아질산염을 이용한 키토산의 부분가수분해 반응에서 반응이 진행됨에 따라서 탈아세틸화도는 감소하였으며 가수분해된 각 fraction에서의 탈아세틸화도는 50% 이하로 확인되었다. GPC를 이용하여 이들 각 유도체의 수평균분자량을 확인한 결과, 물-메탄올에 의한 침전물은 6000에서 4000의 분자량을 가지고 있었으며, 메탄올-아세톤에 의해서는 2000 이하의 분자량을 가지는 것을 얻을 수 있었다. 이때 다분산도는 1.7 이하로 분자량 분포가 좁은 분해물을 얻을 수 있었다. 각 fraction 별로 분자량에 따른 항균효과를 E. coli HB 101과 Bacillus subtilis PP 2에 대해서 시험한 결과 분자량이 5100인 fraction B($H_2O:MeOH=1:5$)가 가장 우수하였고, 모든 시료에서 그람양성균인 Bacillus subtilis PP 2에 대한 항균능이 그람음성균인 E. coli HB 101에 비해 우수하였다.
In this study, analysis of active compounds that are believed to be highly relevant to antioxidant activity was carried out on the methanol extract and its solvent fractions of Corni fructus. The DPPH radical scavenging activity for the comparison of antioxidant activity was higher in order of aqueous fraction > methanol extract > ethyl acetate fraction > n-hexane fraction. It is similar to the order of total polyphenol contents in the samples. As a result of LC-MS analysis, phenolic acid compounds such as caffeic acid, gallic acid and chlorogenic acid and lognin, which is known as a representative active ingredient of Corni fructus, were identified as active compounds. And the antioxidative activity and the total polyphenol content of the extracts and solvent fractions were found to be related to the contents of the compounds. Particularly, it was confirmed that phenolic acid such as caffeic acid contributes to the antioxidative activity of the aqueous fraction of Corni fructus methanol extract.
Juglans mandshurica bark was collected and extracted with 70% aqueous acetone. The extracts were concentrated and then sequentially fractionated using n-hexane, $CH_2Cl_2$, EtOAc, and $H_2O$ to be freeze dried. A portion of $H_2O$ fraction was chromatographed on a Sephadex LH-20 column using aqueous methanol to isolate (S)-2,3-HHDP-D-glucopyranoside (1). Some of EtOAc fraction was also treated on a Sephadex LH-20 column using aqueous methanol and EtOH-hexane mixture to purify pedunculagin (2). The structures of these two epimeric ellagitannins were elucidated by spectroscopic tools, NMR and MS.
Park, Hwa-Jin;Park, Kyeong-Mee;Rhee, Man-Hee;Park, Ki-Hyun
Journal of Ginseng Research
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제17권2호
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pp.135-138
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1993
Aqueous fractions from Korean red ginseng inhibited the phosphorylations of 40 KD and 20 KD polypeptides which were induced by phorbol-12-myristate-13-acetate (100 nM) in human platelets. Much more carbohydrates were contained in the aqueous fractions than proteins. An aqueous fraction extracted with methanol, mainly, consists of glycoproteins, molecular weights of which were below 18 KD. We may infer that the aqueous fraction from Korean red ginseng do antitumorous and antiplatelet functions.
Ixeris dentata was extracted with methanol and then the methanol extract was further fractionated to hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and aqueous fraction. The methanol extract of lxeris dentata had the strong antimutagenic effect on the aflatoxin B1(AFB1) and N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine(MNNG) in Ames mutagenicity test and SOS chromotest. Among the solvent extracted fractions from the methanol extract, the chloroform fraction exhibited the greatest antimutagenic effect suppressing the mutagenicity of AFB1 with inhibition rate of 74 percent. The methanol extract of Ixeris dentata also revealed the inhibitory effect on the growth of MG-63 human osteosarcoma cells after 6 days of breeding at 37℃. The chloroform fraction and the ethyl acetate fraction from the methanol extract of lxeris dentata were most effective and inhibited the growth of MG-63 cells by 97 and 93 percent, respectively. It is suggested that the inhibitory effects of lxeris dentata on the mutagenicity and the growth of MG-63 human osteosarcoma cells are strong in the lipid soluble fractions.
