Soohyun Um;Hyeongju Jeong;Joon Soo An;Se Jin Jo;Young Ran Kim;Dong-Chan Oh;Kyuho Moon
Biomolecules & Therapeutics
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제31권5호
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pp.566-572
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2023
A chiral derivatization strategy with phenylglycine methyl ester (PGME) was employed to develop a straightforward method to determine the absolute configurations of N,N-dimethyl amino acids. The PGME derivatives were analyzed using liquid chromatography-mass spectrometry to identify the absolute configurations of various N,N-dimethyl amino acids based on their elution time and order. The established method was applied to assign the absolute configuration of the N,N-dimethyl phenylalanine in sanjoinine A (4), a cyclopeptide alkaloid isolated from Zizyphi Spinosi Semen widely used as herbal medicine for insomnia. Sanjoinine A displayed production of nitric oxide (NO) in LPS-activated RAW 264.7 cells.
Scopolamine and hyoscyamine are important anticholinergic compounds. To increase the productivity, we have selected various elicitors and developed culture system using a bubble column bioreactor (BCB). As the same manner of elicitation in flask cultures, the elicitors were introduced into BCB cultures and the productivity was investigated. Except the bacterial elicitor of Staphyllococcus aureus, the elicitors inhibited hyoscyamine production. In scopolamine production, the elicitors revealed different responses from the results obtained in flask cultures. The elicitors of KCl and Candida albicans less increased the production than flask cultures. However, methyl jasmonate and S. aureus showed stronger positive effects on tropane alkaloid production. In particular, S. aureus was the most effective elicitor on scopolamine production and the elicitor resulted in the highly increased production, approximately 10 times higher than the control culture.
In the previous report it was demonstrated that aqueous extracts of two Korean indigenous crude drugs, Radix Jingyu and Fructus ponciri, have an excellent tick repellent effect, and also the need for further analytical study of these crude drugs was suggested. In the experiments to be reported herein, attempts were made to find out the active ingredients from Radix Jingyu, since the aqueons extract of Radix Jingyu proved to be mone effective than that of Fructus ponciri. It will be shown that the active ingredient is indicative of Lycaconitine, a known alkaloid. An aqueons solution containing 1.5 Gms of Lycaconitine in tartrate when sprayed on a cow exerted tick repellent effect against Boophilus microplus which lasted approximately 25 days without any harmful influences on cattle. It will also be shown that the oil-fat components of Radix Jingyu act synergistically with Lycaconitine in accelerating and lengthening the effect, although the components alone have no effect under the conditions tested. It was of interest to note that the oil-fat components of Radix Jingyu showed definite repellent effect against the larvae of Boophilus microplus in laboratory experiments by the method newly devised. On the basis of these observations, it was concluded that Lycaconitine can be used as cattle tick repellent, and the evidence seems to warrant a large scale production of Lycaconitine for its widespread use. Further studies on the possible effect of the alkaloid on other genera or species of ticks and related vermins were also indicated.
Persicaside has been isolated as a new alkaloid natural compound from a methanol (EtOA)-soluble extract of Prunus persica seed. It was purified by a combination of chromatographic techniques and recrystallization. The structure of Persicaside was determined by extensive NMR experiments and mass ppectroscopic data. It inhibited nitric oxide (NO) and prostaglandin E2 (PGE2) production via suppression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase-2 (COX-2 expression in rat osteoblast sarcoma cells (ROS 17/2.8) in concentration-dependent manner whereas it spares the COX-1 enzyme activity.
