The intervertebral disc in the anterior portion of the function unit gives the spine its flexibility. The disc is attached closely to the vertebral endplates. Between these endplates and the annulus fibrosus, the nucleus pulposus of the lumbar disc is enclosed in a circle of unyielding tissues. Compressive pressure placed on the disc is dissipated circumferentially in a passive manner In response to the greater axial forced exerted on the lumbar spine in comparison to the cervical and thoracic spines, the nucleus pulposus has its greatest surface area in the lumbar spine. The intervertebral disc is not only structure that helps diss pate stresses placed on the spine. With flexion, extension, rotation, or shear stress, the load distribution on the function unit is shared by the intervertebral disc, anterior and posterior longitudinal ligaments, the facet joints and capsules, and other ligamentous structures like the ligamentum flavum, interspinous and supraspinous ligaments, which attach to the posterior elements of the functional unit.
Demineralized bone particle (DBP) has been used as one of the powerful inducers of bone and cartilage tissue specialization. In this study, we fabricated DBP/PLGA scaffold for tissue engineered disc regeneration. We manufactured dual-structured scaffold to compose inner cylinder and outer doughnut similar to nature disc tissue. The DBP/PLGA scaffold was characterized by porosity, wettability, and water uptake ability. We isolated and cultured nucleus pulposus (NP) and annulus fibrosus (AF) cells from rabbit intervertebral disc. We seeded NP cells into the inner core of the hybrid scaffold and AF cells into the outer portion of it. Cellular viability and proliferation were assayed by 3-(4,5-dimethylthiazole-2-yl) -2,5- diphenyltetrazolium -bromide (MTT) test. PLGA and PLGA/DBP scaffolds were implanted in subcutaneous of athymic nude mouse to observe the formation of disc-like tissue in vivo. And then we observed change of morphology and hematoxylin and eosin (H&E). Formation of disc-like tissue was better DBP/PLGA hybrid scaffold than control. Specially, we confirmed that scaffold impregnated 20 and 40% DBP affected to proliferation of disc cell and formation of disc-like tissue.
So, Jeong-Won;Jang, Ji-Wook;Kim, Soon-Hee;Choi, Jin-Hee;Rhee, John-M.;Min, Byung-Hyun;Khang, Gil-Son
Polymer(Korea)
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v.32
no.6
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pp.516-522
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2008
Biodegradable polymers have been used extensively as scaffolding materials to regenerate new tissues and the ingrowth of tissue have been reported to be dependent directly of the porosity, pore diameter, pore shape, and porous structure of the scaffold. In this study, porous poly (L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds with five different pore sizes were fabricated to investigate the effect of pore sizes for AF tissue regeneration. Cellular viability and proliferation were assayed by MTT test. Hydroxyproline/DNA content of AF cells on each scaffold was measured. sGAG analyses were performed at each time point of 2 and 6 weeks. Scaffold seeded AF cells were implanted into the back of athymic nude mouse to observe the difference of formation of disc-like tissue depending on pore size in vivo. We confirmed that scaffold with $180{\sim}250{\mu}m$ pores displayed high cell viability in vitro and produced higher ECM than scaffold with other pore sizes in vivo.
Chun, Se-Woong;Park, Young-Seop;Heo, Won;Baek, Kyeonghee;Moon, Jin Il
Investigative Magnetic Resonance Imaging
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v.21
no.2
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pp.109-113
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2017
A 55-year-old male presented with dysesthesia of the right anteromedial thigh. A magnetic resonance image revealed a globular mass at the right extraforaminal area of the L3/4 level. Based on the diagnosis of neurogenic tumor, surgical excision was performed. The surgical impression and pathology confirmed extrusion of intervertebral disc. In a retrospective review of the magnetic resonance image, we noticed a fibrillary pattern directed from the intervertebral disc space to the lesion, and disrupted annulus fibrosus and indentation caused by the ring apophysis. We suggest aforementioned features, indicative of intervertebral disc lesions, to be checked when interpreting mass lesions around the intervertebral foramen.
