Siddiqui, Naushaba;Shujatullah, Fatima;Khan, Haris M.;Rabbani, Tamkin;Khan, Parvez A.
Parasites, Hosts and Diseases
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v.52
no.5
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pp.487-491
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2014
Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan that is distributed worldwide. Recently, several tests for avidity of Toxoplasma IgG antibodies have been introduced to help discriminate between recently acquired and distant infections. The study was conducted in Jawaharlal Nehru Medical College and Hospital, India from February 2011 to September 2012. Serum specimens were subjected to Toxoplasma IgM ELISA and IgG avidity ELISA test. Out of 48 patients with abortions, 17 (35.4%) were positive for IgM ELISA, and 8 (16.6%) had low IgG avidity antibodies. Out of 48 patients with other obstetric problems, 23 (47.9%) were positive for IgM ELISA, and 17 (35.4%) had low IgG avidity antibodies. Combining both groups on avidity test, only 25 of 40 (62.5 %) IgM-positive women had low-avidity IgG antibodies suggesting a recent T. gondii infection in these women. More importantly, 15 (37.5%) of the IgM-positive women had high-avidity antibodies suggesting that the infection was acquired before gestation The relation of IgM seropositivity with the following risk factors was not found to be statistically significant; contact with cats (0.13), non-vegetarian food habits (0.05), and low socio-economic status (0.49). While, for IgG avidity ELISA, only contact with cats (0.01) was significantly associated with seropositivity. All other risk factors have P-values of >0.05 (not significant). IgG avidity test when used in combination with IgM test was a valuable assay for diagnosis of ongoing or recently acquired T. gondii infection in India.
Toxoplasmosis has been well known as an important human infection to consider especially in pregnant women. Although many serologic methods are available, the diagnosis of toxoplasmosis can be extremely difficult. The presence of increased levels of Toxoplasma-specific IgG antibodies indicates an infection, but it does not differentiate between a recent and past infection. The purpose of our study was to compare the performance of the ELISA T. gondii IgG/IgM test, a widely used enzyme-linked immunosorbent assay, to the ELISA IgG avidity method. One hundred and four serum samples (from 38 males and 66 females) were tested and evaluated from symptomatic patients (chorioretinitis, lymphadenopathy), and from women in their first trimester of pregnancy who were suspected of having toxoplasmosis, The high IgG avidity and ELISA IgG antibody levels were in agreement for 51 of the specimens (49.0%). Thirty-eight discrepant (borderline) results from the IgG avidity method were positive for IgM (3 specimens) and IgG (37 specimens). Interestingly, out of the eight serum samples that were positive for both IgG and IgM antibodies, two samples were low IgG avidity, and three samples were borderline. There was no statistically significant relation observed between the results of the IgG avidity method and the ELISA IgG test, and the IgG avidity method and ELISA IgM test (X$^2$=1.987; p=0.370 and X$^2$=2.152; p=0.341, respectively). The IgG avidity method was considered easy to perform and an acceptable approach for the differentiation of discrepant results (recent/chronic) and for the current detection of T. gondii antibodies. We concluded that the determination of IgG avidity is a helpful tool for the diagnosis of the ocular form of toxoplasmosis and it is a safe method for screening this disease in the first trimester of pregnancy.
Rahbari, Amir Hossien;Keshavarz, Hossien;Shojaee, Saeedeh;Mohebali, Mehdi;Rezaeian, Mostafa
Parasites, Hosts and Diseases
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v.50
no.2
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pp.99-102
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2012
Serum samples, 100 in the total number, were collected from different laboratories in Tehran, Iran and tested for anti-Toxoplasma specific IgG and IgM antibodies using indirect immunofluorescent antibody test (IFAT). Using the IgG (chronic) and IgM (acute) positive samples, the IgG avidity test was performed by ELISA in duplicate rows of 96-well microtiter plates. One row was washed with 6 M urea and the other with PBS (pH 7.2), then the avidity index (AI) was calculated. Sixteen out of 18 (88.9%) sera with acute toxoplasmosis showed low avidity levels ($AI{\leq}50$), and 76 out of 82 (92.7%) sera in chronic phase of infection showed high avidity index (AI>60). Six sera had borderline ranges of AI. The results showed that the IgG avidity test by ELISA could distinguish the acute and chronic stages of toxoplasmosis in humans.