최근 항암제로서 관심을 끌고있는 camptothecin올 생산하기 위한 희수(Camptotheca acuminata) 현탁세포 배양과 camp ptothecin의 생산을 촉진하는 연구를 수행하였다. 장기간 배양 으로 발생되는 이차대사산물 생산능력의 변이가 관찰되어 이 를 극복하고자 세포의 응집을 통한 camptothecin의 생산을 촉진하고자 하였다. 세포의 응집은 hybrid 배지와 sucrose 4 %일 때에 가장 많이 유도되었고, 이때 camptothecin의 생산량도 $18.04{\times}10^{-4} mg/L$로 가장 높은 생산성을 가졌다. 또한, 세포의 응집을 유도하기 위한 일환으로 교반속도를 변화시켜 이에 대한 효과를 알아보았는데, 100rpm에서 가장 많은 세포응집이 유도되었으며, camptothecin의 생산 역시 $19.4{\times}10^{-4} mg/L$로 가장 높은 결과를 나타내었다.
Biofilms are of vital significance in bioconversion and biotechnological processes. In this work, sugarcane molasses was used to enhance biofilms for the improvement of the production of fumigaclavine C (FC), a conidiation-associated ergot alkaloid with strong anti-inflammatory activities. Biofilm formation was more greatly induced by the addition of molasses than the addition of other reported biofilm inducers. With the optimal molasses concentration (400 g/l), the biofilm biomass was 6-fold higher than that with sucrose, and FC and conidia production was increased by 5.8- and 3.1-fold, respectively. Moreover, the global secondary metabolism regulatory gene laeA, FC biosynthetic gene fgaOx3, and asexual central regulatory genes brlA and wetA were upregulated in molasses-based biofilms, suggesting the upregulation of both asexual development and FC biosynthesis. This study provides novel insight into the stimulatory effects of molasses on biofilm formation and supports the widespread application of molasses as an inexpensive raw material and effective inducer for biofilm production.
This research was performed to investigate protective effect of Sophorae subprostratae Radix and each fractions against ischemic damage using PC12 cells. To observe the protective effect of Sophorae subprostratae Radix on ischemia damage, vibility and changes in activities of Superoxide dismutase (SOD), Glutathione Peroxidase (GPx), Catalase and Production of Malondialdehyde (MDA) were observed after treating PC12 cells with Sophorae subprostratae Radix during ischemic insult. Groups were divided into five groups: no treated (Normal), hypoxia chamber for 48hrs followed by 6h at normoxic chamber (H/R), Sop horae subprostratae Radix total phase treated group with H/R (Total), Sophorae subprostratae Radix water phase treated group with H/R (Water), Sophorae subprostratae Radix BuOH phase treated group with H/R (BuOH), Sophorae subprostratae Radix alkaloid phase treated group with H/R (Alkaloid). The results showed that (1) in hypoxiajreperfusion model using PC12 cell, the Sophorae subprostratae Radix has the protective effect against ischemia in the dose of 0.2 ㎍/㎖, 2 ㎍/㎖ and 20 ㎍/㎖, (2) Sophorae subprostratae Radix increased the activities of glutathione peroxidase and catalase. (3) the activity of Superoxide Diamutase(SOD) increased by ischemic damage, which might represent the self protection. This study suggests that Sophorae subprostratae Radix has neuroprotective effect against neuronal damage following hypoxiajreperfusion cell culture model using PC12 cell and dose dependency effects. In conclusion, Sophorae subprostratae Radix has protective effects against ischemic oxidative damage at the early stage of ischemia.
