• Applied Biological Chemistry
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• 제35권6호
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• pp.462-469
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• 1992

대복피(빈랑나무의 과피)로부터 면역조절 역할이 기대되는 2종의 보체활성화(항보체) 다당을 정제하고 그 작용양식에 대해 검토하였다. 활성다당 AC-2-IIIa 및 AC-2-IIIc는 농도가 증가함에 따라 항보체 활성이 증가하는 양상을 보였으며, 2가 금속이온 부재시 대조구에 비해 거의 완전한 활성의 감소를 보인 반면, $Ca^{2+}$ 이온만을 선택적으로 제거한 경우 활성이 상당량 유지되었다. 또한 이들 활성다당들은 비교적 강력한 보체 제 2경로 활성화능을 나타내었으며, $Ca^{2+}$ 이온 부재 상태에서 정상인의 혈청과 반응시, C3의 분해산물을 anti-human C3를 이용한 면역 전기영동법에 의해 확인할 수 있었다. 또한 anti-human whole serum를 이용한 면역 전기영동 결과, ${\alpha}2-M$ peak 대비 3rd peak의 높이 비율은 AC-2-IIIa가 $1.50{\pm}0.04$, AC-2-IIIc가 $1.22{\pm}0.08$이었는바, 이러한 사실로부터 대복피 유래 AC-2-IIIa 및 AC-2-IIIc의 보체 활성화 양식은 classical 및 alternative pathway 양경로를 모두 경유함을 알 수 있었다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제17권2호
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• pp.136-140
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• 2012

Trifoliate orange seed extracts (TSEs) were made using either distilled water (TW), ethanol (TE), or n-hexane (TH), to measure total polyphenol contents, DPPH and ABTS radical scavenging activities, and anti-complementary activity. The results showed that the total polyphenol content showed higher value at TE (235.24 ${\mu}g/mL$, p<0.05) than those of TW (132.65 ${\mu}g/mL$) and TH (165.44 ${\mu}g/mL$) at 10 mg/mL and TE exerted the highest DPPH radical scavenging activity (61.77%, p<0.05), which occurred in the following order: TE TW (56.87%)>TH (39.78%). The results of ABTS radical scavenging activity showed that TW (34.26%) and TE (31.81%) showed similar activities, which were higher than TH (12.74%, p<0.05). Anti-complementary activity of TE (61% at 500 ${\mu}g/mL$) showed a higher activity when compared with the positive control (60% at 1,000 ${\mu}g/mL$) polysaccharide-K (PSK), a known immuno-active polysaccharide from Coriolus versicolor. Consequently, among TSEs, TE is a byproduct from trifoliate orange and could be an important source of dietary polyphenolic antioxidant compounds and immunopotentiating activity, including complement activation.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제39권3호
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• pp.233-240
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• 2001

Although some reports have been published on the protective effect of antibodies to Toxoplasma gondii surface membrane proteins, few address the inhibitory activity of antibodies to dense granular proteins (GRA proteins) . Therefore, we performed a series of experiments to evaluate the inhibitory effects of monoclonal antibodies (mAbs) to GRA proteins (GRA2, 28 kDa; GRA6, 32 kDa) and surface membrane protein (SAGI, 30 kDa) on the invasion of T. gondii tachyzoites. Passive immunization of mice with one of three mAbs following challenge with a lethal dose of tachyzoites significantly increased survival compared with results for mice treated with control ascites. The survival times of mice challenged with tachyzoties pretreated with anti-GRA6 or anti-SAG 1 mAb were significantly increased. Mice that received tachyzoties pretreated with both mAb and complement had longer survival times than those that received tachyzoites pretreated with mAb alone. Invasion of tachyzoites into fibroblasts and macrophages was significantly inhibited in the anti-GRA2, anti-GRA6 or anti-SAG 1 mAb pretreated group. Pretreatment with mAb and complement inhibited invasion of tachyzoites in both fibroblasts and macrophages. These results suggest that specific antibodies to dense-granule molecules may be useful for controlling infection with T. gondii.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제18권3호
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• pp.196-202
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• 2013

