• 제목/요약/키워드: amberlite XAD

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Studies on Screening and Isolation of .$\alpha$-Amylase Inhibitors of Soil Microorganisms (I)

  • Kwak, Jin-Hwan;Choi, Eung-Chil;Kim, Byong-Kak
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제8권2호
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    • pp.67-75
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    • 1985
  • To find emylase inhibitors produced by microorganisms from soil, a strain which had a strong inhibitory activity against bacteria .alpha.-amylase was isolated from the soil smaple collected in Seoul. The morphological and physiological characteristics of this strain on several media and its utilization of carbon sources showed that it was one of Streptomyces specties according to the international Streptomyces Project method. The amylase inhibitor of this strain was purified by means of acetone precipitation, adsorption on Amberlite XAD-2, and column chromatography on Amberlite CG-50 and SP-Sephadex C-25. The inhibitor was stable at the pH range of 1-10 and at 100.deg.C for half an hour, and had inhibitory activities against other amylases such as salivary .alpha.-amylase, pancreatic .alpha.-amylase, fungal .alpha.-amylase and glucoamylase. The kinetic studies of the inhibitor showed that its inhibitory effect on starch hydrolysis by .alpha.-amylase was non-competitive.

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Actinomycetes GF 155-2에 의한 pepsin 저해물질의 생산 및 정제 (Production and Purification of Pepsin Inhibitor from Actinomycetes GF 155-2)

  • 박석규;성낙계;이상원
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제17권2호
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    • pp.121-125
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    • 1989
  • 토양으로부터 분리되고 세포외로 pepsin 저해물질을 생산하는 Actinomycetes GF 155-2의 플라스크 배양에 의한 pepsin 저해물질 최적배양조건은 2% glucose, 0.7% polypeptone, 초기 pH7.0, 배양 60시간, 배양온도 3$0^{\circ}C$였으며 무기염의 효과는 크게 영향이 없었다. 발효조 배양물 5ι를 유안염석하여 methanol로 추출한 후 활성탄에 흡착하고 Amber-lite IR-120, XAD-2 및 silicagel 60 column chromatography한 결과 약 15mg의 무색 침상물질을 수득하였다.

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Solid-Phase Extraction of L-Muscone from Aqueous Samples with Amberlite XAD-4 for Gas Chromatographic Assay

  • Paik, Man-Jeong;Kim, Kyoung-Rae
    • Archives of Pharmacal Research
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    • 제27권5호
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    • pp.539-543
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    • 2004
  • An efficient analytical method was devised for the accurate L-muscone assay in aqueous samples. It involves solid-phase extraction of L-muscone in adsorption mode using XAD-4 as the sorbent and dichloromethane modified with 10% (v/v) methanol as the eluting solvent. The gas chromatographic analysis of the eluate residue dissolved in toluene on a DB-5MS capillary column provided complete resolution of L-muscone from the co-extracted interferences. The overall method showed excellent linearity ($r^2{\geq}$ 0.9994) in the range of 0.1 to 2.0 $\mu\textrm{g}$/mL with good intra- and inter-day precisions (% RSD = 2.5~7.3) and with high extraction recovery rates ($\geq$ 98.1 %). When the present method was applied to a L-muscone herbal drink product, the within-batch RE (%) in the labeled concentration (1.5 $\mu\textrm{g}$/mL) for the three randomly chosen bottles were -2.4, -1.3 and -3.3 with high precision (% RSD $\leq$ 3.1). The present method is considered to be suitable for quality control evaluation on liquid drinks and other complex formulations fortified with L-muscone.