Kim, Joo Han;Park, Jin Hyun;Moon, Hong Joo;Kwon, Taek Hyun;Park, Youn Kwan
Journal of Korean Neurosurgical Society
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v.55
no.5
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pp.237-243
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2014
Objective : Symptomatic disc degeneration develops from inflammatory reactions in the annulus fibrosus (AF). Although inflammatory mediators during annular inflammation have been studied, the roles of matrix metalloproteinases (MMPs) and their inhibitors have not been fully elucidated. In this study, we evaluated the production of MMPs and tissue inhibitors of metalloproteinase (TIMPs) during annular inflammation using an in vitro co-culture system. We also examined the effect of notochordal cells on annular inflammation. Methods : Human AF (hAF) pellet was co-cultured for 48 hours with phorbol myristate acetate-stimulated macrophage-like THP-1 cells. hAF pellet and conditioned media (CM) from co-cultured cells were assayed for MMPs, TIMPs, and insulin-like growth factor (IGF)-1 levels using real-time reverse-transcriptase polymerase chain reaction and enzyem-linked immunosorbent assay. To evaluate whether notochordal cells affected MMPs or TIMPs production on annular inflammation, hAF co-cultured with notochordal cells from adult New Zealand White rabbits, were assayed. Results : MMP-1, -3, -9; and TIMP-1 levels were significantly increased in CM of hAF co-cultured with macrophage-like cells compared with hAF alone, whereas TIMP-2 and IGF-1 levels were significantly decreased (p<0.05). After macrophage exposure, hAF produced significantly more MMP-1 and -3 and less TIMP-1 and -2. Interleukin-$1{\beta}$ stimulation enhanced MMP-1 and -3 levels, and significantly diminished TIMP-2 levels. Co-culturing with rabbit notochordal cells did not significantly influence MMPs and TIMPs production or COL1A2 gene expression. Conclusion : Our results indicate that macrophage-like cells evoke annular degeneration through the regulation of major degradative enzymes and their inhibitors, produced by hAF, suggesting that the selective regulation of these enzymes provides future targets for symptomatic disc degeneration therapy.
Kong, Min-Ho;Do, Duc-H.;Miyazaki, Masashi;Wei, Feng;Yoon, Sung-Hwan;Wang, Jeffrey C.
Journal of Korean Neurosurgical Society
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v.44
no.5
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pp.327-333
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2008
Objective: The purpose of this study is to verify the usefulness of the rabbit model for disc degeneration study. Materials: The L1-L2, L2-L3, L3-L4. or L4-L5 lumbar intervertebral disc (IVD) of 9 mature male New Zealand White rabbits were injured by inserting a 16-gauge needle to a depth of 5 mm in the left anterolateral annulus fibrosus while leaving L5-L6 IVD uninjured. Three other rabbits also received intradiscal injections of rabbit disc cells transfected with adenovirus and bone morphogenetic protein-2 (ad-BMP-2) at L4-L5 in addition to injury by 16-gauge needle at the L1-L2 level. Using digitized radiographs, measurements of IVD height were made and analyzed by using the disc height index (DHI). Magnetic resonance imaging (MRI) scans of the injured discs, injected discs, and uninjured L5-L6 discs were performed at 15 weeks post surgery and compared with preoperative MRI scans. Results: All twelve rabbits showed consistent results of disc degeneration within 15 weeks following annular puncture. DHIs of injured discs were significantly lower than that of the uninjured L5-L6 discs (p<0.05). The mean value of disc degeneration grade of injured discs was significantly higher than that of uninjured discs (p<0.05). The injection of disc cell transfected with ad-BMP-2 did not induce disc regeneration at 15 weeks after injection. Conclusion: This study showed that the injured disc had a significant change in DHI on simple lateral radiograph and disc degeneration grade on MRI scans within 15 weeks in all rabbits. Rabbit annular puncture model can be useful as a disc degeneration model in vivo.
Background: Discogenic pain is a common cause of disability and is assumed to be a major cause of non-specific low back pain. Various treatment methods have been used for the treatment of discogenic pain. This study was conducted to compare the therapeutic success of radiofrequency (an intradiscal procedure) and laser annuloplasty (both an intradiscal and extradiscal procedure). Methods: This single-center study included 80 patients and followed them for 6 months. Transforaminal laser annuloplasty (TFLA, 37 patients) or intradiscal radiofrequency annuloplasty (IDRA, 43 patients) was performed. The main outcomes included pain scores, determined by the numeric rating scale (NRS), and Oswestry disability index (ODI), at pre-treatment and at post-treatment months 1 and 6. Results: The patients were grouped according to procedure. In all procedures, NRS and ODI scores were significantly decreased over time. Mean post-treatment pain scores at months 1 and 6 were significantly lower (P < 0.01) in both groups, and between-group differences were not significant. The ODI score was also significantly decreased compared with baseline. Among patients undergoing TFLA, 70.3% (n = 26) reported pain relief (NRS scores < 50% of baseline) at post-treatment 6 months, vs. 58.1% (n = 25) of those undergoing IDRA. There were no statistically significant differences between the groups in ODI reduction of > 40%. Conclusions: Our results indicate that annuloplasty is a reasonable treatment option for carefully selected patients with lower back and radicular pain of discogenic origin, and TFLA might be superior to IDRA in patients with discogenic low back pain.