In the present study, antioxidant activity of crude extract and its solvent-partitioned subfractions (n-hexane, 85% aqueous methanol, n-butanol, and water) obtained from Atriplex gmelinii was investigated using several different antioxidant assays. The tested samples possessed different antioxidant and radical-scavenging activities in different assays. n-butanol fraction showed the most potent radical-scavenging activity on reducing power while 85% aqueous methanol fraction exhibited the highest radical-scavenging activity on DPPH radicals and intracellular reactive oxygen species (ROS). On the otherhand, n-BuOH and 85% aqueous methanol revealed the similar inhibitory effect on peroxynitrite-scavenging and genomic DNA oxidation. These results suggest that the Atriplex gmelinii can be used as the valuable source for developing a natural antioxidant.
The methanol extract of Thalictrum uchiyamai Nakai was fractionatedi nto four parts; (1) ether soluble nonphenolic fraction (2) phenolic tertiary bases fraction, (3) chloroform soluble tertiary bases fraction and (4) aqueous quaternary bases fraction. The fractions of this plant showed a total of twenty-four spots on the silica gel TLC. Ether soluble nonphenolic fraction and ether soluble phenolic fraction showed nine alkaloid spots respectively, chloroform soluble fraction showed three alkaloid spots and quaternary bases fraction showed three alkaloid spots. The antimicrobial activity of the four extracts was shown as follows; nonphenolic tertiary bases inhibited the growth of Micrococcus dutica at the concentration of $50\mu$g/ml, in phenolic tertiary bases $500\mu$g/ml concentration was inhibitory to Micrococcus dutica and to Staphyloccus aureus. In aqueous quaternary bases, $500\mu$g/ml concentration was inhibitory to Klebsiella pneumonae. Chloroform soluble tertiary fraction showed slight activity. All of bases showed reproducible activity against tested microorganisms.
이물질 침입에 대한 인식의 결과 NO, PGE$_2$, TNF-, IL-6와 같은 여러 신호전달물질의 분비가 개시되며 이들을 억제하는 물질을 항염증제라고 볼 수 있다. 본 연구에서는 회향(Foeniculum vulgare Mill.) 열매 추출물이 mouse macrophages RAW264.7 세포에서 lipopolysaccharide(LPS)로 유도한 NO(iNOS 산물), PGE$_2$(COX-2 산물) 및 cytokines (TNF-$\alpha$, IL-6) 생성 억제에 미치는 영향을 살펴보았다. 회향 열매의 methanol 추출물 및 분획물(chloroform, butanol, and aqueous fractions)은 4~100$\mu$g/mL 농도에서 LPS가 활성화된 대식 세포에서 NO 생성을 억제하였으며 독성을 나타내지 않았다. LPS가 유도한 PGE$_2$ 생성은 butanol 분획(100 $\mu$g/mL)에 의해서만 유의적으로 감소하였다(P<0.05). 회향 열매 추출물 및 분획물은 TNF-$\alpha$의 생성을 유의적으로 감소시켰으며 IL-6의 생성은 methanol extract(4~100 $\mu$g/mL), chloroform fraction(4 $\mu$g/mL), butanol fraction(4 and 100$\mu$g/mL) 및 aqueous fraction(4~100 $\mu$g/mL)에 의해 감소되었다(P<0.05). 이는 회향 열매 추출물은 염증 상태에서 유용할 것이며 COX-2와 iNOS를 억제하는 butanol 분획은 새로운 항염증제 개발에 사용될 수 있음을 시사하여 주었다.
