Korean-style fermented soybean paste (KFSP), Doenjang, is a traditional food that is consumed as a protein source in Korea. Recently, efforts to identify biolgocial response modifiers (BRMs) have been focused on food products. Accordingly, this study which isolated abiologically active substance form KFSP, named KFSP-BRM, ws defined to be aheat-stable carbohydrate with a molecular weight of 2,000 kDa. The biological activity of KFSP-BRM was not inactivated by treatment with an anti-LPS antibody. The oral as well as intraperitoneal treatment of mice with KFSP-BRM significantly enhanced the number of B cells expressing surface significantly enhanced the number of B cells expressing surface immunoglobulins (IgM and IgG). Subsequently, an increased level of immunoglobulins in the sera was also observed. In vitro. KFSP-BRM was found to upregulate the production of interleukin-1 (IL-1) and IL-6 by mactro phages and B cells but not the production of IL-2 by T cells. In conclusion, these data demonstrate the presence of a BRM in KFSP, which may provide an additional benefit to those consuming it is a food. KFSP-BRM is a novel B cellmitogen distinct from fresh soybean lectin or B cell mitogens, such as LPS and Streptococcus protein A. The major biological effects of KFSP-BRM would appear to be anincreased production of IL-1 and IL-6 by macrophages and B cells, thereby enhancing the function of mature B cells.
We describe the construction and immunobiological properties of a novel whooping cough vaccine candidate, in which the aroQ gene, encoding 3-dehydroquinase, was deleted by insertional inactivation using the kanamycin resistance gene cassette and allelic exchange using a Bordetella suicide vector. The aroQ B. pertussis mutant required supplementation of media to grow but failed to grow on an unsupplemented medium. The aroQ B. pertussis mutant was undetectable in the trachea and lungs of mice at days 6 and 12 post-infection, respectively. Antigen-specific antibody isotypes IgG1 and IgG2a, were produced, and cell-mediated immunity [CMI], using interleukin-2 and interferon-gamma as indirect indicators, was induced in mice vaccinated with the aroQ B. pertussis vaccine candidate, which were substantially enhanced upon second exposure to virulent B. pertussis. Interleukin-12 was also produced in the aroQ B. pertussis-vaccinated mice. On the other hand, neither IgG2a nor CMI-indicator cytokines were produced in DTaP-vaccinated mice, although the CMI-indicator cytokines became detectable post-challenge with virulent B. pertussis. Intranasal immunization with one dose of the aroQ B. pertussis mutant protected vaccinated mice against an intranasal challenge infection, with no pathogen being detected in the lungs of immunized mice by day 7 post-challenge. B. pertussis aroQ thus constitutes a safe, non-reverting, metabolite-deficient vaccine candidate that induces both humoral and cell-mediated immune responses with potential for use as a single-dose vaccine in adolescents and adults, in the first instance, with a view to disrupting the transmission cycle of whooping cough to infants and the community.
Streptococcus equi ssp. zooepidemicus (Streptococcus zooepidemicus, SEZ) is an important pathogen associated with opportunistic infections of a wide range of species, including pigs and humans. The absence of a suitable vaccine makes it difficult to control SEZ infection. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) has been previously identified as an immunogenic protein using immunoproteomic techniques. In the present study, we confirmed that the sequence of GAPDH was highly conserved with other Streptococcus spp. The purified recombinant GAPDH could elicit a significant humoral antibody response in mice and confer significant protection against challenge with a lethal dose of SEZ. GAPDH could adhere to the Hep-2 cells, confirmed by flow cytometry, and inhibit adherence of SEZ to Hep-2 cells in an adherence inhibition assay. In addition, real-time PCR demonstrated that GAPDH was induced in vivo following infection of mice with SEZ. These suggest that GAPDH could play an important role in the pathogenesis of SEZ infection and could be a target for vaccination against SEZ.