에탄올 생산 향상을 위한 발효저해물질 제거와 리그닌 유래 발효저해물질이 에탄올 발효에 미치는 영향 (Enhancement of Ethanol Production by The Removal of Fermentation Inhibitors, and Effect of Lignin-derived Inhibitors on Fermentation)

  • 엄민;신경진;이재원
    • Journal of the Korean Wood Science and Technology
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    • 제44권3호
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    • pp.389-397
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    • 2016
  • 본 연구에서는 옥살산 전처리 바이오매스의 액상가수분해산물에 포함된 발효저해물질을 전기투석과 XAD 수지 처리하여 제거한 후 에탄올을 생산하였다. 전기투석 과정에서 아세트산은 대부분 제거되었으며(95.6%), 비이온성 발효저해물질(Total phenolic compound: TPC, 5-hydroxymethyl furfural: HMF, furfural)은 XAD 수지 처리에 의해 효과적으로 제거되었다. 전기투석과 XAD 수지 처리된 액상가수분해산물로 발효를 수행한 결과 XAD 수지의 침지시간이 짧을수록 에탄올 생산이 향상되었다. 최대 에탄올 생산은 발효 72시간 후 $6.16g/{\ell}$로 전기투석 후 액상가수분해산물을 XAD-4 수지에서 5분 침지하였을 때 나타났다. 리그닌 유래 발효저해물질 중 syringaldehyde는 저농도(1 mM, 2 mM)에서 에탄올 생산을 향상시켰으며 5 mM에서는 발효에 부정적인 영향을 주었다. 리그닌 유래 발효저해물질의 시너지 효과를 확인하고자 합성배지로 발효를 수행하였으며, Syringaldehyde (1 mM)와 ferulic acid (1 mM) 합성배지를 이용하여 발효를 수행한 결과 syringaldehyde보다 ferulic acid의 영향으로 에탄올 생산이 감소했다.

Amberlite에 고정화된 Lipase 제조 및 효소적 Interesterification을 이용한 반응 특성 연구 (Immobilization of Lipases on Amberlite and Their Interesterification Reaction Characteristics)

  • 박소라;이기택
    • 한국식품과학회지
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    • 제46권3호
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    • pp.315-322
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    • 2014
  • 본 연구는 미생물로부터 유래된 5종(AH, AK, AY, PS와 R)의 lipase들을 Amberlite XAD 7에 흡착법으로 고정화 시킨 후 각 immobilized lipase들의 특성을 알아보았다. 고정화 전과 후의 단백질 함량 및 각 free lipase들과 immobilized lipase들을 이용한 interesterification 반응물의 지방산과 TAG 조성을 분석하였다. 또한, immobilized lipase에 있어 중요한 요인인 reusability를 확인하였다. Free lipase의 단백질 함량은 2.22-11.41%로 AH가 가장 높았던 반면, immobilized lipase에서는 AH, PS와 AK가 mg protein/g support이 높았다. 한편, 반응 특성을 알아보기 위해 카놀라유, PEE와 StEE를 기질로 하여 batch type interesterification을 진행하였을 때, free lipase의 경우 free lipase R을 제외한 다른 free lipase들은 반응시간이 1시간에서 72시간으로 증가함에 따라 총 포화지방산 함량이 증가하였으며 그 중 free lipase AH가 반응성이 가장 높았다. 또한, RP-HPLC를 통해 free lipase AK 반응물을 분석한 결과, 반응시간이 길어질수록 카놀라유(0시간)에서 볼 수 있었던 57.49 area%의 ${\bigcirc}{\bigcirc}{\bigcirc}$가 6.53 area%로 감소하였다. 이는 각 free lipase들이 PEE와 StEE를 효소적 반응에 이용했기 때문이라고 판단된다. 한편, immobilized lipase AY와 R의 경우 반응시간이 1시간에서 48시간으로 증가하여도 카놀라유(0시간)의 총 포화지방산 함량과 큰 차이가 없었으나 immobilized AK의 경우 48시간에서 38.3 area%의 포화지방산 함량으로 가장 높은 활성을 보였다. 또한, 이를 사용하여 continuous type으로 반응하였을 때 유속이 느릴수록 효소와 기질 사이의 접촉 시간이 길어져 반응물의 총 포화지방산 함량이 증가함을 알 수 있었다. Reusability는 immobilized AK, AH와 PS 모두에서 두 번째 반복 반응을 하였을 때, 첫 번째 반응보다 총 포화지방산이 120-196.5% 증가하였다. 그러나 bounding protein 함량이 가장 높았던 immobilized AK는 support에 흡착되었던 free lipase AK의 탈착이 일어나 2번째 반응 후부터 활성이 감소한 반면, immobilized AH와 PS는 활성이 비교적 유지되었다.

