrome characterized by a high body temperature over $41^{\circ}C$, by the central nervous system dysfunction, and by multiple organ dysfunction. A 11-month-old male American Pit Bull Terrier was presented to clarify the cause of death to diagnostic laboratory. This dog showed clinical signs such as high body temperature ($42^{\circ}C$), severe tachypnea, hematochezia, epistaxis and hemoptysis after transportation at hot summer time. At necropsy, there were hemorrhages in skin, serosa of stomach and small intestine, and also dark red fluid in lumen of intestine. Histopathologic examination revealed extensive hemorrhages in stomach, muscle, skin, and tongue. In microbiology, pathologic bacteria such as Pasteurella, Boedetella, Salmonella, Clostridium, and circulating virus in Korea such as CDV, CIV, CAV, CHV, CCV, CPIV were negative except CPV. There were many gross and microscopic lesions suggesting hest stroke while pathologic agents and related lesions were not detected. Therefore we diagnosed this case as heatstroke.
Using bioinformatic tools for searching the massive genome databases, it is possible to Identify new genes in few minutes for initial discoveries based on evolutionary conservation, domain homology, and tissue expression patterns, followed by further verification and characterization using the bench-top works. The development of high-density two-dimensional arrays has allowed the analysis of the expression of thousands of genes simultaneously in the humans, mice, rats, yeast, and bacteria to elucidate the genes and pathways involved in physiological processes. In addition, rapid and automated protein identification is being achieved by searching protein and nucleotide sequence databases directly with data generated from mass spectrometry. Recently, analysis at the bio-chemical level such as biochemical screening and metabolic profiling (Biochemical genomics) has been introduced as an additional approach for categorical assignment of gene function. To make advantage of recent achievements in computational approaches for facilitated gene discoveries in the avian model, chicken expression sequence tags (ESTs) have been reported and deposited in the international databases. By searching EST databases, a chicken heparanase gene was identified and functionally confirmed by subsequent experiments. Using combination of sub-tractive hybridization assay and Genbank database searches, a chicken heme -binding protein family (cSOUL/HBP) was isolated in the retina and pineal gland of domestic chicken and verified by Northern blot analysis. Microarrays have identified several host genes whose expression levels are elevated following infection of chicken embryo fibroblasts (CEF) with Marek's disease virus (MDV). The ongoing process of chicken genome projects and new discoveries and breakthroughs in genomics and proteomics will no doubt reveal new and exciting information and advances in the avian research.
Pathogenic microbial foodborne disease outbreaks (PMFBDOs) have increased in many countries, the boom in food service establishment is not matched by effective food safety and control. In this study, we investigated the current state and the epidemic aspects of FBDOs in Korea and Japan. In Korea, the average prevalence rate of foodborne disease (FBD) was 15.0 per 100,000 population and cases per outbreak of FBD was 57.0. During the same period in Japan, the prevalence rate showed an average of 24.9, and the cases per outbreak were 16. When both prevalence rate and cases per outbreak were compared, the prevalence rate in Japan was much higher than that in Korea (p<0.01). However, average cases per outbreak of FBD in Japan were much lower than those in Korea (p<0.01). In Korea, outbreaks of FBDs were more common in spring (p<0.01), while in Japan, more frequent in summer and winter (p<0.01). Outbreaks of FBD occurred largely through restaurant and school foods (32.0% and 27.5%) in Korea. In Japan, the proportion of the outbreak cases in the restaurant and home were 23.7% and 12.1%, and cases of unknown causes of FBDs were 48.2%, respectively. Bacteria were the major causes of infection in both countries. The prevalence of PMFBDOs by Salmonella spp. Vibrio parahemolyticus and Staphylococcus aureus were much higher in Korea, while those by Camphylobacter spp. and SRSV were more common in Japan. The causes by virus were more frequent in Japan (13.7%) than in Korea (7.7%). The prevalence of FBDs in Korea and Japan showed characteristic differences, especially in the PMFBDOs due to such factors as geography, climate, culture, diet and food management.
The purpose of the present work is to investigate the removal characteristics of positively charged filters for capturing negatively charged particles such as bacteria and virus in water. In order to reduce the pressure drop and increase the filtration efficiency, the filter media, modified by charge modifier having positive functional groups, is developed and evaluated. Improved liquid filters have been developed with the modified surface charge to capture and adsorb particles by electrokinetic interaction between the filter surface and particles contained in an aqueous liquid. The positively charged filter media is composed of glass fiber, cellulose and poly-ethylenimine resin for positively charging with the variation of volume ratio. The zeta potential value of the positively charged filter is +37.92 mV at the glass fiber and cellulose content ratio of 50 : 50 with resin content of 100%, while that of the PSL test particle is -23.5 mV at pH 7. The removal efficiency of the electro-positively charged filter is 98% for PSL particles of 0.11 ${\mu}m$, while that of the negatively charged filter is 7%. The positively charged filter media showed the potential to be an effective method for removing fine particles from the contaminated water for liquid filtration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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