Interleukin-18 (IL-18) has been known to induce interferon-${\gamma}$ (IFN-${\gamma}$) production and promote Th1 immunity. Although mammalian IL-18 has been characterized in great detail, the properties and application of chicken IL-18 remain largely uninvestigated as of yet. In this study, we evaluated the immunomodulatory properties of Salmonella enterica serovar Typhimurium expressing chicken interleukin-18 (chIL-18) on immune responses induced by avian influenza (AI) and Newcastle disease (ND) vaccines. After oral administration of S. enterica serovar Typhimurium expressing chIL-18, chickens were vaccinated intramuscularly with the recommended dose of either inactivated AI H9N2 vaccine or ND (B1 strain) vaccine. Chickens receiving a primary vaccination were boosted using the same protocol 7 days later. Humoral and cell-mediated immune responses were evaluated in terms of HI antibody titers and proliferation and mRNA expression of IFN-${\gamma}$ and IL-4 of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) in response to specific antigen stimulation. According to our results, oral administration of S. enterica serovar Typhimurium expressing chIL-18 induced enhanced humoral and Th1-biased cell-mediated immunity against AI and ND vaccines, compared to that of chickens received S. enterica serovar Typhimurium harboring empty vector. Therefore, we conclude that our proposed vaccination regimen using inactivated AI and ND viruses along with oral administration of S. enterica serovar Typhimurium expressing chIL-18 may provide a novel approach in protecting chicken from currently circulating AI and ND virus strains.
Corilagin (CRN) isolated from Euphorbia helioscopia as rheumatoid arthritis drug. CRN was medicated to the abdominal cavity of collagen induced arthritis (CIA) mice that was an animal model for rheumatoid arthritis and its effects on incidence and arthritis index were studied. The results were as folllows; It was exhibited that medicating corilagin inhibited the infiltration of activated T lymphocytes into an inflammatory joint. The production of IgG and IgM that were RF (rheumatoid factor) and inflammatory cytokine, IL-6 and $TNF-{\alpha}$were reduced. After measuring $IFN-{\gamma}$and IL-4, it was found that it was shifted into Th2 immune response as increasing in IL-4. After liver function test, studies on liver poisoning of AST/ALT should be continued.
Shin, Sun-Hye;Lee, Sangkyu;Bae, Jong-Sup;Jee, Jun-Goo;Cha, Hee-Jae;Lee, You Mie
Molecules and Cells
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v.37
no.4
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pp.330-336
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2014
Thymosin beta4 (TB4) has multiple functions in cellular response in processes as diverse as embryonic organ development and the pathogeneses of disease, especially those associated with cardiac coronary vessels. However, the specific roles played by TB4 during heart valve development in vertebrates are largely unknown. Here, we identified a novel function of TB4 in endothelial-mesenchymal transformation (EMT) in cardiac valve endocardial cushions in zebrafish. The expressions of thymosin family members in developing zebrafish embryos were determined by whole mount in situ hybridization. Of the thymosin family members only zTB4 was expressed in the developing heart region. Cardiac valve development at 48 h post fertilization was defected in zebrafish TB4 (zTB4) morpholino-injected embryos (morphants). In zTB4 morphants, abnormal linear heart tube development was observed. The expressions of bone morphogenetic protein (BMP) 4, notch1b, and hyaluronic acid synthase (HAS) 2 genes were also markedly reduced in atrio-ventricular canal (AVC). Endocardial cells in the AVC region were stained with anti-Zn5 antibody reactive against Dm-grasp (an EMT marker) to observe EMT in developing cardiac valves in zTB4 morphants. EMT marker expression in valve endothelial cells was confirmed after transfection with TB4 siRNA in the presence of transforming growth factor ${\beta}$ ($TGF{\beta}$) by RT-PCR and immunofluorescent assay. Zn5-positive endocardial AVC cells were not observed in zTB4 morphants, and knockdown of TB4 suppressed TGF-${\beta}$-induced EMT in ovine valve endothelial cells. Taken together, our results demonstrate that TB4 plays a pivotal role in cardiac valve formation by increasing EMT.
Vibrio vulnificus is a halophilic gram-negative human pathogen, which affects people with underlying liver diseases or a suppressed immune system, often leading to primary septicemia with a mortality rate of higher than 60%. In an effort to develop an oral vaccine against V. vulnificus infection, we prepared a whole cell killed vaccine of V. vulnificus on a large scale and compared the immunogenicity and protective efficacy of the vaccine administered in three formulation forms in rabbits. Since V. vulnificus O-antigen serotypes 1, 2, 3, 4, 5, and 7 account for more than 95% of clinical isolates, we prepared cell lysates from these six serotype strains and mixed in equal amounts for a vaccine. The vaccine was administered to rabbits intramuscularly (i.m.), orally as granules or as enteric-coated granules. In rabbits, all three formulation forms elicited a high level of serum IgG antibody reactive not only to the six strains but also to other O-antigen serotypes 6, 8 and 9, indicating cross-reactivities among the strains. Immunotherapeutic efficacy of the antisera was also evaluated by a passive immunization assay, which revealed that the orally immunized antisera as well as the i.m. immunized antisera was protective against a subsequent lethal challenge of V. vulnificus. These data demonstrate that oral immunization with a V. vulnificus whole cell lysate vaccine induced a systemic immune response and suggest the feasibility of development of this vaccine preparation as an oral vaccine.