Citron seed extracts (CSEs) were made using distilled water (CSEW), ethanol (CSEE), and n-hexane (CSEH), to measure the total polyphenol contents, DPPH and ABTS radical scavenging activities, and anti-complementary activity. The total polyphenol content was observed the highest in CSEE (188.71 ${\mu}g/mL$), and occurred in the following order: CSEE>CSEW (141.11 ${\mu}g/mL$)>CSEH (26.19 ${\mu}g/mL$) at 10 mg/mL. CSEE (63.56%) and CSEW (56.61%) showed significantly higher DPPH radical scavenging activities when compared with CSEH (28.57%). ABTS radical scavenging activities of CSEE (45.53%) and CSEW (40.02%) were also observed to be higher, whereas CSEH did not show ABTS radical scavenging activity. Anti-complementary activity of CSEE (26.85%) showed a greater activity than that of CSEW (7.84%) at 1,000 ${\mu}g/mL$. Limonin and nomilin contents had the highest values (1.882% and 2.089%) in CSEE, and with 0.327% and 0.139% in CSEW; however, CSEH showed relatively very low values at 0.061% and 0.026%, respectively. Among the CSEs tested, CSEE as a by-product from citron may provide an important source of dietary antioxidant compounds with rich polyphenol and limonoid contents, and immunopotentiating activity, including the complement activation factor.

• 생명과학회지
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• 제12권1호
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• pp.87-95
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• 2002

고추잎의 열수추출을 행하여 추출물의 보체계 활성을 측정한 결과 열수추출물에서 높은 항보체 활성이 나타나 고추잎의 열수추출물을 대상으로 활성 다당을 분리하여 특성을 조사하였다. 즉 열수추출물의 메탄을 환류, 에탄을 침전, 투석 및 동결건조를 통하여 고추일 600 g으로부터 186g의 조다당(CAL-0)을 얻었다. CAL-0는 당 51.8%, 산성당 8.2%, 단백질 16.8%를 함유하고 있었으며 주로 arabinose, glucose, galactose로 구성되어 있었다. 조다당 CAL-0는 pronase 처리에서 활성의 변화가 없었으나 과요오드산 산화에 의해서 급격히 활성이 감소하였다. 또한 CAL-0의 항보체 활성은 $Ca^{2+}$이온 존재 유무시의 항보체 활성과 교차면역 전기영동 결과 고전경로와 부경로를 통하여 보체계를 활성화하는 것이 관찰되었다. 이 조다당 CAL-0를 DEAE Sepharose CL-6B을 사용하여 0$\longrightarrow$1 M NaCl로 이온교환 크로마토그래피를 행하여 1개의 비흡착획분과 6개의 흡착획분을 얻었다. 이중 증류수(CAL-1)와 0.1 M NaCl에서 용출된 획분(CAL-2)이 다른 획분에 비해 높은 보체계 활성을 보였으며 활성 획 분들에서는 주로 arabinose, galactose, glucose가 다양한 비율의 몰비로 구성되어 있었다. CAL-2 획분은 Sepharose CL-6B의 gel filtration에서 고분자 peak와 저분자 peak로 분리되었으며 항보체 활성은 분자량 61,000 정도의 고분자 획분에서 높게 나타났다.

• 한국식품영양학회지
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• 제9권4호
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• pp.490-495
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• 1996

홑파래로부터 황산기를 함유한 다당체를 크로마토그래프로 분리정제하여 rhamnan sulfate가 항보체 활성화에 미치는 영향을 조사하였다. 항보체 활성능력은 F-4-3 획분을 비교군으로 Heparin H-180, Dextran과 비교해 결과 비교군보다 높았고, C4a와 C3a의 C convertase의 형성과 기능을 F-4-3 획분이 억제하였다. 이러한 보체 활성화 양식은 classical pathway 및 alternative pathway로도 경유함을 알 수 있었다.

• 한국식품과학회지
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• 제34권5호
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• pp.879-884
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• 2002

감잎으로부터 항보체 활성물질을 분리정제하기 위해 감잎 (250 g)을 $100^{\circ}C$에서 3시간 동안 열수 추출하고 분자량 10 kDa membrane을 사용하여 농축한 후 ethanol 침전과 methanol 추출을 통해 조다당류(DKC)를 얻었다. 조다당류의 정제는 DEAE-Toyopearl 650C와 Bio-gel P60을 사용하여 실시하였다. 정제된 DKC-1c는 $1000\;{\mu}g/mL$의 농도에서 고전경로를 통해서는 85.4% 활성화시켰고 부경로에서는 65.1% 활성화시켰다. 정제 다당류 DKC-1c는 분자량은 66.6 kDa이고 정제도가 높은 중성다당류로써 주요 구성당은 glucose(29.0 mol.%), arabinose(24.3 mol.%), galactose(16.2 mol.%) 순으로 검출되었다. 면역전기영동을 통하여 확인한 결과 DKC-1c는 C3를 부경로에서도 C3a와 C3b로 활성화시키는 complement activator임이 확인되었다.

