An novel amylolytic yeast, Saccharomyces cerevisiae HA 27, isolated from nuruk, displayed resistance against high sugar (50% glucose) and alcohol (15%). Maximal production of amylolytic enzyme by S. cerevisiae HA 27 was achieved on 9 days of cultivation at the optimal temperature $20^{\circ}C$ and pH 6.0. The activity of amylolytic enzyme produced by S. cerevisiae HA 27 was stable, even at $70^{\circ}C$, and over a broad pH range (4.0-11.0). Also, the amylolytic enzyme of S. cerevisiae HA 27 showed optimal activity in pH 5.0 at $50^{\circ}C$. S. cerevisiae HA 27 exhibited 6.2%(v/v) alcohol fermentation ability using starch as a carbon source.
The action of crude amylolytic enzymes extracted from Wonki and Chunmi sweet potatoes, ${\alpha}-amylase$, and ${\beta}-amylase$ on the sweet potato starches from Wonki (dry type) and Chunmi (moist type) were studied. The activity of crude amylolytic enzyme extracted from Wonki was higher than that extracted from Chunmi. The content of reducing sugar released from the reaction between crude amylolytic enzyme and Chunmi starch preheated at $70^{\circ}C$ was higher, but that preheated at $95^{\circ}C$ was lower than that from Wonki starch preheated at the same temperature. The activites of ${\alpha}-amylase$ and ${\beta}-amylase$ on the Wonki starch were higher than those of the Chunmi starch at the same conditions. Iodine affinity of amylolytic enzyme-treated starch was decreased and enzyme treated starch granule shape was found with porous structure having inner layers. X-ray diffraction patterns of amylolytic enzyme-treated starches were the Ca type like the intact starches and relative crystallinity was decreased.
19 Samples of koji-starters using in brewing were collected from Korea and Japan, and then 31 strains of koji-molds were isolated from them. After Identification of the Isolate, rice koji was made with each strains, and its saccharogenic activity, dextrogenic activity, proteolytic activity, acid Producing ability, browning reaction and flavor were tested. Among 31 strains of isolates, 10 strains were Identified as Asp nwamori var. kawachii, 18 strains as Asp. oryzae, 3 strains as Asp. usamii mkt. shirousamii. The koji-starters made in Korea were composed of single species of koji-mold with same strain, but those made in Japan were composed of the mixture of different two species or the mixture of different 2 ∼4 strains in same species. Judging from amylolytic and proteolytic ability by species, Asp. awamori var. kawachii H1, I1 and 11, Asp. owsae J2, L2, M2, P3 and P4, and Asp. usamii writ. shirousamii S1 were better than the others. Mold strains isolated from Korean koji-starters were much lower in amylolytic or proteolytic activity than those from Japanese koji-starters. The typical characteristics for the 3 species of koji-molds were that Asp. awamori var. kawachii was strong in acid producing ability, but week in amylolytic and proteolytic ability, that Asp. owzae had strong amylolytic activity and good aroma, but produced little amount of acid, and that Asp. usamii mut. shirousamii had strong Proteolytic activity but some off-flavor.
The effect of nuruks and crude amylolytic enzyme on free amino acid and volatile components of brown rice vinegar prepared by static cultures was investigated. Five groups consisted of AV (100% nuruk without crude amylolytic enzyme), BV (75% nuruk; 25% crude amylolytic enzyme), CV (50% nuruk; 50% crude amylolytic enzyme), DV (25% nuruk; 75% crude amylolytic enzyme) and EV (100% crude amylolytic enzyme without nuruk). Free amino acid content in AV vinegar (132.06 mg%) was lower than the others (184.56-191.22 mg%). Acetic acid, 3-methyl butyl acetate, acetoin and isoamyl alcohol were major volatile components as analyzed using gas chromatography-mass spectrometry after headspace solid-phase microextraction. Acetic acid in AV and EV samples represented 67.56% and 55.53% of total GC peak area, respectively. E-nose provided different patterns in each case showing variation in sensory properties.
This study was carried out to isolate and characterize the mutant strains of Schwanniomyces castellii NRRL Y-2477. Mutants were prepared with the treatment of ethyl methane sulfonate. 2-deoxy-D-glucose resistant mutants were isolated and two mutants were selected based on their high production of amylolytic enzymes and their ability to ferment starch. The mutants selected had higher a-amylase and glucoamylase activities than the wild type strain from several other carbon sources. Especially, it was revealed that mutant strain M-9, when cultured in the presence of glucose as a sole carbon source, shows relatively high activities of a-amylase and glucoamylase compared to those of the wild type strain. In result, this mutant strain can be considered as a constitutive producer of amylolytic enzymes. To compare the ethanol production ability of wild type strain and of mutant strains selected, an alcohol fermentation was carried out using 100 g/l soluble starch. Mutant strain M-9 did not improve the direct alcohol fermentation of starch, despite its excellent amylolytic activities performance. On the other hand, mutant strain M-6 produced 37.9 g/l (4.8%, v/v) ethanol by utilizing about 82% of substrate.