Kim, Jaehwan;Kim, Hyoju;Hwang, Jeongyeon;Eom, Kidong
Journal of Veterinary Science
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v.21
no.4
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pp.52.1-52.11
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2020
Background: Intradural-intramedullary intervertebral disc extrusion (IIVDE) is a rare condition of intervertebral disc disease. However, the diagnosis of IIVDE is challenging because the prognosis and imaging characteristics are poorly characterized. Objectives: We aimed to describe the clinical and imaging characteristics of tentatively diagnosed IIVDE in dogs to assess the prognostic utility of neurological grade and magnetic resonance imaging (MRI) findings. Methods: Twenty dogs were included in this retrospective cohort study. Results: Nonchondrodystrophic breeds (n = 16) were more predisposed than chondrodystrophic breeds. Most dogs showed acute onset of clinical signs. Neurological examination at admission showed predominant non-ambulatory paraparesis (n = 9); paresis (n = 16) was confirmed more frequently than paralysis (n = 4). Follow-up neurological examination results were only available for 11 dogs, ten of whom showed neurological improvement and 8 showed successful outcomes at 1 month. The characteristic MRI findings include thoracic vertebra (T)2 hyperintense, T1 hypointense, intramedullary linear tracts with reduced disc volume, and cleft of the annulus fibrosus. None of the MRI measurements were significantly correlated with neurological grade at admission. Neurological grade did not differ according to the presence of parenchymal hemorrhage, parenchymal contrast enhancement, and meningeal contrast enhancement. Neurological grades at admission showed a statistical correlation with those observed at the 1-month follow-up (r = 0.814, p = 0.02). Conclusions: IIVDE is a rare form of disc extrusion commonly experienced after physical activity or trauma and most frequently affects the cranial-cervical and thoracolumbar regions of nonchondrodystrophic dog breeds. Neurological score at admission emerged as a more useful prognostic indicator than MRI findings in dogs with suspected IIVDE.
Because demineralized bone particle (DBP) contains various bioactive molecules such as cytokines, it is widely used biomaterials in the field of tissue engineering. In this study, we investigated the effect of 2-dimensional DBP/PLGA hybrid films on adhesion, proliferation and phenotype maintenance of intervertebral disc cells. PLGA films incorporated with different amount (0, 10, 20, 40 and 80 wt%) of DBP were prepared by the solvent evaporation method and characterized by scanning election microscopy (SEM). PLGA film has a flat and smooth surface. According to the increase of content of DBP, the surface of DBP/PLGA film exhibited few agglomerates and increased the roughness of the surface. Annulus fibrosus (AF) and nucleus pulposus (NP) cells were cultured on PLGA and DBP/PLGA film surface, and then examined the cell adhesion and proliferation by the cell count and SEM observation. The result of cell count and SEM observation revealed that 10 and 20% DBP in DBP/PLGA films were superior to adhesion and proliferation of both AF and NP cells. We confirmed that specific gene expression of disc cells on DBP/PLGA film based on the cell count result. Disc cells seeded on 20% DBP/PLGA film expressed the gene of type I and II collagen continuously. Therefore, pertinent content of biomaterials could provide more appropriate condition on adhesion and proliferation of cell. And this results may be used as a basic data for the intervertebral disc regeneration using tissue engineering.
The purpose of this study is to investigate the potential of a novel tissue engineering approach to regenerate intervertebral disc. In this study, thermosensitive scaffold (chitosan-Pluronic hydrogel) and nanofiber were used to replace the nucleus pulposus (NP) and annulus fibrosus of a degenerated intervertebral disc, leading to an eventual regeneration of the disc using the minimally invasive surgical procedure and organ culture. In preliminary study, disc cells were seeded into the scaffolds and cellular responses were assessed by MTT assay and scanning electron microscopy (SEM). Based on these results, we could know that tissue engineered scaffolds might provide favorable environments for the regeneration of tissues. Organ culture was performed in fresh porcine spinal motion segments with endplates on both sides. These spinal motion segments were classified into three groups: control (Intact), injured NP (Defect), and inserting tissue engineered scaffolds (Insert). The specimens were cultivated for 7 days, subsequently structural stability, cell proliferation and morphological changes were evaluated by the relaxation time, quantity of DNA, GAG and histological examination. In these results, inserting group showed higher relaxation time, reduced decrement of DNA contents, and accumulated GAG amount. Consequently, the tissue engineered scaffolds used in this study seen to be a promising base scaffolds for regenerative intervertebral disc due to its capacity to absorb external dynamic loading and the possible ideal environment provided for disc cell growing.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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