• BMB Reports
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• 제33권6호
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• pp.440-447
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• 2000

In this study HepG2 cells were used to express and purify HBV pol proteins. In order to facilitate purification of HBV pol proteins, HBV pol and its deletion mutants were fused to MBP (Maltose Binding Protein). As a result we successfully expressed and partially purified both wild type and mutant recombinant HBV pol proteins by using an amylose resin and anti-MBP antibody. In the case of wild type, the anti-MBP antibody detected three bands. One was full-length and the others were generated by proteolysis of the terminal domain region. The expressed MBP/POL proteins were localized both in the cytoplasm and in the perinuclear region. The purified proteins had polymerase activity toward an exogenous homo-polymer template. The MBP/POL protein also had DNA synthesis activity in vivo, since the MBP/POL expression construct was able to complement a HBV polymerase mutant in trans.

• 한국식품영양학회지
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• 제7권3호
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• pp.159-168
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• 1994

From the hot water extract of bracken(Pteridium aquilinum var. latiusculum), a Korean win edible plant, anti-complementary acidic polysaccharides were Isolated. Crude polysaccharide fraction(HPA-1) was obtain ed by methanol reflux, ethanol precipitation, dialysis, and lyophilization. HPA-1 contained 81.80% of total sugar, 30.40% of uronic acid, and 15.60cA of protein. HPA 1 was purified consecutively by cetavlon fractionation and chromatography including ion exchange nth DEAE-Sepharose CL 6B and gel permeation with Sephadex G-100 and Sepharose CL-6B. HPA-2- IVa and HPA-Va-2 were nearly homogeneous on HPLC and had 500,000 and 560,000 daltons of molecular weights, respectively. HPA-2-Wa consisted of fucose, galacturonic acid, and glucuronic acid at the molar ratio of 1.40 : 0.97 : 1.88. HPA-2-Va 2 was composed of rhamnose, galactose, and galacturonic acid at the molar ratio of 1.00 : 1.38 : 1.39. The polysaccharides were found to activate the C3 component both In the presence and In the absence of Ca2+ through the crossed-immunoelectrophoresis suggesting that those Involved in both classical and alternative complement pathway.

• Applied Biological Chemistry
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• 제41권1호
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• pp.60-66
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• 1998

10종의 식용 버섯 자실체에 대한 항보체 활성 검색에서 가장 높은 활성을 나타낸 양송이버섯 자실체를 대상으로 항보체 활성물질의 추출조건을 조사하였다. 최적조건으로서 5% urea가 함유된 0.1 N NaOH 용액으로 $65^{\circ}C$에서 2시간동안 양송이버섯 자실체를 추출한 후 methanol 가용획분이 제거된 조다당 획분 AB-0를 얻었다. AB-0는 1 mg/ml에서 90% 이상의 높은 항보체활성을 나타내었으며 마우스에 이식된 sarcoma-180에 대하여 74%의 저지효과를 보였다. AB-0를 acetone 농도에 따른 침전 분획을 실시하여 AB-20, AB-40, AB-60, AB-80, AB-A의 5개의 획분을 얻었다. 이중 가장 높은 항보체활성과 수율을 나타낸 AB-20 획분은 탄수화물 39%, 단백질 46%를 함유하였으며, 구성당은 glucose, arabinose, xylose, galactose, mannose가 6.49 : 1.98 : 1.24 : 1.00 : 0.71의 비율로 존재하였고 구성아미노산은 isoleucine(12.60%), glutamic acid+glutamine(12.45%), valine(11.79%), alanine(11.46%), leucine(10.19%)와 aspartic acid, asparagine(10.56%) 등 이었다. Pronase 처리한 AB-20에서는 78.5%의 항보체활성을 나타내고 대조군에 비해 14.5% 감소하였으나, AB-20의 periodate 산화물에서는 활성이 42.6%로 50% 이상 크게 감소하였다. 따라서 양송이 버섯의 알칼리 추출물중 가장 강한 활성을 보인 AB-20의 주요 활성부위는 다당류이며 단백질도 일부 관여하는 것으로 생각되었다.