Kwon, Yong Min;Choi, Hyun Seok;Lim, Ji Yeon;Jang, Hyeong Seok;Chung, Dawoon
Mycobiology
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v.48
no.3
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pp.195-203
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2020
Marine yeasts have tremendous potential in industrial applications but have received less attention than terrestrial yeasts and marine filamentous fungi. In this study, we have screened marine yeasts for amylolytic activity and identified an amylase-producing strain PH-Gra1 isolated from sea algae. PH-Gra1 formed as a coral-red colony on yeast-peptone-dextrose (YPD) agar; the maximum radial growth was observed at 22 ℃, pH 6.5 without addition of NaCl to the media. Based on the morphology and phylogenetic analyses derived from sequences of internal transcribed spacer (ITS) and a D1/D2 domain of large subunit of ribosomal DNA, PH-Gra1 was designated Sporidiobolus pararoseus. S. pararoseus is frequently isolated from marine environments and known to produce lipids, carotenoids, and several enzymes. However, its amylolytic activity, particularly the optimum conditions for enzyme activity and stability, has not been previously characterized in detail. The extracellular crude enzyme of PH-Gra1 displayed its maximum amylolytic activity at 55 ℃, pH 6.5, and 0%-3.0% (w/v) NaCl under the tested conditions, and the activity increased with time over the 180-min incubation period. In addition, the crude enzyme hydrolyzed potato starch more actively than corn and wheat starch, and was stable at temperatures ranging from 15 ℃ to 45 ℃ for 2 h. This report provides a basis for additional studies of marine yeasts that will facilitate industrial applications.
The intestinal microflora of humans is an extraordinarily complex mixture of microorganisms, the majority of which are anaerobic microorganisms. The distribution of amylolytic microorganisms in the human large intestinal tract was investigated in various individuals of differing ages using anaerobic culture techniques. A large percentage of the amylolytic microorganisms present belonged to the Genus Bifidobacteria. The number of Bifidobacteria increased significantly at two years of age. Adults and children above 2 years old carried about $0.8{\times}10^9-2.0{\times}10^{10}$ colony forming units (CFU/gram) of amylolytic Bifidobacteria. Among these amylolytic Bifidobacteria, Int-57 was chosen for further studies. Between 65% and 85% of the amylase produced was secreted and the remaining amylase was bound to the cell wall facing the outside. Amylase production could be induced by starch in a stable form. When cells were grown on maltose or glucose, amylase production was much lower than on starch and amylase activity disappeared after 24 hours growth on these media. Partially purified enzymes showed optimum activity at a temperature of $50^{\circ}C$ and at an optimum pH of 5.5, respectively. Heat treatment at $70^{\circ}C$ for 30 minutes almost completely inactivated amylase. The hydrolysis products of starch were mainly maltose and maltotriose. Soluble starch, amylose, amylopectin, and $\gamma$-cyclodextrin($\gamma$-CD) were easily hydrolyzed. The rate of hydrolysis of $\alpha$-CD and $\beta$-CD was slower than that of $\gamma$-CD. Carboxymethyl cellulose, $\beta$-1, 3-glucan and inulin were not hydrolyzed.
The hyperthermophilic archaebacterium Thermococcus profundus Isolated from a deep-sea hydrothermal vent system, produced several amylolytic enzymes such as extracellular amylase and pullulanase, intracellular a-1,4-91ucosidase in respone to the presence of complex carbohydrates In the growth medium. This strain showed high activities on 0.5% maltose than on complex carbohydrates One of the amylases was partially purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-Toyopearl chromatography. The amylase exhibited maximal activity at pH 5.5 and 80$^{\circ}C$, and was stable in the range of pH 5.5 to 9.5 and up to 80$^{\circ}C$ for 30 min. The enzyme activity was no dependence on Ca2+ and not inhibited by detergents. The amylase hydrolyzed soluble starch, amylose, amylopectin and glycogen to produce maltose and maltotriose with trace amounts of glucose, but not pullulan and ${\alpha}$-, ${\beta}$-, ${\gamma}$-cyclodextrin. Malto-oligosaccharides ranging from maltotetraose to maltoheptaose were hydrolyzed in an endo fashion.
An experiment with alfalfa (Medicago sativa L.) plants was designed to investigate the changes in non-structural carbohydrate (NSC) contents and the activities of amylolytic enzymes during a regrowth period following defoliation. Sampling from hydroponic grown-plants were carried out at intervals during 24 days of regrowth. Shoot regrowth was very slow during the first 10 days and root growth was depressed after defoliation. Defoliation induced a great decrease in both total sugar and starch contents in taproots during the first 10∼14 days. A major recovery of NSC occurred from day 15. Averaged over sampling dates, the activity of exo-amylase was about 400-fold higher than that of endo-amylase. Exo-amylase activity in defoliate plants slightly increased until day 6 (maximum level) and then decreased. Endo-amylase rapidly increased for the first 4 days after defoliation and slightly increased afterwards to a maximum on day 24. These results showed that increase in amylolytic enzyme activity in taproots coincided with the time of starch utilization during regrowth and that indicated it plays an important role in starch degradation.
The stabilizatio of amaylolytic enzyme such as $\beta$-amylase of barley, $\beta$-amylase of wheat, $\beta$-amylase of sweet potato, $\alpha$-amylase of Bacillus licheniformis, $\alpha$-amylase of Aspergillus sp. and $\alpha$-glucosidase of Aspergillus awamori was attained by modification with periodate-oxidized soluble starch. The pH stability of modified enzyme was increased at pH 9 for $\beta$-amylase of sweet potato, pH 3~5 and 8~11 for $\beta$-amylase of barley, pH 2~3 and 7~12 for $\beta$-amylase of wheat and pH 6 for $\alpha$-glucosidase of Aspergillus awamori. Thermal stability increased 17.6% for $\alpha$-amylase of Aspergillus sp. at 6$0^{\circ}C$ for 10min, 30% for $\alpha$-amylase of Bacillus licheniformis at 10$0^{\circ}C$ for 5min and 4.5% for $\alpha$-amylase of sweet potato at 6$0^{\circ}C$ for 10min compared with those of native enzymes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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