This study was performed to investigate the antifungal substances and the antifungal activity against fungi of lactic acid bacteria (LAB) isolated from kimchi. LAB from kimchi in Imsil showed antifungal activity against Penicillium brevicompactum strain FI02. LAB LI031 was identified as Lactobacillus sakei subsp. Antifungal substances contained in L. sakei subsp. ALI033 culture media were unstable at high pH levels. Both, the control and proteinase K and protease treated samples showed clear zones, suggesting that the antifungal substances produced by ALI033 were non-protein substances unaffected by protesases. Both, the control and catalase showed clear zones, suggesting that the antifungal metabolite was not $H_2O_2$. The molecular weights of the antifungal substances were ${\leq}3,000Da$. The organic acid content of crude antifungal substances produced by L. sakei subsp. ALI033 showed high concentrations of lactic acid (502.47 mg/100 g). Therefore, these results suggest that antifungal substance produced by L. sakei subsp. ALI033 is most likely due to its ability in producing organic acid.
An antagonistic bacterium PM-1 which strongly inhyibits the growth of Pyricularia oryzae was isolated and identified as paenibacillus macerans. The antifungal substances of the strain PM-1 showed the broad antifungal spectra against P.oryzae races. Relating to the localization test, it was found that the antifungal substances existed not only in the cytoplasm but also in the culture supernatant, and importantly the antifungal activity of the latter was stronger than that of the former. The extracellular antifungal substances were extremely heat-stable up to $121^{\circ}C$ for 15 min. The substances were optimally produced at $20^{\circ}C$ and pH 10.0 in a potato dextrose broth. The culture filtrate of the strain PM-1 caused a partial swelling of the mycelia of P.oryzae, and it prevents the normal growth of the fungus as well. This result suggested that the antifungal substances secreted by the strain PM-1 potentially inhibited the germination of P.oryzae.
To search for the antifungal substances, various actino-mycete isolates were obtained from various soils of Korea using plate dilution method on the humic acid vitamin agar plates. In the screening procedures using a dual culture method, 32 actionomycete isolates were selected, which showed the inhibitory activity against mycelial growth of plant pathogenic fungi Altirnaria mali, Colletotrichum gloeosporides, Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum, Magnaporthe grisea, Phytophthora capsici, and Rhizoctonia solani. Bioassay of the crude extracts from culture filtrates and mycelial mets revealed that 12 antagonistic actionomycetes produced highly active antifungal substances. Actinomycete strain S5-55 which showed the substantial antifungal activity against the tested fungi was selected for production of the antifungal substances. Based on the cytochemical and morphological characteristics, strain S5-55 was identified as a Streptomyces species. The results of the numerical identification using the TAXON program confirmed that Streptomyces strain S5-55 was identical with Streptomyces humidus including in TAXON major cluster 19. The production of antifungal substance was most favorable when S. humidus strain S5-55 was cultivated for 10 dats on soluble starch broth supplemented with $K_2$HPO$_4$. The antifungal substances active against the plant pathogenic fungi P. capsici and M. grisea were partially purified using $\textrm{C}_{18}$ reversed-phase column chromatography.
So, Hyoung-Seok;Kim, Jung-Woo;Lee, Bo-Ram;So, Seung-Young
Journal of the Korea Concrete Institute
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v.27
no.1
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pp.75-83
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2015
This study discusses the long-term antifungal effect and antifungal performance of Hwangtoh mortars with various natural antifungal substances on five types of mold: Chaetomium globosum, Aspergillus niger, Aureobasidium pullulans, Gliocladium virens, and Penicillium pinophilum, which can be easily detected in the indoors and outdoors of buildings in damp environments. The antifungal performances of various natural antifungal substances extracted from Marjoram, Phytoncide, Thyme, Ginkgo leaves, and Chitosan (oligosaccharide) were investigated on the five types of mold, as a basic experiment. Using the natural antifungal substances selected for the basic experiment, antifungal mortars were made, and their antifungal performance and long-term antifungal effects were also investigated. The results clearly showed that the marjoram extract and their associated mortars had excellent antifungal performance. Also, their long-term antifungal effects were outstanding and at an equivalent level to those of the mortars with organic chemical antifungal agents. The optimum addition rate of the marjoram extract in the mortar was 5% by mass of binder. It was also shown that the phytoncide extract in the mortar needed an addition rate of more than 10% according to the mass of binder, considering the long-term antifungal effect and the antifungal performance.
Extracts of common purslane(Portulaca oleracea L.) showed to possess some antifungal substances which inhibited the mycelial growth of the phytopathogenic fungi tested;Valsa mali, Alternaria kikuchiana and Pyricularia oryzae. These antifungal substances were found to be soluble in methanol and were regarded as kinds of lipid. In order to isolate the antifungal substances, the extracts of common purslane were concentrated by evaporation under reduced pressure and extracted with methanol The methanol solution was subjected to silica gel-florisil column and divided into lipid and non-lipid fractions. Lipid fractions only showed antifungal activity against the fungi tested. The effective substances contained in the extracts of common purslane inhibited not only the mycelial growth but also the spore germination of the fungi.
