The partition of proteins in the salt-rich phase of polyethylene glycol (pEG)/salt aqueous two-phase systems is limited by the salting-out effects of salt. The logarithm of the concentration of proteins partitioned in the salt-rich phase decreases linearly with increases in the concentration of salt in the salt-rich phase (salting-out). Therefore, the partition of a given protein in the salt-rich phase of aqueous two-phase systems can be estimated from the salting-out constant. The slope of the solubility line (salting-out con-stant) for a given protein is determined by the type of salt in the two-phase systems.
As an effective separation method for biomolecules, aqueous two-phase systems based on ionic liquids were suggested. Hydrophobic ionic liquids are more expensive and viscous in spite of their usage in the ionic liquid/water biphasic extraction compared with hydrophilic ionic liquids. In case of aqueous two-phase systems using hydrophilic ionic liquids, they can be diluted in aqueous phase. Experimental results show that aqueous two phase systems can be formed by adding appropriate amount of ionic liquids to aqueous salts solutions. The viscosity of ionic liquid aqueous phase is proportional to the cation chain length in ionic liquids. It is founded that the ionic liquid based aqueous two phase systems are effective for the separation of biomolecules such as acrylic acid.
Cyclodextrin Glucanotransferase(EC 2.4.1.19 : 1,4-${\alpha}$-glucano) transferase, cyclizing; CGTase) can be separated and recovered in an aqueous two-phase system composed of poly(ethylene glycol)(PEG)/dextran and PEG/salt. In an aqueous two-phase system consisting of PEG 35000 (5%) and dextran T2000 (7%), all cell and debris were collected at the interphase. CGTase partitioned to the denser dextran phase at an yield of 83.4%. On the other hand, in an aqueous two-phase system consisting of PEG 35000 (10%) and sodium phosphate (15%), CGTase partitioned to the denser salt phase at an yield of 95.5%. In order to recover CGTase using an aqueous two-phase system, the PEG/salt system proved to be more efficient than the PEG/dextran system in terms of yield and cost.
For an ideal extractive bioconversion in aqueous two-phase systems, the product has to be preferentially partitioned into the phase opposite to the one in which the biocatalyst is located. Partitioning behaviors of Lactobacillus helveticus IAM 11090 and lactic acid in aqueous two-phase systems composed a polycation, poly(ethylenimine) (PEI), and an uncharged polymer (hydroxyethyl)cellulose (HEC) were investigated. L. helveticus cells were preferentially partitioned to the HEC-rich top phase while about 85% of lactic acid was partitioned to the PEI-rich bottom phase. These results indicate that extraction of charged, low molecular weight products in an aqueous two-phase systems can be promoted by using an oppositely charged polymer as one of the phase-forming polymer. By the ideal partitioning of the cells and lactic acid, an aqueous PEI/HEC two-phase system can be used as a potential system for the extractive lactic acid fermentation of cheese whey.
In the polyethylene glycol/dextran aqueous two-phase systems, volume ratio was increased and partition coefficient was decreased with the increase of potyethylene glycol molecular weight and concentration. However the volume ratio was decreased and the partition coefficient was increased with the increase of dextran molecular weight. On the other hand, the volume ratio and the partition coefficient were decreased with the increase of dextran concentration. Continuous enzymatic hydrolysis of soluble starch with $\alpha$-amylase which was produced by Bacillus amyloliquefaciens IF0 14141 was investigated in polyethylene glycol/dextran aqueous two-phase systems. Nonreacted soluble starch and $\alpha$-amylase were reused in these systems. $\alpha$-Amylase activity was maintained more than 100 hrs by recycling of $\alpha$-amylase from bottom of settler to reactor.