해양세균 Pseudomonas sp. CHCS-2에 의한 원유분해 및 생물유화제의 성분 분석 (Biodegradation of Crude oil by Marine Bacterium Pseudomonas sp. CHCS-2 and Composition of the Biosurfactant)

  • 김학주;김봉조;하순득;황선희;공재열
    • KSBB Journal
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    • 제14권2호
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    • pp.192-197
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    • 1999
  • 해양세균 Pseudomonas sp. CHCS-2는 배양과정 중에 포도당 첨가에 의해 생물유화제의생산이 증가되었으며, 196시간 배양시 원유에 포함되어 있는 paraffine계 탄화수소 중에서 $_nC_{12}~_nC_{22}$까지 범위의 carbonchain이 거의 대부분 분해됨을 알 수 있었다. chloroform : metahnol = 1 : 1(V/V)로 추출하여 얻은 8.5g/L의 crude 생물 유화제를, Amberlite XAD-7, Sepharose CL-4B, DEAE-sepharose CL-6B 수지를 사용하여 정제한 결과 최종적으로 0.21g/L의 정제된 생물유화제를 얻었다. 본 균주가 생산하는 생물유화제는 단백질과 octadecanoic acid가 결합된 분자량이 약 67kDa인 lipoprotein으로 확인되었으며, 정재된 생물유화제중 단백질성분만을 분리하여 N-말단 아미노산배열을 분석한 결과, Ser-Val-He-Asn-Thr-Asn-IIe-Thr-X-Met-Ile-Gly-Gin-Gln-의 배열을 가지는 것으로 확인되었다. 이는 기존에 보고된 lipoproten과 다른 형태의 것으로, 본 균주가 생산하는 생물유화제의 경우 구성성분, 분자량 등을 고려해 볼 때 새로운 형태의 lipoprotein 계열 생물유화제로 추정된다.

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Bacillus subtilis AH18의 고추역병 방제능과 $Siderophore_{AH18}$의 구조분석 (Structural Identification of $Siderophore_{AH18}$ from Bacillus subtilis AH18, a Biocontrol agent of Phytophthora Blight Disease in Red-pepper)

  • 우상민;김상달
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제36권4호
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    • pp.326-335
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    • 2008
  • Bacillus subtilis AH18균주는 auxin, siderophore 그리고 cellulase를 동시에 생산하는 PGPR 균주이자 생물방제균주로 항진균성 siderophore의 특성을 확인한 결과 catechol type의 siderophore로 확인하였다. $Siderophore_{AH18}$ 의 정제는 Amberlite XAD-2, sephadex LH-20 column chromatography 그리고 HPLC를 통해 정제 및 정제여부를 확인하였으며, GC-MS, $^1H$-NMR, 그리고 $^{13}C$-NMR을 통해 구조 및 분자량을 확인하였다. 그 결과 B. subtilis AH18이 생산하는 siderophore은 분자량 883의 bacillibactin임을 확인하였으며, 포자발아억제활성을 나타냄을 확인하였다. B. subtilis AH18은 P. capsici에 의한 고추역병을 효과적으로 방제하였으며(방제력 55%), 이는 bacillibactin에 의한 효과가 포함되리라 추측된다.