Lamivudine, an oral nucleoside analogue, effectively inhibits hepatitis B virus replication and reduces hepatic necroinflammation in patients with chronic hepatitis B. Although lamivudine has shown a promise in patients with chronic hepatitis B, a long-term data on Korean patients with hepatitis B are lacking. The purpose of this study is to evaluate the effects and safety of 52-week lamivudine therapy in Korean patients with chronic hepatitis B, A total of twenty-nine patients (27 male and 2 female) who had received 100 mg of oral lamivudine daily for 52 weeks were evaluated, retrospectively. The mean age of 29 patients in the study group was 37.7 $\pm$ 8.9 years (range 19-54). Pretreatment HBV PCR and HBsAg were positive in all 29 patients, and HBeAg were positive in 25 patients (86%). The serum HBV DNA of 28 patients (97%) significantly fell to undetectable levels (<5 pg/ml) within 12 weeks of therapy and it remained undetectable in 24 patients (83%) by the end of 52-week therapy (p<0.001). Mean serum ALT levels of 29 patients declined to the normal range within 12 weeks and remained within the normal range during the evaluative period (p<0.05). The proportions of patients with HBeAg seroconversion (loss of HBeAg, development of antibody to HBeAg, and undetectable HBV DNA) were 42% after 52-week therapy. The differences of response to lamivudine therapy in HBeAg- positive and HBeAg-negative patients were negligible (p>0.05). Furthermore, the study showed that pretreatment serum HBV DNA and ALT levels have no effect to the efficacy of lamivudine therapy (p>0.05). Further comparison of lamivudine's efficacy showed that lamivudine is just as efficacious in patients with cirrhosis as without cirrhosis (p>0.05). In conclusion, lamivudine is an effective and safe therapy for the treatment of chronic hepatitis B in Korean patients.
Hemagglutinin (HA) titers to SRBC were chronologically observed in chickens orally inoculated at 2 days of age with 5 × 105 oocysts of Cwptosporidium bniLeWi. All the infected chickens exhibited negligible HA titers by 44 days postinoculation (Pl) . The titers were elevated as time progressed. and peaked on day 52 Pl, declined gradually thereafter, and eventually reached to normal titers on day 92 Pl. On the contrary, the titers in uninfected chickens were higher in comparison with infected chickens during the experiment. Chickens infected with the protozoa showed normal oocyst shedding profiles during this period. These data suggest that C. bnilewi infection suppress development of humoral immunity to SRBC in chickens. It is possible that impairment of the bursa of Fabricius by cryptosporidiosis rendered chickens vulnerable to other pathogens.
Experiments were performed on mice to investigate the effect of methionine diets (MET) on the immunotoxicity of ethanol. ICR female mice were divided into 5 groups, Met (Basal (B)+0.19% methionine(M), B+1.71% M and B+5.13%W) and ethanol(4%) were administered ad libitum for 21 days. The mice were evaluated for changes in immune status as measured by antibody titer, Arthus reaction, delayed type hypersensitivity (DTH), rosette forming cell(RFC) and plaque forming cell (PFC) to sheep red blood cells (S-RBC). To investigate the change of the non-specific immune response, the number of leukocytes in peripheral blood and phagocyte activity were measured. The results were summarized as follows: (1) The weight ratios of spleen and thymus to body weight were significantly increased by the B+0.19% M, B+0.57% M and B+1.71% M groups in comparison with control group(B), but B+5.13% M group was significantly decreased. (2) Humoral immune responses were significantly increased by the B+0.19% M and B+0.57% M groups in comparison with control group, but B+5.13% M group was significantly decreased. (3) Cellular immune responses were significantly decreased by the B+1.71% M and B+5.13% M groups in comparison with control group. (4) Phagocyte activities were significantly increased by the B+0.19% M, B+0.57% M and B+1.71% M groups in comparison with control groups, but B+5.13% M group was significantly decreased. (5) The number of circulating leukocyte was significantly increased in the B+0.19% M and B+0.57% M groups in comparison with control group, but B+5.13% M group was significantly decreased.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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