The relationship of Oct-4 to pluripotent cells is suggested by its tightly restricted expression pattern during embryonic development. Just prior to implantation it is limited to pluripotent cells of the inner cell mass (ICM) that will form the embryo proper but is not expressed in the trophectoderm, the structure that will form the extraembryonic tissues. (omitted)
Arachidonic acid (AA) is a polyunsaturated fatty acid that is a normal constituent of membrane lipids in animal cells. In addition to its role as a precursor of prostaglandins, AA itself may play an important role in the regulation of cell function. The effect of AA on functions of granulosa cells was investigated in pre-hierarchical small yellow follicles of laying hens. Immuno-cytochemical staining showed that AA ($10^{-7}-10^{-5}$ M) increased the expression of the extracellular matrix glycoprotein laminin, gap junction connexin 43 and protein kinase C (PKC). Therefore, mediated by the PKC signal pathway, AA may regulate the intercellular communication of granulosa cells and follicular development by increasing the expression of laminin and connexin.
Busulfan is the most commonly used drug for preconditioning during the transplantation of hematopoietic stem cells and male germ cells. Here, we describe side effects of high doses of busulfan in male mongrel dogs. Busulfan was intravenously administered to three groups of dogs at doses of 10, 15, and 17.5 mg/kg body weight. The total white blood cell, neutrophil, eosinophil, lymphocyte, monocyte, and platelet counts steadily reduced in a dose-dependent manner following busulfan treatment. The white blood cell, neutrophil, and monocyte counts recovered after 6 weeks of busulfan treatment, however, the eosinophil, lymphocyte, and platelet counts remained unaltered. Additionally, there was one fatality in the each of the groups that were administered 15 and 17.5 mg/kg busulfan. The gross lesions included severe hemorrhage in the stomach, intestinal tracts, mesentery and urinary bladder. Microscopic investigation revealed severe pulmonary edema and hemorrhage in the lungs, and severe multifocal to coalescing transmural hemorrhage in the intestines and urinary bladder. These results indicated that treatment with busulfan at doses higher than 15 mg/kg initiates severe bleeding in the internal organs and can have fatal results.
The objective of this study was to establish the optimum protocol for the isolation and culture of porcine muscle satellite cells. Mononuclear muscle satellite cells are a kind of adult stem cell, which is located between the basal lamina and sarcolemma of muscle fibers and is the primary source of myogenic precursor cells in postnatal muscle. Muscle satellite cells are a useful model to investigate the mechanisms of muscle growth and development. Although the isolation and culture protocols of muscle satellite cells in some species (e.g. mouse) have been established successfully, the culture system for porcine muscle satellite cells is very limited. In this study, we optimized the isolation procedure of porcine muscle satellite cells and elaborated the isolation and culture process in detail. Furthermore, we characterized the porcine muscle satellite cells using the immunofluorecence. Our study provides a reference for the isolation of porcine muscle satellite cells and will be useful for studying the molecular mechanisms in these cells.
The purpose of this study was to examine the effects of taurine and vitamin E on ovarian granulosa cells damaged by bromopropane (BP) in pigs. We evaluated cell viability, plasma membrane integrity (PMI) and apoptotic morphological change in porcine ovarian granulosa cells. The cells were treated with 1-BP (0, 5.0, 10, and $50{\mu}M$), 2-BP (0, 5.0, 10, and 50 mM), taurine (0, 5.0, 10, and 25 mM), and vitamin E (0, 100, 200, and $400{\mu}M$) for 24 h. $10{\mu}M$ 1-BP and $50{\mu}M$ 2-BP inhibited viability and PMI, and induced apoptosis in porcine ovarian granulosa cells (p < 0.05). Cell viability and PMI were increased by taurine (10 and 25 mM) and vitamin E (100 and $200{\mu}M$), and apoptosis decreased (p < 0.05). Finally, the porcine ovarian granulosa cells were co-treated with BPs ($10{\mu}M$), taurine (10 mM) and/or vitamin E ($200{\mu}M$). Cell viability and PMI in the co-treated cells were increased, and apoptosis was decreased. In conclusion, taurine and vitamin E can improve cell viability and inhibition of apoptosis in porcine ovarian granulosa cells damaged by bromopropane.
Kim, Hack-Youn;Kim, Cheon-Jei;Han, Sung Gu;Lee, Sunah;Choi, Kyoung-Hee;Yoon, Yohan
Food Science of Animal Resources
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v.34
no.1
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pp.20-25
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2014
This study evaluated the effects of frankfurter fat content on Listeria monocytogenes resistance to heat stress and gastric fluid, and the Caco-2 cell invasion efficiency of the pathogen. A 10-strain mixture of L. monocytogenes was inoculated on frankfurters formulated with 10%, 20%, and 30% fat content (10%: F10, 20%: F20, 30%: F30) and stored at $10^{\circ}C$ for 30 d. The samples were analyzed for L. monocytogenes resistance to heat stress and a simulated gastric fluid challenge. The total bacteria and L. monocytogenes survival rates were measured on tryptic soy agar plus 0.6% yeast extract and Palcam agar, respectively. L. monocytogenes colonies inoculated on F10, F20, and F30 samples were used for a Caco-2 cell invasion assay. In general, no obvious differences were observed between the survival rates of total bacteria and L. monocytogenes grown on different fat contents under heat stress and gastric fluid challenge. However, L. monocytogenes obtained from the F30 samples had a significantly higher Caco-2 cell invasion efficiency than those in the F10 and F20 samples (p<0.05). These results indicate that although high fat content in food may not be related to L. monocytogenes resistance to heat stress and gastric fluid, it may increase the Caco-2 cell invasion efficiency of the pathogen.
