The presence of phenols in treated palm oil mill effluent (POME) is an environmental concern due to their phytotoxicity and antimicrobial activity. In this study, phenol-degrading bacteria, Methylobacterium sp. NP3 and Acinetobacter sp. PK1 were immobilized on oil palm empty fruit bunches (EFBs) for removal of phenols in the treated POME. The bacterial exopolysaccharides (EPS) were responsible for cell adhesion to the EFBs during the immobilization process. These immobilized bacteria could effectively remove up to 5,000 mg/L phenol in a carbon free mineral medium (CFMM) with a greater degradation efficiency and rate than that with suspended bacteria. To increase the efficiency of the immobilized bacteria, three approaches, namely activation, acclimation, and combined activation and acclimation were applied. The most convenient and efficient strategy was found when the immobilized bacteria were activated in a CFMM containing phenol for 24 h before biotreatment of the treated POME. These activated immobilized bacteria were able to remove about 63.4% of 33 mg/L phenols in the treated POME, while non-activated and/or acclimated immobilized bacteria could degrade only 35.0%. The activated immobilized bacteria could be effectively reused for at least ten application cycles and stored for 4 weeks at $4^{\circ}C$ with the similar activities. In addition, the utilization of the abundant EFBs gives value-added to the palm oil mill wastes and is environmentally friendly thus making it is attractive for practical application.
The transport of lysosomal enzymes into the lysosomes depends on the phosphorylation of their chains and the binding of the phosphorylated residues to mannose-6-phosphate receptors. The efficiency of separation depends more on the phosphodiesterases (PDEs) than on the activity of the phosphorylation of mannose residues and can be determined in vitro. PDEs play important roles in regulation of the activation of lysosomes. The expression of proteins was confirmed by western blotting. All PDE4 series protein expression was reduced in high concentrations of rolipram. As a result of observing the fluorescence intensity after rolipram treatment, the lysosomal enzyme was activated at low concentrations and suppressed at high concentrations. High concentrations of rolipram recovered the original function. Antimicrobial activity was not shown in either 10 or $100{\mu}M$ concentrations of rolipram in treated HeLa cells in vitro. However, the higher anticancer activity at lower rolipram concentration was shown in lysosomal enzyme treated with $10{\mu}M$ of rolipram. The anticancer activity was confirmed through cathepsin B and D assay. Tranfection allowed examination of the relationship between PDE4 and lysosomal activity in more detail. Protein expression was confirmed to be reduced. Fluorescence intensity showed decreased activity of lysosomes and ROS in cells transfected with the antisense sequences of PDE4 A, B, C, and D. PDE4A showed anticancer activity, whereas lysosome from cells transfected with the antisense sequences of PDE4 B, C, and D had decreased anticancer activity. These results showed the PDE4 A, B, C, and D are conjunctly related with lysosomal activity.
참담치(Mytilus coruscus)의 혈구 유래의 항균 펩타이드를 역상 column들을 사용한 reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC)로 분리 및 정제하였다. 정제된 펩타이드는 matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrophotometer (MALDI-TOF/MS)를 통해 분자량이 4041.866 Da으로 밝혀졌으며 Edman degradation법을 통해 25개의 N-말단 서열을 확보하였다. 이는 참담치의 mytilin B precursor와 100%, mytilin 8 precursor, mytilin 4 precursor와 96% 일치하였다. 또한 103개의 아미노산 서열을 코딩하고 있는 312 bp의 open-reading frame (ORF)을 밝혔으며 이는 참담치의 mytilin B precursor와 100% 일치하였다. 밝혀진 분자량과 아미노산 서열을 바탕으로 C-말단 alanine 잔기의 유무에 따라 2개의 펩타이드를 합성하였으며 이는 mytilin B1과 B2라고 명명하였다. 이들은 그람 양성 균주 Bacillus cereus, Streptococcus parauberis [minimal effective concentrations, MECs $41.6-89.7{\mu}g/ml$], 그람 음성 균주 Enterobacter cloacae, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Providencia stuartii, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio ichthyoenteri [MECs $7.4-39.5{\mu}g/ml$] 그리고 진균류인 Candida albicans [MECs $26.0-31.8{\mu}g/ml$]에 항균활성을 나타냈다. 본 연구 결과, 참담치 혈구 유래 mytilin B1과 mytilin B2는 넓은 항균 스펙트럼을 가지고 열과 염분에 대한 안정성이 높으며 용혈현상과 세포독성은 나타나지 않았다. 이러한 특성은 기능성 사료첨가제 및 항생제 대체제로써 충분히 안정적인 역할을 할 뿐만 아니라 추후 mytilin의 구조적 중요성과 참담치의 면역학적 측면에서 다양한 자료를 제시할 것으로 사료된다.