방선균 분리주 No. 1882-5로부터 Phorbol Ester에 의해 유도되는 K562 Cell의 소포형성을 억제하는 물질의 분리와 동정 (Purification and Chemical Identification of the Inhibitor on Bleb Formation of K562 Cell Induced by Phorbol Ester from Actinornycetes Isolate No. 1882-5)

  • 안종석;안순철;박문수;김보연;민태익;이현선;오원근
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제20권5호
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    • pp.565-573
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    • 1992
  • Phorbol ester에 의해 유도되는 K562 cell의 소포 형성을 저해하는 물질을 생산하는 방선균 분리주 No.1882-5를 토양으로부터 분리하였다. 분리주 No. 1882-5로부터 용매추출, Amberlite XAD-4, silica, Lobar low pressure LC를 거쳐 항진균 활성물질 MT-1882-I과 K562 cell의 소포형성을 억제하는 활성물질 MT 1882-II를 분리하였다. 이 물질들에 대한 이화학적 성질의 조사와 UV, $^1H-NMR$, $^13C-NMR$, mass spectrum의 분석에 의하여 MT 1882-II은 piericidin $A_{1}$($C_{25}H_{37}0_4N$, MW 415), MT 1882-II는 glucopiericidin A($C_{31}H_{47}0_9N$, MW 577)로 동정하였다.

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김으로부터 분리한 Angiotensin-I Converting Enzyme 저해제의 정제 및 특성 (Purification and Characterization of Angiotensin I-Converting Enzyme Inhibitor from Porphyra yezoensis)

  • 최수진;전우진;유광원;신동훈;홍범식;조홍연;양한철
    • 한국식품영양과학회지
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    • 제29권4호
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    • pp.719-725
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    • 2000
  • 본 연구는 70여종의 국내산 해조류중 가장 높은 ACE 저해 활성을 보였던 김(Porphyra yezoensis, 서천)의 산가수분해물로부터 ACE 활성 저해 펩타이 드를 분리하여 그 특성을 조사하였다. ACE 저해물질의 분획은 균일하게 파쇄한 김을 2.5 N HCl로 산 가수분해한 후 중화하여 한외여과로 분자크기 3 kDa 이하의 물질로 분리하였다. 분자크기 3 kDa이하의 물질에 대하여 column chromatography(Amberlite XAD 8, DEAE-Toyopearl, Sephadex LH-20)와 reverse phase HPLC(C18)를 순차적으로 수행하여 ACE 저해제인 PY3--II-b-h5물질을 분리하였다. PY30-II-b-h5는 분자크기는 약 580 dalton으로 glycine(24.5%), arginine(56.8%), proline(18.8%)의 아미노산 조성을 갖는 저분자 펩타이드였으며, ACE의 저해양상은 경쟁적 저해작용을 하였고, IC50 값은 10.6$\mu\textrm{g}$/mL 이었다.

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살구에서 배당체의 형태로 존재하는 휘발성 성분 (Glycosidically Bound Volatile Components in Apricot (Prunus armeniaca var. ansu Max.))

  • 김영회;김근수;박준영;김용태
    • 한국식품과학회지
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    • 제22권5호
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    • pp.549-554
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    • 1990
  • 비이온성 수지인 Amberlite XAD-2 흡착 및 메탄올 용출법에 의해 살구로부터 배당체분획을 얻은 다음 almond ${\beta}-glucosidase$ 및 산가수분해(pH3.0) 또는 pH 3.0에서 simultaneous distillation-extraction(SDE)에 의해 얻어진 가수분해물로부터 GC 및 GC-MS에 의해 40종의 휘발성 성분을 확인하였다. 3종의 가수분해물로부터 이미 배당체로서 살구에 존재하는 것으로 알려져 있는 linalool oxide, linalool, ${\alpha}-terpineol$, nerol, geraniol, benzyl alcohol 및 2-phenylethyl 이외에도 2,6-dimethyl-3,7-octadiene-2,6-diol, 3,7-dimethyl-1,5-octadiene-3,7-diol,(E)-및 (Z)-2,6-dimethyl-2,7-octadiene-1,6-diol, $3-4-dihydro-{\beta}-ionol$ $3-oxo-{\alpha}-ionol$, $3-hydroxy-7,8-dihydro{\beta}-ionol$, $3-oxo-7,8-dihydro-{\alpha}-ionol$, $3-hydroxy-{\beta}-ionone$, eugenol, 3-hydroxyethylphenyl acetate 및 2,3-dihydrobenzofuran이 살구에서 처음으로 확인되었다.

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