Purpose: This study investigated whether the metabolic avidity of primary tumors and/or metastatic lymph nodes (LNs) measured by $^{18}F$-fluorodeoxyglucose ($^{18}F-FDG$) positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) was related to survival after surgery in patients with advanced gastric cancer (AGC). Materials and Methods: One hundred sixty-eight patients with AGC who underwent preoperative $^{18}F-FDG$ PET/CT and curative resection were included. The $^{18}F-FDG$ avidity of the primary gastric tumor and LNs was determined quantitatively and qualitatively. The diagnostic performance of $^{18}F-FDG$ PET/CT was calculated, and the prognostic significance of $^{18}F-FDG$ avidity for recurrence-free survival (RFS) and overall survival (OS) was assessed. Results: In all, 51 (30.4%) patients experienced recurrence, and 32 (19.0%) died during follow-up (median follow-up duration, 35 months; range, 3-81 months); 119 (70.8%) and 33 (19.6%) patients showed $^{18}F-FDG$-avid primary tumors and LNs, respectively. $^{18}F-FDG$ PET/CT showed high sensitivity (73.8%) for the detection of advanced pathologic T ($pT{\geq}3$) stage and high specificity (92.2%) for the detection of advanced pN (${\geq}2$) stage. $^{18}F-FDG$ avidity of LNs was significantly associated with RFS (P=0.012), whereas that of primary tumors did not show significance (P=0.532). Univariate and multivariate analyses revealed that $^{18}F-FDG$ avidity of LNs was an independent prognostic factor for RFS (hazard ratio=2.068; P=0.029). Conclusions: $^{18}F-FDG$ avidity of LNs is an independent prognostic factor for predicting RFS. Preoperative $^{18}F-FDG$ PET/CT can be used to determine the risk and prognosis of patients with AGC after curative resection.
This prospective study was aimed to detect acute and chronic ocular toxoplasmosis by comparison of anti-Toxoplasma gondii IgM and IgG antibody levels and IgG avidity test. One hundred and seventeen patients with ocular toxoplasmosis (OT) who referred to the Farabi Eye Hospital, Tehran, Iran were included in this study. Of the patients, 77 cases were positive for anti-T. gondii IgG, and 8 cases were positive for anti-T. gondii IgM. IgG avidity test revealed 11, 4, and 102 cases were low, intermediate, and high, respectively, and 6.8% and 9.4% of cases were positive for IgM and IgG avidity tests, respectively (P=0.632). Agreement (Kappa value) between paired tests IgG-IgM, IgG-IgG avidity, and IgM-IgG avidity was 0.080, 0.099, and 0.721, respectively (P<0.05). This study showed that conventional serologic tests (IgM and IgG levels) and IgG avidity correlate well each other and can be used to differentiate recent infections from old OT. It seems that reactivated old infections rather than recently acquired infections are majority of Iranian OT patients.
The present study aimed at evaluating serum immunoglobulin G (IgG) avidity to Porphyromonas gingivalis in elderly patients with mild and severe chronic periodontitis. The avidity of antibodies against P. gingivalis present in the sera of 18 patients with mild chronic periodontitis and 18 patients with severe chronic periodontitis was evaluated using an ammonium thiocyanate-dissociated enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results showed that the mean absorbance value in serum IgG antibody titers was significantly higher in the severe chronic periodontitis group than in the mild chronic periodontitis group ($198{\pm}35ELISA$ unit [EU] vs. $142{\pm}32EU$, p < 0.01). However, there was no significant difference between the two groups in antibody avidity ($65{\pm}57EU$ vs. $54{\pm}27EU$). These findings suggest that humoral immune responses to P. gingivalis between mild and severe chronic periodontitis in elderly patients are characterized by the differences in the quantity rather than the quality of the antibodies.
Objectives: Measurement of the incidence of the human immunodeficiency virus (HIV) is very important for epidemiological studies. Here, we determined the recency period with the AxSYM avidity assay and the BED-capture enzyme immunoassay (BED-CEIA) in Korean seroconverters. Methods: Two hundred longitudinal specimens from 81 seroconverters with incident HIV infections that had been collected at the Korea National Institute of Health were subjected to the AxSYM avidity assay (cutoff = 0.8) and BED-CEIA (cutoff = 0.8). The statistical method used to estimate the recency period in recent HIV infections was nonparametric survival analyses. Sensitivity and specificity were calculated for 10-day increments from 120 days to 230 days to determine the recency period. Results: The mean recency period of the avidity assay and BED-CEIA using a survival method was 158 days [95% confidence interval (CI), 135-181 days] and 189 days (95% CI, 170-208 days), respectively. Based on the use of sensitivity and specificity, the mean recency period for the avidity assay and BED-CEIA was 150 days and 200 days, respectively. Conclusion: We determined the recency period to estimate HIV incidence in Korea. These data showed that the nonparametric survival analysis often led to shorter recency periods than analysis of sensitivity and specificity as a new method. These findings suggest that more data from seroconverters and other methodologies are needed to determine the recency period for estimating HIV incidence.