본 실험은 동해 주문진 해안에 생육하는 12가지의 식용 해조류에서 새로운 천연 항산화물질을 분리하고자 여러 용매로 추출, column chromatography로 분리, 정제하고 항산화 활성측정(AOM법, DPPH법), UV-spectrophotometer 측정, HPLC, GC/MS 분석 등의 실험을 실시한 결과 12가지의 식용 해조류를 hot-methanol로 추출하여 AOM법으로 활성측정한 결과 김>미역, BHT>다시마>넓미역>지누아리>서실 눈으로 활성을 보였으며 나머지 해조류는 활성을 나타내지 않았다. 또한 클로로포름 추출액과 메탄올 추출 혼합액을 석유 에테르, 에테르, 클로로포름, 메탄올, 물 등의 용매로 순차적으로 추출, 색소제거, 농축하여 DPPH법으로 항산화 활성을 측정한 결과 aqueous-methanol 가용분획에서 강한 항산화 활성을 나타내었고, 다른 추출분획에서는 활성을 나타내지 않았으며, 이 때 김>미역>다시마>BHA>파래>Tocopherol>넓미역>BHT의 순으로 활성을 보였다. 특히 김, 미역, 다시마, 파래는 같은 양에서 BHA, BHT보다 높거나 대등한 수준의 항산화 활성을 보여 주었다. 활성물질의 회수율은 1.82%였다. 이들이 극성 용매에서 분리된 분획에서 강한 항산화 활성을 나타내므로 극성을 띤 물질로 보여진다. 또한 이들 활성분획 각각을 silica gel column chromatography로 분리 정제하여 DPPH법으로 항산화 활성을 측정한 결과 메탄올 분획에서 분리된 물질에서 강한 항산화 활성을 나타내었다. 이와 같이 분리 정제된 항산화성 물질의 UV 흡수특성을 측정한 결과 BHA나 BHT의 흡수파장 보다 단파장인 $235{\pm}5\;nm,\;270{\pm}5\;nm$에서 극대흡수(${\lambda}_{max}$)의 이동을 보였는데, 이는 활성물질 분자에 전기음성도가 비교적 큰 분자가 치환되어 있음을 알 수 있었다. HPLC분석에서는 다시마, 미역, 파래의 경우 retention time이 8.5분, 10분인 극성물질이 분리되었고, 김에서는 25분인 대체로 비극성에 가까운 물질이 분리되었다. 이것이 BHA, BHT와 거의 같은 RT에서 분리되는 것으로 보아 유사한 화학적 성질을 가진 물질로 해석 되어진다. 분리된 항산화성 물질의 분자량은 GC/MS 분석으로 얻은 mass spectrum을 해석한 결과 181, 238의 두 가지 물질로 비교적 작은 안정한 항산화성 물질로 사료되어 진다.
This stuffy was carried to establish a new efficient method for the preparation of edible crude ginseng saponin. The conventional butanol extraction and resin adsorption methods were compared for the contents of total crude ginseng saponin and major ginsenosides. Seventy- percent methanol extract was applied to Diaion HP-20 column and the resin was washed with Hn and eluted with absolute methanol. The methanol elute was dried in vivo and analyzed for its ginsenosides. Use of ethanol instead of methanol to make edible crude ginseng saponin gave a similar result. Butanol extraction was performed by the conventional method. The final aqueous layer from butanol extraction was passed through Diaion HP-20 column followed by elution with methanol and Diaion HP-20 passed fraction was extracted with butanol to recover remaining components, respectively, in order to determine saponin loss. TLC and HPLC qualitatively and quantitatively monitored Ginsenosides, respectively. Loss of ginsenosides was higher in butanol extraction method than in Diction HP-20 adsorption method. In addition, saponin fractions prepared by Diction HP-20 adsorption method showed higher content of each ginsenoside, showing 8.2% higher purity than that of butanol extracted fraction. From these results, we propose the resin adsorption method as a new efficient measure for the preparation of crude ginseng saponin, which is edible by using spirit instead of methanol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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