The biosynthesis of cephalexin was carried out in the aqueous two-phase systems using penicillin acylase as a catalyst, and 7-aminodeacetoxicephalosporanic acid (7-ADCA) and phenylglycine methyl ester (PGME) as substrates. 20% PEG400-l7.5% ${(NH_4)}_2SO_4$ containing 0.5 M NaCl and 1.5 M methanol aqueous two-phase systems (ATPS) were selected as reaction medium, and 53% product yield was obtained using immobilized penicillin acylase as a catalyst. 20% PEG400-l5% $MgSO_4$ ATPS was also used for the synthesis of cephalexin, and 60-62% product yield was obtained by using free penicillin acylase as a catalyst. When batch reactions were repeated in the ATPS, the cephalexin yields decreased during the reactions due to deactivation, loss, and product inhibition of penicillin acylase. The effect of different ratio of phenylglycine methyl ester to 7-ADCA on the product yield was investigated, and high cephalexin yield was obtained at a high molar ratio.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.39
no.2
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pp.83-88
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2013
The aqueous two phase system has biocompatibility, because it is physically separated into an immiscible liquid multi-layer induced by incompatibility among hydrophilic components dissolved in the water phase. we have applied this principle to aqueous multi-layer liquid cosmetics and select two representative systems. What it was experimentally obtained was the phase diagrams including a binodal curve, a critical point, tie lines of concentration and tie curves of phase separating volume ratio and phase separating time. From the phase diagrams, we were able to observe existence of the optimum condition to prepare the aqueous multi-layer cosmetics for the systems.
The effects of Pluronic F-68, a non-ionic surfactant, on the growth and physical characteristics of Digitalis lanata suspension cultures were investigated in aqueous two-phase systems (ATPSs) composed of $4.5\%$ polyethylene glycol (PEG) 20,000 and $2.8\%$ crude dextran. In the range of 0.1-10.0 g $1^{-1}$, Pluronic F-68 enhanced the maximum cell density in a medium with ATPSs, even though Pluronic F-68 did not affect cell growth in a normal growth medium. In terms of physical properties of ATPSs with cell suspension cultures, 0.2 g $1^{-1}$ of Pluronic F-68 reduced viscosity by up to $40\%$, while 0.1 g $1^{-1}$ of Pluronic F-68 significantly enhanced the oxygen transfer rate. In addition, we successfully performed aqueous two-phase cultivation in a 5-1 stirred tank bioreactor with 0.5 g $1^{-1}$ of Pluronic F-68, and discovered that cell growth in ATPSs was similar to that in normal growth medium.
Partitioning of human granulocyte-macrophage colony stimulating factor (hGM-CSF) was achieved in the aqueous two-phase systems (ATPSs) using a crude extract of transgenic tobacco cell suspension culture. This study examined the effects of polyethylene glycol (PEG) molecular weight and concentration and the effects of sodium phosphate concentration in different PEG/sodium phosphate systems on the partition coefficient, K. The best ATPS system was 5% PEG 8,000/1.6 M sodium phosphate after 2 h of incubation at room temperature. In this system, hGM-CSF was partitioned in the PEG-rich phase with a yield of 57.99% and K$\_$hGM-CSF/ of 8.12. In another system, 3% PEG 10,000/1.6 M sodium phosphate, hGM-CSF was also partitioned primarily in the top phase with a yield of 45.66% and K$\_$hGM-CSF/ of 7.64 after 2 h of incubation at room temperature.
Lee, Yong Hwa;Lee, Woo Youn;Kim, Ki-Sub;Hong, Yeon Ki
Korean Chemical Engineering Research
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v.52
no.5
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pp.627-631
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2014
As an effective method for extraction of acrylic acid, aqueous two-phase systems based on morpholinium ionic liquids were used in this study. Effects of the alkyl chain length of cation in morpholinium ionic liquids on phase diagram and extraction efficiencies were investigated. Experimental results show that aqueous two phase systems can be formed by adding appropriate amount of morpholinium ionic liquids to aqueous $K_2HPO_4$ solutions. It can be found that the ability of morpholinium ionic liquids for phase separation followed the order [HMMor][Br]>[OMMor][Br]>[BMMor][Br]>[EMMor][Br]. There was little difference between binodal curves of imidazolium ionic liquids and those of morpholinium ionic liquids. 50~90% of the extraction efficiency was observed for acrylic acid by aqueous two phase extraction of acrylic acid with morpholinium ionic liquids. It can be concluded that morpholinium ionic liquids/$K_2HPO_4$ were effective for aqueous two phases extraction of acrylic acid comparing to imidazolium ionic liquids/$K_2HPO_4$ systems because of their lower cost.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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