Biocontrol of plant pathogens provides an alternative means of reducing the incidence of plant diseases without the negative aspects of chemical pesticides. Nowdays, as the resistant fungi about the chemical fungicides have revealed and the concern of environment has increased, the biological control of phytopathogenic fungi by the antagonistic microorganisms is very much indispensable. For the selection of strong antagonistic bacterium for biological control agent of rice leafblast and cucumber gray mold rot, the antifungal strain KL-3 strain was selected among 120 strains isolated from the rhizosphere soils. And the strain was identified to be a species of Bacillus subtilis or closely related strain. In several biochemical and in vitro antibiosis tests, antifungal substances of Bacillus sp. KL-3 were presumed heat stable, micromolecular antibiotic substances. In vivo test and vinyl house field test, the antifungal substances of Bacillus sp. KL-3 represented excellent biocontrol ability aganist Alternaria mali, Phyricularia oryzae, and Alternaria kikuchiana as well as broad spectrum of other fungi. In particular, Bacillus sp. KL-3 strain showed more predominant activity than some chemical fungicides against fungi shown to resist chemcal fungicides.
Kim, Young-Sook;Lee, In-Kyoung;Seok, Soon-Ja;Yun, Bong-Sik
Mycobiology
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v.36
no.2
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pp.110-113
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2008
During a continuing search for antimicrobial substances from Korean native wild mushroom extracts, we found that the methanolic extract of the fruiting body of Clitocybe nebularis exhibited mild antifungal activity against pathogenic fungi. Therefore we evaluated the antifungal substances and other chemical components of the fruiting body of Clitocybe nebularis, which led to the isolation of nebularine, phenylacetic acid, purine, uridine, adenine, uracil, benzoic acid, and mannitol. Nebularine showed mild antifungal activity against Magnaphorthe grisea and Trichophyton mentagrophytes, and phenylacetic acid potently inhibited the growth of Pythium ultium and displayed moderate antifungal activity against Magnaphorthe grisea, Botrytis cinerea, and Trichophyton mentagrophytes. The other isolated compounds showed no antimicrobial activity.
Kwon S. Yoon;Bu Y. Min;Park, Hyoung T.;Lee, Jong K.;Kim, Kun W.
Journal of Microbiology
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v.37
no.1
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pp.27-34
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1999
Two fractions with unusual antifungal activity that suppress asexual sporulation of several fungi were obtained from culture filtrate of Pseudomonas aeruginosa and were partially purified through the repeated silicagel flash column chromatographies. The sporulation-suppressive actions of these fractions in Aspergillus nidulans, Rhizopus stolonifer, and Coprinus cinereus, were analyzed by light and electron microscopes. The germination ability of the spores produced in the presence of these fractions were also checked to determine the persistent effects of these antifungal substances on the next generation. Light microscopic observation of developing sporangia of R. stolonifer grown in the presence of both fractions revealed that the significant number of sporangia failed to reach maturity, and frequently, uncontrolled growths of hyphae and rhizoids from the sporangiophores were found. In A. nidulans addition of these fractions appeared to cause different classes of morphological abnormality in conidia development, which included aborted formation of conidiogenous cells from the apex of conidiophores and enhanced hyphal growths either at the tip or middle of the conidiophores. Germination abilities of spores obtained from the cultures grown in the presence of antifungal fractions were 40∼60% in Aspergillus, 50∼80% in Coprinus (thallic spores), and 30∼40% in Rhizopus compared to those of normal spores.
The purified antifungal substances produced by Bacillus amyloliquefaciens IUB158-03 was positive to ninhydrin but negative to aniline, suggesting that the antifungal substance could be a peptide. FAB-MS, UV adsorption spectrum, and amino acid composition analysis revealed that the molecular weight of the antifungal substance was 1042 and that maximal adsorption was at 220 nm and 277 nm. The antifungal substance was composed of $Asn_3$, $Gln_2$, $Ser_1$, $Gly_1$, and $Tyr_1$. The composition and structural characteristics of antifungal substance were analysed by $^1H$-NMR spectrum, $^1H$-COSY, HMQC, which revealed that the compound belongs to the iturin A family. Temperature and pH had little effect on the stability of the antifungal substance in the ranges of $-70{\sim}121^{\circ}C$ and pH 6.0~10.0, respectively. It showed strong antibiotic activity against fungi. An in vitro cytotoxicity test using NIH3T3 cell showed that the antifungal substance does not have cytotoxicity. The number of circulating leukocytes and the hematobiological analysis of the mice administered with the antifungal substances was similar to those of the control group, indicating no cytotoxicity in vivo. Therefore, the antifungal substances extracted from culture broth of Bacillus amyloliquefaciens IUB158-03 have future potential as biocontrol agents against plant diseases caused by fungi.
This study was undertaken to separate and identify antifungla substances produced by Gilocladium virens G1, a biocontrol agent used for the control of plant diseases caused by Rhizoctonea solani. The culture of G. virens G1 effectively inhibited the growth of R. solani, Colletotrichum gloeosporioides, and Phytophthora capsici, but less that of Fusarium oxysporum. The n-hexane extract of the G. virens culture, which was used for the purification of responsible substances, strongly inhibited R. solani and C. gloeosporioides, but not P. capsici, although the n-butanol extract was effective on all of the pathogens tested. An antifungal substance was purified using the n-hexane extract by Silica gel column chromatography and HPLC. The substance was examined for purity by HPLC and for nature by UV spectrometry, which differed from known antibiotic compounds such as gliotoxin, viridin and gliovirin. The antifungal substance was very liphophilic based on its solvent-solubility and Rf values on TLC, and more inhibitory to C. gloeosporioides than other fungal pathogens tested.
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