The objective of this work was to study the direct effects of daidzein on steroidogenesis in cultured mouse Leydig cells. Adult mouse Leydig cells were purified by Percoll gradient centrifugation, and the cell purity was determined using a $3{\beta}$-hydroxysteroid dehydrogenase ($3{\beta}$-HSD) staining method. The purified Leydig cells were exposed to different concentrations ($10^{-7}$ M to $10^{-4}$ M) of daidzein for 24 h under basal and human chorionic gonadotropin (hCG)-stimulated conditions. The cell viability and testosterone production were determined, and the related mechanisms of daidzein action were also evaluated using the estrogen receptor antagonist ICI 182,780 and measuring the mRNA levels of steroidogenic acute regulatory protein (StAR), cholesterol side-chain cleavage enzyme (P450scc), and $3{\beta}$-HSD-1 involved in testosterone biosynthesis. The results revealed that daidzein did not influence cell viability. Daidzein increased both basal and hCG-stimulated testosterone production in a dose-dependent manner, and this effect was statistically significant at concentrations of $10^{-5}$ M and $10^{-4}$ M daidzein (p<0.05). ICI 182,780 had no influence on daidzein action. RTPCR results revealed that $10^{-5}$ M and $10^{-4}$ M daidzein did not exert any obvious influence on the mRNA level of P450scc in Leydig cells. However, in the presence of hCG, these concentrations of daidzein significantly increased the StAR and $3{\beta}$-HSD-1 mRNA levels (p<0.05), but in the absence of hCG, only $10^{-5}$ M and $10^{-4}$ M daidzein up-regulated the StAR and $3{\beta}$-HSD-1 mRNA expression (p<0.05), respectively. These results suggest that daidzein has direct effect on Leydig cells. Daidzein-induced increase of testosterone production is probably not mediated by the estrogen receptor but correlates with the increased mRNA levels of StAR and $3{\beta}$-HSD-1.
The role of moisture absorptive capacity of pre-silage material and its relationship with silage effluent in high moisture by-product feedstuffs (HMBF) is assessed. The term water retention capacity which is sometimes used in explaining the rate of effluent control in ensilage may be inadequate, since it accounts exclusively for the capacity of an absorbent incorporated into a pre-silage material prior to ensiling, without consideration to how much the pre-silage material can release. A new terminology, 'potential water retention capacity' (PWRC), which attempts to address this shortcoming, is proposed. Data were pooled from a series of experiments conducted separately over a period of five years using laboratory silos with four categories of agro by-products (n = 27) with differing moisture contents (highest 96.9%, lowest 78.1% in fresh matter, respectively), and their silages (n = 81). These were from a vegetable source (Daikon, Raphanus sativus), a root tuber source (potato pulp), a fruit source (apple pomace) and a cereal source (brewer's grain), respectively. The pre-silage materials were adjusted with dry in-silo absorbents consisting wheat straw, wheat or rice bran, beet pulp and bean stalks. The pooled mean for the moisture contents of all pre-silage materials was 78.3% (${\pm}10.3$). Silage effluent decreased (p<0.01), with increase in PWRC of pre-silage material. The theoretical moisture content and PWRC of pre-silage material necessary to stem effluent flow completely in HMBF silage was 69.1% and 82.9 g/100 g in fresh matter, respectively. The high correlation (r = 0.76) between PWRC of ensiled material and silage effluent indicated that the latter is an important factor in silage-effluent relationship.
Laminaria japonica is a type of brown algae widely consumed in Asian countries and contains many essential nutrients and exhibits anti-obesity, antioxidant, and anti-inflammatory effects. In this study, the antioxidant and immunomodulatory effects of a Laminaria japonica water extract (LJE) were investigated using an in vitro model. Mean total polyphenol content of LJE was 2.16±0.11 ㎍ GAE/mg, and LJE dose-dependently inhibited ABTS radical activity but did not scavenge DPPH radicals. In addition, LJE enhanced nitric oxide (NO) production and upregulated the mRNA expressions of proinflammatory cytokines (i.e., tumor necrosis factor-α and interleukin-6) in RAW 264.7 cells. On the other hand, LJE inhibited NO production and downregulated proinflammatory cytokine mRNA levels in endotoxin-stimulated RAW 264.7 cells. Thus, our data show that LJE has moderate antioxidant activity and biphasic immunomodulatory effects on RAW 264.7 cells. In summary, the study indicates that LJE has potential therapeutic use as a novel biphasic immuno-modulator.