Tariq, Hujaz;Sharma, Amit;Sarkar, Srobana;Ojha, Lamella;Pal, Ravi Prakash;Mani, Veena
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제33권3호
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pp.373-381
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2020
There is a need for newer feed additives due to legal prohibition on inclusion of growth promoting antibiotics in livestock diets in several countries due to antimicrobial resistance. In this context, rare earth elements (REE) have gained attention among animal nutritionists as potential growth promoters. Currently, several studies have reported better weight gain, milk production, egg laying capacity and feed conversion efficiency among different breeds of farm animals following supplementation with REE, with however largely inconsistent results. Furthermore, REE supplementation has also shown to improve ruminal fibrolytic and proteolytic activities as well as flavor of meat with negligible residues in edible tissue, however the mechanism behind this action is still unclear. According to existing research, due to their poor absorption and similarity with calcium REE might exert their action locally on gut microbial populations within the gastrointestinal tract (GIT). Moreover, REE have also shown anti-inflammatory, anti-oxidative as well as immune stimulating effects. The present review aims to broaden the knowledge about use of REE as feed additives for livestock and sum up efficacy of REE supplementation on performance and health of animals by comparing the findings. Till date, researches with REE have shown properties that make them a promising, new and safe alternative feed additive but further exploration is recommended to optimize effects and clarify discrepancy of various results before practical proposals can be drafted.
Thanatin, a 21-residue peptide, is an inducible insect peptide with a broad range of activity against bacteria and fungi. It has a C-terminal disulfide loop, like the frog skin secretion antimicrobial peptides of the brevinin family. In this study, we tried to find the effect of a number of amino acids between the disulfide bond. Thanatin showed stronger antibacterial activity to Gram negative bacteria than other mutants, except Th1; whereas, the mutant peptides with deletion had higher activity to Gram positive bacteria than thanatin. An increase in the number of amino acid(s) using the alanine residue decreased the antibacterial activity in all of the bacteria. Th1 with deletion of threonine at position 15 ($Thr^{15}$) showed similar antibacterial activity against Gram-negative bacteria, but had higher activity against the Gram positive bacteria. In order to study the structure-function relationship, we measured liposome disruption by the peptides and CD spectra of the peptides. Th1 also showed the highest liposome leaking activity and α-helical propensity in the sodium dodecyl sulfate solution, compared with other peptides. Liposome disruption activity was closely correlated with the anti-Gram positive bacterial activity. All of the peptides showed no hemolytic activity. Th1 was considered to be useful as an antimicrobial peptide with broad spectrum without toxicity.
Fluoroquinoles have a wide range of antimicrobial properties and are effective in the treatment of bacterial diseases in fish. The use of fluoroquinoles continues to grow steadily. Fluoroquinolone antibiotics are probably the most important class used among synthetic antibiotics in human and veterinary medicines because of their broad activity spectrum and good oral absorption. This study was conducted to estimate the residue of antibiotics in four species of farmed fishes, including olive flounder (Paralichthys olivaceus), black rock fish (Sebastes schlegeli), red sea bream (Pagrus major), and sea bass (Lateolabrax japonicus), collected from fish farms located in the southern coastal area of Korea. The residues of fluoroquinolones were determined using high performance liquid chromatography (HPLC) with a fluorescence detector. Residuals of five fluoroquinolones in muscle tissue of farmed fish were analyzed. We found that enrofloxacin was the most common agent in fish muscle, and that ciprofloxacin was the next most common. The range of detected concentrations of fluoroquinolones in olive flounder muscle was 0-0.859 mg/kg in 32.6% of all samples. Enrofloxacin was commonly detected in sea bass muscle at a range of 0-0.143 mg/kg in 38.9% of all samples. Fluoroquinolones were detected in 6.9% of black rock fish muscle and in 16.6% of sea bream, although the detected concentration was below 0.01 mg/kg. The maximum detection value of enrofloxacin and ofloxacin in olive flounder at the time of shipping was 0.102 mg/kg and 0.09 mg/kg, respectively; no other antimicrobials were detected. We detected no antimicrobial substances in red sea bream.