본 연구에서는 카카오 추출물의 알칼로이드계 성분의 함량을 관찰하고 항산화, 항균, 항염증 활성을 확인하였다. CAEt, CAMe추출물 함유 Gel을 제조하여 물리적 안정성을 관찰하였다. 카카오 추출물의 생리활성을 관찰하기 위해 DPPH, SOD 측정을 진행하였으며 세포독성 및 LPS로 유발시킨 일산화질소의 소거능에 대한 연구를 진행하였다. 또한 알칼로이드계 퓨린 구조를 가진 카카오 추출물을 첨가시킨 Gel을 제조하여 60일 동안 상온에서의 안정성을 평가하였다. 카카오 추출물의 항산화 활성 검증에서는 CAEt 추출물에서 $IC_{50}$ 값은 $43.14{\mu}g/m{\ell}$, CAMe 추출물의 $IC_{50}$ 값은 $35.42{\mu}g/m{\ell}$로 관찰되었다. SOD 측정에서도 CAEt 추출물에서 $IC_{50}$ 값은 $90.9{\mu}g/m{\ell}$, CAMe 추출물의 $IC_{50}$ 값은 $52.6{\mu}g/m{\ell}$로 관찰되었다. MeOH 조건에서 추출한 CAMe 추출물의 항산화능이 높은 것을 알 수 있었다. 추출물 3%가 함유된 gel (CAEt-Gel, CAMe-Gel)을 제조하였다. 항균활성 측정 결과 CAMe 추출물이 함유된 gel 제형이 더 높은 항균성을 나타내는 것을 확인하였다. MTT assay로 관찰한 세포독성은 80%이상의 세포 생존율을 보였으며, LPS로 활성화된 Raw 264.7 세포에서 NO 발생을 관찰한 결과 CAMe-Gel을 처리한 군에서 NO 생성량이 유의하게 억제되는 것을 확인할 수 있었다. 본 연구에서는 위와 같은 결과를 근거로 카카오 추출물의 알칼로이드계 성분을 인체내에 적용하기 위해 제조한 Gel은 화장품 및 의료용 소재로 다양한 활용이 가능할 것으로 사료된다.
Rauvolfia serpentina (L.) Benth. ex Kurz is a medicinal plant and an endangered tropical rainforest plant species. Since the field cultivation that aims to fulfill the industrial needs is never accomplished, tissue culture appears to be the most feasible way to improve the quality and quantity of R. serpentina. This experiment used two kinds of explants (roots and shoots) to induce optimal root formation in different combinations of auxin and photoperiod. Each explants exhibited different responses on given treatments. Differentiated root could be produced from explants cultured in IBA 20 mg/L with and without light. The highest number of roots, root length and root weight induced from shoot explants were effective on MS medium containing IBA 20 mg/L and incubated under dark condition, while highest total weight (callus and root) from root explants cultured on MS medium supplemented 10 mg/L IBA and 10 mg/L NAA and incubated under day length (11/13 hr). The root induced from shoot explants produced the highest major alkaloid content. The highest content of ajmaline (2.17 ppm fresh weight) and reserpine (1.30 ppm fresh weight) were observed in shoot explants cultured in MS medium containing combination of IBA 10 mg/L and NAA 10 mg/L and incubated under dark condition, yohimbine (1.47 ppm fresh weight) was in the shoot explants cultured in MS medium containing NAA 20 mg/L and incubated under day length, while serpentine was absent.
Objectives : Berberine, a main alkaloid component of Coptidis rhizoma, has an antimicrobial and anti-tumor activities and antiinflammatory effect. In the present study, we investigated effect of berberine on the production of inflammatory mediators such as nitric oxide(NO), prostaglandin E2(PGE2), TNF-${\alpha}$ and IL-1${\beta}$ in LPS-stimulated BV2 microglial cells, Methods : BV2 cells were pre-treated with berberine and then stimulated with LPS. The cytotoxicity of berberine was determined by MTT assay. The NO production was measured by Griess assay. The mRNA expression and protein levels of inducible nirtic oxide synthase(iNOS) were determined by RT-PCR and Western blot. The production of PGE2 and cytokines was measured by ELISA. Results : Berberine inhibited the production of NO, PGE2 and pro inflammatory cytokines, TNF-${\alpha}$ and IL-1${\beta}$ in a dose dependent manner in LPS-stimulated BV2 cells. In addition, berebrine greatly suppressed the mRNA expression and protein levels of iNOS and inflammatory cytokines induced by LPS stimulation. These results indicate that the post-transcriptional regulatory mechanism of iNOS and/or inflammatory cytokine gene expression by berberine is involved in its anti-inflammatory effects, respectively. Conclusion : The present study suggests that berberine can be useful as a potential anti-inflammatory agent for treatment of various neurodegenerative diseases such as Alsheimer's disease, Parkinson's disease and stroke.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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