The cytotoxic effects of partially purified substances from Bacillus polylfermenticus SCD toward a variety tumor cell lines were studied. Cytotoxic activity was determined with regard to the A549 (human lung carcinoma), AGS (human stomach adenocarcinoma), DLD-1 (human colon adenocarcinoma), HEC-1-B (human uterus adenocarcinoma), SW-156 (human kidney carcinoma), and NIH/3T3 (murine normal fibroblast) cell lines using the MTT assay. Cytotoxic substances were partially purified through Diaion HP-20 columns and extracted with methanol or other organic solvents (n-hexane, chloroform, ethylacetate, and butanol). B. polyfermenticus SCD supernatant showed up to 60% inhibition of cell viability fer all five human cancer cell lines tested. When treated with 10 mg/mL of n-hexane, chloroform, ethylacetate, and butanol extract, HEC-1-B cells showed a 25,62,35, and 63% rate of inhibition respectively, and AGS cells showed a 72, 61, 44, and 67% rate of inhibition, respectively. At a concentration of 10 mg/mL, 100% methanol Diaion HP-20 extracts showed inhibition rates of 97.0% toward A-549 cells, 98.1% toward AGS cells, 81.6% toward DLD-1 cells, 83.5% toward HEC-1-B cells, and 92.7% toward SW-156 cells. These results indicate that partially purified fractions from B. polyfermenticus SCD have the potential to inhibit not only colon cancer cells, but also lung, stomach uterus, and kidney cancer cells. Further studies are needed to characterize the cytotoxic substances released in B. polyfermenticus SCD cultures.
Saravanan, T.;Nainar, A. Mahalinga;Kumanan, K.;Kumaresan, A.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.16
no.5
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pp.650-654
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2003
The accuracy of Polymerase chain reaction (PCR) assay in sexing of sheep embryos was assessed in this study. A total of 174 ovine embryos produced in vitro at different stages of development (2, 4-8 cell stages, morula and blastocyst) were sexed. The universal primers (P1-5EZ and P2-3EZ) used in this assay amplified ZFY/ZFX-specific sequences and yielded a 445 bp fragment in both sexes. Restriction enzyme analysis of ZFY/ZFX-amplified fragments with Sac I exhibited polymorphism between sexes, three and two fragments in males and in females, respectively. For verification of accuracy, blood samples of known sex were utilized as positive controls in each test. The mean percentages of sex identification by this method at 2 cell, 4-8 cell, morula and blastocyst were $73.00{\pm}5.72$, $89.77{\pm}3.79$, $3.33{\pm}8.08$ and $79.6{\pm}9.09$, espectively with the over all male to female ratio of 1:0.87. It is concluded that the ZFY/ZFX based method is highly reliable for the sexing of sheep embryos.
Bovine fibroblasts were cultured in Dulbecco's Modified Eagle's Medium and then treated with control, insulin (I, $1{\mu}g/ml$), cholera toxin (CT, 0.1-100 ng/ml) or CT (0.1-100 ng/ml) + I ($1{\mu}g/ml$). Cholera toxin, an activator of adenylate cyclase, significantly decreased insulin induced DNA synthesis (p<0.05). The modulation of DNA synthesis apparently involves events occurring in early stage of cell growth, at least between the first 4 and 8 hour of CT treatment. Insulin induced collagen as well as noncollagen synthesis in cell layer, however, these syntheses were reduced by addition of cholera toxin (p<0.05) but were not completely reduced. It is not clear whether the reduction of insulin-induced cell layer collagen or noncollagen proteins by CT is involved in the inhibitory effect on insulin-induced DNA synthesis. However, we could rule out the hypothesis that insulin-induced DNA synthesis is reduced by CT-induced cellular differentiation.
A screening of Nepalese wild herbs for their antioxidant and antiobesity activity was carried out. The herbs including Allium hyposistum, Crateva unilocularis, Dryoathyrium boryanum and Cuscuta reflexa are widely used traditionally for various medicinal purposes in Nepal. The ethyl acetate fraction of D. boryanum showed polyphenol content of 266 ${\mu}g$GAE/mg with potent antioxidative activity assessed by DPPH free radical scavenging activity and hydrogen peroxide scavenging activity. The EtOAC fraction of D. boryanum also inhibited the lipid formation with 35% at 100${\mu}g/ml$ in 3T3-L1 cell model. Along with this, butanol fraction of C. reflexa also showed potent antioxidative activity and inhibition of 80% of lipid formation at the test concentration of 75 ${\mu}g/ml$ in 3T3-L1 cell line. This showed that these plant extracts have potential of antioxidant and antiobesity activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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