Importance: The emergence and rapid increase in the incidence of multidrug-resistant (MDR) bacteria in pig farms has become a serious concern and reduced the choice of effective antibiotics. Objective: This study analyzed the phylogenetics and diversity of antibiotic resistance genes (ARGs) and molecularly identified the source of ARGs in antibiotic-resistant Escherichia coli isolated from pig farms in Banten Province, Indonesia. Methods: Forty-four antibiotic-resistant E. coli isolates from fecal samples from 44 pig farms in Banten Province, Indonesia, were used as samples. The samples were categorized into 14 clusters. Sequencing was performed using the Oxford Nanopore Technologies MinION platform, with barcoding before sequencing with Nanopore Rapid sequencing gDNA-barcoding (SQK-RBK110.96) according to manufacturing procedures. ARG detection was conducted using ResFinder, and the plasmid replicon was determined using PlasmidFinder. Results: Three phylogenetic leaves of E. coli were identified in the pig farming cluster in Banten Province. The E. coli isolates exhibited potential resistance to nine classes of antibiotics. Fifty-one ARGs were identified across all isolates, with each cluster carrying a minimum of 10 ARGs. The ant(3'')-Ia and qnrS1 genes were present in all isolates. ARGs in the E. coli pig farming cluster originated mainly from plasmids, accounting for an average of 89.4%. Conclusions and Relevance: The elevated potential for MDR events, coupled with the dominance of ARGs originating from plasmids, increases the risk of ARG spread among bacterial populations in animals, humans, and the environment.
In this study, the concentrations of some of the important ionic contaminants in groundwaters of national monitoring network in Korea were identified, and their correlation to nitrate concentration was investigated. Approximately 80% of the groundwater samples were found to be as Ca2+-(Cl-+NO3-) type groundwater with the concentration ranges [minimum to maximum values, median (mg/L)] of Ca2+[0.1~228.2, 19.7], Mg2+[0.1~53.2, 5.1], K+[0.1~50.8, 1.9], Na+[1.5~130.5, 18.1], NO3--N[0.1~73.4, 9.3], NH4+-N[0.0~53.9, 0.3], Cl-[3.1~482.6, 24.0], and SO42-[2.8~101.6, 7.0]. The prevalence of Ca2+-(Cl-+NO3-) type suggest that the composition of groundwaters were greatly influcenced by chemical fertilizers and animal manure, Correlation analyses indicated threre was positive correlation between NO3--N concentration and ionic species including Cl-, Ca2+, Mg2+, and Na+. In particular, the correlation was strongest for Cl- and NO3--N, suggesting that groundwaters largely impacted by agricultural and livestock breeding activities tend to contain high levels of Cl-.
The humoral immune response of chicken vaccinated with fowl and pigeon pox virus vaccines was determined with the protective potentiality of the two vaccines in field condition of Bangladesh. Different aged Fayoumi chicks were subjected for the study. To assess the relationship with better immune response among experimental groups, the average percentage of 'take reaction' was examined and recorded to 97.77% in group A, 93.33% in group B and 100.0% in group C. The level of immune status induced by different vaccinated group was measured by passive hemagglutination (PHA) microplate test method. The mean PHA titer levels after primary vaccination were $33.06{\pm}14.13$ in group A, $32.0{\pm}14.81$ in group B, and $33.0{\pm}13.66$ in group C. Following booster vaccination, the mean PHA titer levels in prior of challenge were increased to $55.46{\pm}14.64$ in groups A and C, and $46.93{\pm}16.52$ in group B. The recorded PHA titer levels of each group at two weeks after challenge were significantly increased to $106.66{\pm}31.22$, $93.86{\pm}33.04$ and $110.93{\pm}29.29$, respectively. The PHA titer levels after vaccination and challenge were significantly increased compared to pre-vaccination titer levels (P<0.01). Although the PHA titer levels among three groups administrated different vaccine combinations in prior of challenge were significantly varied (P<0.01), it was observed that all of the vaccinated chicks were highly protected against challenge infection.
This study was performed to investigate the gross anatomical features and microscopical structures of the hemal nodes and the hemolymph nodes in the sheep. The hemal nodes and hemolymph nodes were observed mainly in periphery of the thoracic and abdominal aortae of the animals. The size of hemal nodes was generally smaller than that of the hemolymph nodes, and the shape of the both organs was spherical or ovoid. The color of the hemal nodes was red, while that of the hemolymph nodes was grary with red bands. The hemal nodes were surrounded by a relatively thick connective tissue capsule and there were extensive subcapsular sinuses distended by a great number of erythrocytes. Although a few number of lymphatic nodules and small areas of diffuse lymphatic tissues were observed in the parenchyma, no typical cortex and medulla were defined in the hemal node. Small numbers of blood vessels were found at the connective tissue capsule but lymph vessel was not observed microscopically in this organ. The hemolymph nodes were covered by a relatively thick connective tissue capsule and there was a hilus in each node. The parenchyma was divided into cortex and medulla. The cortex was composed of a few numbers of lymphatic nodules and some diffuse lymphatic tissues. The medulla comprised medullary sinuses and cords. Afferent and efferent lymph vessels were observed at the periphery of the capsule adn the hilus, respectively. The subcapsular and medullary sinuses were not extensive but filled with small numbers of erythrocytes. The stroma of hemal node and hemolymph node was composed of reticular cells and fibers, and the capsule and trabecula consisted of collagenous fibers with smooth muscle fibers.