This survey was carried out to detect the residual antibiotics and sulfonamides in emergency slaughtered cattle(n=265) from slaughter houses in Kyeonggi province by EEC 4-plates method, Charm II and HPLC. The results were summarized as follows ; 1. Antimicrobial substances were detected from 24 samples(9.1%) by EEC 4-plates method and the detection ratio were highest in summer(13.8%). 2. Twenty-two of the 24 positive samples were classified as sulfonamide(34.4%), TCs(31.3%), $\beta$-lactam(23.5%) and aminoglycoside(9.3%) by Charm II test. 13(59.1%) of the 22 samples contained single agent and 9 samples(40.9%) contained 2 or more agents. 3. Oxytetracycline(27.3%), penicillin G (27.3%) and sulfathiazole(18.2%) were detected in 20 from 22 samples by the HPLC and Charm II test. 4. The residual concentration of oxytetracycline, penicillin G and sulfonamide were 0.29~9.30 ppm, 0.05~9.58 ppm and 0.04~7.59 ppm, respectively and 19 samples(7.2%) were exceeded tolerance levels.
Kim, Se-Ha;Kim, Ji-Young;Lee, Byeong-Jae;Kim, Soon-Jong
BMB Reports
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제32권1호
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pp.12-19
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1999
Gaegurin 4 (GGN4), a broad-spectrum antibiotic, is a 37-amino acid peptide isolated from the Korean frog, Rana rugosa. In this study, we have chemically synthesized and purified GGN4 analogues where the C-terminal portion is truncated and/or substituted with tryptophan. These peptides show significantly different biological activities depending on the location of tryptophan and the number of amino acids truncated from the C-terminal end. While deletion of 9 amino acids from the C-terminal seems to be marginally tolerable in maintaining the antimicrobial activity, further deletion of up to 14 amino acid residues decreases the potency by more than 60-fold towards Gram-positive, and 10-fold towards Gram-negative, bacteria. Surprisingly, the reduced activity of the shorter peptide can be completely restored by a single substitution of aspartic acid 16 to tryptophan 16 (D16W). Also, the truncation seems to decrease the specificity of antibiotic activity more towards Gram-positive than towards Gram-negative bacteria studied. These data suggest a partial role of the C-terminal region in determining the binding specificity and the activity of peptides upon binding to their target cell membranes.
The thermal degradation of poly(hexamethylene guanidine) phosphate (PHMG) was studied by dynamic thermogravimetric analysis (TGA) and pyrolysis-GC/MS (p-GC). Thermal degradation of PHMG occurs in three different processes, such as dephosphorylation, sublimation/vaporization of amine compounds and decomposition/ recombination of hydrocarbon residues. The kinetic parameters of each stage were calculated from the Kissinger, Friedman and Flynn-Wall-Ozawa methods. The Chang method was also used for comparison study. To investigate the degradation mechanisms of the three different stages, the Coats-Redfern and the Phadnis-Deshpande methods were employed. The probable degradation mechanism for the first stage was a nucleation and growth mechanism, $A_n$ type. However, a power law and a diffusion mechanism, $D_n$ type, were operated for the second degradation stage, whereas a nucleation and growth mechanism, $A_n$ type, were operated again for the third degradation stage of PHMG. The theoretical weight loss against temperature curves, calculated by the estimated kinetic parameters, well fit the experimental data, thereby confirming the validity of the analysis method used in this work. The life-time predicted from the kinetic equation is a valuable guide for the thermal processing of PHMG.
Lactococcus sp. 1112-1 균주가 생산하는 bacteriocin을 정제하고 특성을 조사하였다. CM-sephadex ion exchange column chromatography, Sephadex G-50 gel filtration, SDS-PAGE를 행함으로서 수율 16.2 정제도 123배의 단일물질을 얻었다. 이 물질은 열에 비교적 안정하여 $60^{\circ}C$에서 60분간 열처리 할 때 38의 잔존활성을 유지하였으며 알카리쪽에서는 비교적 불안정하여 pH 8.0에서 48시간 처리시 77의 활성을 소실하였다. 이 물질은 26개의 아미노산 잔기를 이루고 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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