Human leptin is a 16 kDa (146 amino acids) protein secreted from adipocytes and influences body weight homeostasis. In this report, active human leptin was successfully produced in the culture medium of Bacillus subtilis. After simple purification steps consisting of ammonium sulfate precipitation and anion-exchange column chromatography, 2.3 mg of leptin with a purity of greater than 95% was obtained from the 0.5 L culture with the recovery yield of 54.9%. The purified leptin showed the correct folding structure with one disulfide bond.
The elution behaviors of molybdate and tungstate through anion exchange column have been investigated in the various concentration of hydrochloric and perchloric acid. A discussion is made to evaluate the existing these equilibrium and constant according to acidity. In both acids of 0.01-2.0 M concentration range, the existing equilibrium for molybdate and its constant calculated at $20^{\circ}C$ is $10^{18.9}$ for $Mo_8O_2^{4-} + 20H^+ {\rightleftharpoons} 8MoO_2^{2+} + 10H_2O$. In the 3-3.5 M hydrochloric acid it is 0.16 for $MoO_2Cl_2 + Cl^- {\rightleftharpoons} MoO_2Cl^{3-}$ and for the case of tungstate, in the both acids of 0.01-1.0 M concentration range $10^{6.6}$ for $W_{12}O_{39}^{6-} + 6H^+ {\rightleftharpoons} 12WO_3{\cdot}3H_2O$. In higher concentration than 1.0 M both acids the following equilibrium seems to be existed. $12WO_3{\cdot}3H_2O {\rightleftharpoons} 12WO_3 + 3H_2O$
Seo, Jeong-Hyeon;Lee, Hong-Tae;Kim, Tae-Kyung;Cho, Young-Hoon;Oh, Taek-Keun;Park, HoSik
Membrane Journal
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v.32
no.5
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pp.348-356
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2022
With the development of the bio industry, membrane chromatography with a high adsorption efficiency is emerging to replace the existing column chromatography used in the downstream processes of pharmaceuticals, food, etc. In this study, through the deacetylation reaction of two commercial cellulose acetate (CA) membranes with different pore sizes, the porous regenerated cellulose (RC) supports for membrane chromatography were obtained to attach the anion exchange ligands. The adsorptive membranes for anion exchange were prepared by attaching an anion exchange ligand ([3-(methacryloylamino) propyl] trimethylammonium chloride) containing quaternary ammonium groups on the RC supports by grafting and UV polymerization. The protein adsorption capacities of the prepared membranes were obtained through both the static binding capacity (SBC) and the dynamic adsorption capacity (DBC) measurement. As a result, the membrane chromatography with the smaller the pore size, the larger the surface area showed the highest protein adsorption capacity. Membrane chromatography which was prepared by using deacetylated commercial CA support with MAPTAC ligand (i.e., RC 0.8 + MAPTAC: 43.69 mg/ml, RC 3.0 + MAPTAC: 36.33 mg/ml) showed a higher adsorption capacity compared to commercial membrane chromatography (28.38 mg/ml).
An anion exchange method for separating Y, La, Ce, Pr, and Nd element in monazites and into enriched fractions has been developed. The complexed rare earth ions with EDTA at pH 8.4 passed through the resin column of the various size and eluted with 0.0301 M EDTA as eluent at flow rate of 1 ml/min and 2 ml/min. The result of separation is good in the high column length rather than the low on using the resin of the same amount and the volume of eluent required in eluting all the rare earths at 2 ml/min flow rate is larger than that at 1 ml/min and the result of separation obtained here is unsatisfactory.
Huang, Long Shuang;Sok, Dai-Eun;Kim, Hyoung-Chin;Yoon, Won-Kee;Kim, Hwan-Mook;Kim, Mee-Ree
Preventive Nutrition and Food Science
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v.11
no.1
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pp.67-72
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2006
To determine the amount of phytate in rice grains from various cultivars, two methods were employed and compared in respect of the accuracy and conveniency. Phytate in rice samples was extracted with HCl, and then the extracts were subjected to an anion-exchange column. Finally, the phytate in eluate was quantitated using two methods: one method is based on the complex formation between ferric ion and sulfosalicylic acid in the presence of phytate, and the other is the prior acid digestion of phytate sample, followed by the colorimetric determination of liberated phosphorus. Although two methods showed similar values of phytate in rice samples, the former method is simpler and more precise than the latter. Moreover, the former is more reliable for the samples with lower phytate levels. Especially, the dilution condition of rice sample before anion exchange column separation was important for the recovery of phytate in rice samples. Based on the former method, the amount of phytate in rice of various cultivars was estimated to range from 7.3 mg/g to 12.4 mg/g rice. This method would be useful for the determination of phytate in crop samples with a lower level of phytate, one of anti-nutrients in some agricultural plants.
Park, Cheon-Seok;Woo, Eui-Jeon;Kuk, Seung-Uk;Seo, Byung-Cheol;Park, Kwan-Hwa;Lim, Hoon
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.20
no.2
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pp.156-163
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1992
Bacillus sp. was isolated from soil for its strong activity of cyclodextrin glucanotransferase (CGTase, EC 2.4.1.19). The enzyme was purified by gel filtration and anion exchange column chromatography using FPLC. The purified enzyme exhibited its maximum CGTase activity in the pH range of 6~8 and the temperature range of 50~$70^{\circ}C$. The molecular weight was estimated as 114,000 by SDS-PAGE. The isoelectric point of the enzyme was 4.3. The CGTase of Bacillus sp. E l produced $\beta$-cyclodextrin mainly and did not produce a-cyclodextrin. The product ratio of $\beta$-cyclodextrin to $\gamma$-cyclodextrin was 7:l.