Kim, Sung Hak;Choi, Ji Young;Sihn, Choon-Ryoul;Suh, Eun Jung;Kim, Sun Young;Choi, Kang Duk;Jeon, Iksoo;Han, Jae Yong;Kim, Tae-Yoon;Kim, Sang Hoon
Molecules and Cells
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제19권2호
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pp.185-190
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2005
The chicken oviduct is a dynamic organ that produces secretory proteins such as ovalbumin and its cells undergo cell proliferation and differentiation. There has been no study of the cellular mechanism involved in cell death in the chicken oviduct. Therefore, this study has focused on the study of apoptosis in primary oviduct cells. Because ceramide is known to activate apoptosis in tumor cells and is produced in the oviduct, we used an exogenous ceramide analog to induce cell death. The viability of ceramide-treated chicken oviduct cells decreased in a dose-dependent manner and apoptotic cells were detected by staining with annexin V. The expression of apoptosis-related genes was assessed by RT-PCR and bcl-2 mRNA was found to decrease after exposure to ceramide while Bcl-x mRNA increased 12 h post-treatment. In addition, caspase-3 was expressed strongly in the early stages of apoptosis, while caspase-1 and -9 transcripts increased at later times. We conclude that ceramide induces apoptosis in oviduct-derived primary cells via a caspase- and bcl-2-dependent pathway.
Park, Soo Hyun;Lim, Ki Taek;Lee, Hoyoung;Lee, Soo Hee;Noh, Sang Ha
Journal of Biosystems Engineering
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제38권3호
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pp.185-191
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2013
Purpose: The present study focused on the estimation of soluble solids content (SSC) of chestnut using reflectance and transmittance spectra in range of VIS/NIR. Methods: Four species intact/peeled chestnuts were used for acquisition of spectral data. Transmittance and reflectance spectra were used to develop the best PLS model to estimate SSC of chestnut. Results: The model developed with the transmitted energy spectra of peeled chestnuts rather than intact chestnuts and with range of NIR rather than VIS performed better. The best $R^2$ and RMSEP of cross validation were represented as 0.54 and $1.85^{\circ}Brix$. The results presented that the reflectance spectra of peeled chestnuts by species showed the best performance to predict SSC of chestnut. $R^2$ and RMSEP were 0.55 and $1.67^{\circ}Brix$. Conclusions: All developed models showed RMSEP around $1.44{\sim}2.54^{\circ}Brix$, which is considered not enough to estimate SSC accurately. It was noted that $R^2$ of cross validation that we found were not high. For all that, grading of the fruits in two or three classes of SSC during postharvest handling seems possible with an inexpensive spectrophotometer. Furthermore, the development of estimation of SSC by each chestnut species could be considered in that SSC distribution is clustering in different range by species.
Nam, Kyong-Hee;Kim, Do Young;Shin, Hee Jae;Pack, In-Soon;Park, Jung-Ho;Yoon, Won Kee;Kim, Ho Bang;Kim, Chang-Gi
농업과학연구
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제45권2호
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pp.248-257
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2018
Overexpression of AtCYP78A7, a gene encoding a cytochrome P450 protein, has been reported to improve tolerance to drought stress in genetically modified (GM) rice (Oryza sativa L.). The aim of this study was to evaluate the potential allergenicity and acute oral toxicity of the AtCYP78A7 protein expressed in GM rice. Bioinformatics analysis of the amino acid sequence of AtCYP78A7 did not identify any similarities with any known allergens or toxins. It showed that no known allergen had more than a 35% amino acid sequence homology with the AtCYP78A7 protein over an 80 amino acid window or more than 8 consecutive identical amino acids. The gene encoding the AtCYP78A7 protein was cloned in the pGEX-4T-1 vector and expressed in E. coli. Then, the AtCYP78A7 protein was purified and analyzed for acute oral toxicity. The AtCYP78A7 protein was fed at a dose of 2,000 mg/kg body weight in mice, and the changes in mortalities, clinical findings, and body weight were monitored for 14 days after the dosing. Necropsy was carried out on day 14. The protein did not cause any adverse effects when it was orally administered to mice at 2000 mg/kg body weight. These results indicate that the AtCYP78A7 protein expressed in GM rice would not be a potential allergen or toxin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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