Multivalent and multi-specific antibodies can provide valuable tools for bio-medical research, diagnosis and therapy. In antigen-antibody interactions, the avidity of antibodies depends on the affinity and the number of binding sites.$^1$ As artificial multivalent antibody agents, single chain Fv-streptavidin fusion tetramer proteins $(scFv-SA)_4$ have been previously tested.$^{1,\;2}$ Although, the Fab domain is known to be more stable than scFv in animal models,$^{3,\;4}$ it has never been used to make a multivalent agent with a streptavidin fusion. In this study, we prepared tetra-valent $(Fab-cSA)_4$ by fusing Fab with core streptavidin (cSA). This molecule was made using inclusion body production, refolding and chromatography purification. Affinities of the Fab-cSA tetramer and a scFv-cSA tetramer to a cell surface antigen were compared by ELISA using biotin-HRP. The Fab-cSA tetramer showed higher binding avidity than the scFv-cSA tetramer. The higher binding avidity of the Fab-cSA tetramer demonstrates its potential as a therapeutic agent for target-specific antibody therapy.
Anti-P. gingivalis immune sera were obtained from mice immunized with either P. gingivalis alone, or F. nucleaturm followed by P. gingivalis. Two groups of immune sera were examined for binding capacity to P. gingivalis biofilm by confocal laser scanning microscope, Antibody avidity index was also determined for each immune sera. The results indicated that prior immunization of mice with F. nucleaturm impaired P. gingivalis-specific immune sera in binding capacity to biofilm and antibody avidity to P. gingivalis. Elevated antibody responses in patients with destructive periodontal disease has often been related to suboptimal level of protective antibody $(opsonophagocytosis)^{1-3)}$ while post-immune sera obtained with experimental animals using a single periodontal pathogen demonstrated satisfactory levels of protective function against the homologous bacterial $challenge^{4,5)}$.The reason is unclear why elevated IgG responses in periodontal patients to periodontal pathogens do not necessarily reflect their protective function. Such an immune deviation might be derived from the fact that destructive periodontal disease is cumulative result of immunopathologic processes responding to an array of different colonizing microorganisms sequentially infecting in the subgingival environmental niche. Fusobacterium nucleaturm is one of the key pathogens in gingivitis, in the transitional phase of conversion of gingivitis into destructive periodontitk, and in adult $periodontitis^{6-8)}$. It also plays a central role in coaggregation with other important microbial species in subgingival $area^{6,9,10)}$ as well as in $biofilm^{11)}$, especially with Porphyromonas gingjvalis in synergism of virulence in human periodontal disease or in animal $models^{12-14)}$. This organism has also been reported to have immune modulating activity for secondary immune response to Actinobacillus $actinomycetemcomitans^{15)}$. It is presumed that sequential colonization and intermicrobial coaggregation between intermediate and late colonizers could potentially modulate the immune responses and development of specific T cell phenotypes in periodontal lesions. We have recently demonstrated the skewed polarization of P. gingivalis-specific helper T cell clones in mice immunized with F. nucleaturm followed by P. $gingivalis.^{16)}$. Consequently F. nucleaturm may initially prime the immune cells and modify their responses to the successive organism, P. gingivalis. This could explain why one frequently observes non-protective serum antibodies to P. gingivalis in periodontal patients in contrast with those obtained from animals that were immunized with $P.gingivalis\;alone^{17)}$. The present study was performed to investigate the immune modulating effect of F. nucleatum on serum binding to experimental biofilms and the avidity of anti-P. gingivalis antibody.
Park, Dong-Woon;Kim, Eon-Dong;Kim, Sung-Heon;Han, Jae-Yong;Kim, Jin-Kyoo
Korean Journal of Microbiology
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v.47
no.4
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pp.328-334
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2011
Leucine zipper motif consists of multiple periodic leucine residues, which forms amphipathic alpha helix. The hydrophobic nature of leucine zipper motif can dimerize proteins which contain this motif. Leucine zipper motif addition at C-terminus of single-chain Fv (ScFv) antibody induces its dimerization. Since the dimeric ScFv antibody contains two antigen binding sites (bivalency) like Y-shaped complete antibody, it could increase avidity. As a result, it could show higher antigen binding activity than monomeric ScFv antibodies. Based on this concept, monomeric chicken 8C3 ScFv antibody previously developed from chicken hybridoma was dimerized by the addition of leucine zipper motif at C-terminus of ScFv antibody. The dimeric 8C3 ScFv antibody specifically reacted with Eimerian sporozoite which causes Avian Coccidiosis. As expected, dimeric 8C3 ScFv antibody showed 3-folds higher antigen binding activity than monomer due to increased avidity. In addition, protien yields of dimer expression were 2-folds higher than monomer.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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