Proceedings of the Korean Radioactive Waste Society Conference
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2003.11a
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pp.351-357
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2003
Transuranic elements such as Pu, Am and Cm in synthetic solution of spent nuclear fuel samples were determined by electrodeposition followed by alpha-spectrometry after separation using anion exchange and extraction chromatography in order to determine the transuranic elements in radwaste samples from nuclear power plants. Plutonium was separated by 12M HC1-0.1M HI as an eluent on anion exchange column. As a second step Am and Cm were separated in a group by DTPA-Lactic acid as the eluent on HDEHP coated column. The nuclides of $^{239}Pu$, $^{241}Am$및 $^{244}Cm$ separated were determined by alpha-spectrometry after electrodeposition in 0.1M $NaHSo_4$-0.53M $Na_2SO_4$buffer solution as an electrolyte. The recovery yields of $^{239}Pu$, $^{241}Am$및 $^{244}Cm$ were 83.8%, 85.2% and 86.3%, respectively, from the synthetic solution containing uranium and non-radioactive metal elements.
Choi, Kwang Soon;Kim, Jung Suk;Han, Sun Ho;Park, Soon Dal;Park, Yeong Jae;Joe, Kih Soo;Kim, Won Ho
Analytical Science and Technology
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v.13
no.5
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pp.584-591
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2000
The separation of Nd from the simulated $U_3Si/Al$ spent fuel solution with sequential two-step anion exchange separation has been studied. To prepare the simulated $U_3Si/Al$ spent nuclear fuel, unirradiated $U_3Si/Al$ whose composition consists of small $U_3Si$ particle dispersed in an Al matrix with Al cladding was dissolved with a mixture of 4 M HCl and 10 M $HNO_3$ and 8 or 15 fission product elements were added to the dissolved solution. The trace amount of silica in the solutions was removed by evaporating to dryness with HF and the U was adsorbed on the first anion exchange resin. Neodymium can be purely isolated from the fission product elements with a methanol-nitric acid eluent using the second anion exchange resin. A large excess of Al didn't influence on the elution velocity of Nd, but reduced the eluted contents of Nd, Al, Eu, Gd, Sm and Sr, A large amount of Al was removed first from the column with 3 mL of loading solution (0.8 M $HNO_3$/99.8% MeOH) before Nd elution by the eluent [0.04 M $HNO_3$-99.8% MeOH(1:9)]. The recovery of Nd was more than 94%, regardless of Al contents. Taking the 9 to 13 mL fraction of eluate was effective to purely isolate Nd.
The elution behaviour of molybdate and tungstate through anion exchange column has been studied at the various pH. A discussion is made to evaluate the equilibrium constants of the polymerization of these acids comparing with the behaviour of chromate ion and dichromate ion. The eqailibrium constants found at $20^{\circ}$ are $K = 4{\times}10^{53} for 7MoO_4^{2-} + 8H^+ {\longleftrightarrow} Mo7O_{24}^{6- }+ 4H_2O$$ K = 3{\times}10^{54} for 6WO_4^{2-} + 7H^+ {\longleftrightarrow} HW6O_{21}^{5-} + 7H_2O$ referring to this results the conditions of separation of tungstate and molybdate are obtained. iThe quantitative separations of carbonate, molybdate and tungstate from the pregnant solution have been established by anion exchange chromatography, using the $22 cm{\times}44.27 cm^2$ column of Rexyn 201. The optimum eluents for the quantitative separation of those ions are as follows; 0.2M solution of sodium chloride at pH 8 for carbonate, the mixture of 0.5 M ammonium chloride and 0.05 M sodium sulfate at pH 5 for molybdate and 0.5 M solution of ammonium chloride at pH 10 for tungstate. Tungstate is directly recovered from the pregnant solution as a form of ammonium paratungstate, by eluting with ammonium chloride solution.
Park, Jong-Ok;Yoon, Mi-Sun;Cho, Eun-Jung;Kim, Hee-Sook;Ryu, Byung-Ho
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.31
no.5
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pp.1378-1385
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1999
The antioxidative activity of Fermented Anchovy on linoleic acid autooxidation was investigated in an aqueous system at pH 7.0. All solvent fractions from Fermented Anchovy were exhibited the strong antioxidative activity. Especially, BuOH and aqueous fractions were gained large amounts with strong antioxidative activity. Ultrafiltration, dialysis, heat treatment of aqueous fraction indicated that water-soluble antioxidants of Fermented Anchovy were heat-resistant, amino acid related compounds with smaller molecular weights than 1,000. Unbound fractions from DE-52 anion exchange chromatography were exhibited antioxidative activity with or without $15\;{\mu}M\;Fe^{+++}\;ion$. We were able to purify one methionine derivative from lots of antioxidative substances in Fermented Anchovy aqueous fraction by gel filtration, anion-exchange chromatography, TLC and HPLC, successfully. These data suggest that Fermented Anchovy aqueous fraction is a mixture of fermented small molecules with strong antioxidative activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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