Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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제22권4호
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pp.802-809
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2008
Gamijangsing-tang (GMJST) has been used for treatment of bone formation in traditional korean medicine. The purpose of this study is to examine effects of GMJST on bone metabolism. The effects on the osteoblasts were determined by measuring (1) cell proliferation, (2) alkaline phosphatase (ALP) activity, (3) osteoprotegerin (OPG) secretion. (4) The morphologic changes of cells were observed by light microscopy and electron microscopy. Mineralization of calcium was determined by quantitative alizarin red-S assay and mineralization of phosphate was observed by von kossa staining. The morphologic changes of mineralization on the cells were observed by transmission electron microscopy (TEM). The effects on the osteoclast were investigated by tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining. Following results were obtained: Celluar activity of osteoblastic cells (MG-63) was significantly increased in 10-5 of dilution of GMJST. ALP and OPG activity of osteoblastic cells were increased in GMJST than normal MG-63 cell. Mineralization of osteoblastic cells were increased in GMJST than normal MG-63 cell. The activity of osteoclast cells (RAW 264.7) was significantly decreased in GMJST than normal MG-63 cell. From the results, GMJST stimulated the proliferation and mineralization of bone-forming osteoblast and inhibited by bone- lysis osteoclast.
To investigate the effect of 'Saengkankunbi-Tang' on the liver tissue recovery in about 70% cutted rat liver, the observation on the photographing by the Gamma-camera and the electromicroscopic section against the rabbit liver induced by $CCl_4$, these studies were conducted. The results were summarized as follows; Observed on the liver tissue recovery, function regeneration and body weight increase in about 70% cutted rat liver, the recovery of liver tissue and body weight were increased with the passage of the time and also they were showed to the high increase rate in proportion to administration amount. The glucose content in the serum was found in increasing tide as compared with the control group. The alkaline phosphate activity in the serum showed the significant difference in the 10th day and 13th day as compared with the control group. The ammonia content in the blood showed the significant difference only in the 10th day. Observed on the photographing by the Gamma-camera against the rabbit liver induced by $CCl_4$, sample groups were shown to be significant recovery as compared with the control group. Observed on the electromicroscopic section, sample groups showed the control action of the nuclear destruction against the rabbit liver induced by $CCl_4$ and also they showed the control action of the expansion of glycogen and granular endothelial reticulum in cytoplasm. According to the above finding, it is presume that 'Saengkankunbi-Tang' can be applicable to the extensive treatment of liver disease.
Purpose: The object of this study is to develop a novel BMP-2 delivery system for continuous osteogenic differentiation and to induce osteogenesis of stem cells using a bi-phase alginate carrier in vitro. Methods: Alginate nanoparticle loaded BMP-2 was prepared by the reverse emulsification-diffusion technique. Physical properties and release profiles of alginate carriers were measured by Instron and ELISA kit, respectively. Cell viability and alkaline phosphate activity of hBMSCs differentiation was also evaluated by MTS and Metra BAP assays, respectively. Results: Optimal concentration for bi-phase alginate carrier was determined as 2 wt% by evaluating mechanical and biological properties, and differentiation of BMSCs for bone regeneration. The 2% bi-phase alginate carrier had the lowest initial and final release ratio. In addition, the 2% bi-phase alginate carrier had a little higher ALP activity than the homogeneous carrier. An improved controlled release profile was obtained by combining alginate hydrogel with lyophilized particles. Conclusion: Bi-phase alginate carrier has many advantages such as biocompatibility and controlled release capability. It is expected to be effective as a scaffold and carrier in bone tissue engineering.
Osteoporosis development is closely associated with oxidative stress and reactive oxygen species (ROS). Taurine has potential antioxidant effects, but its role in osteoblasts is not clearly understood. The aim of this study was to determine the protective effects and mechanisms of actions of taurine on hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced oxidative stress in osteoblast cells. UMR-106 cells were treated with taurine prior to $H_2O_2$ exposure. After treatment, cell viability, apoptosis, intracellular ROS production, malondialdehyde content, and alkaline phosphate (ALP) activity were measured. We also investigated the protein levels of ${\beta}-catenin$, ERK, CHOP and NF-E2-related factor 2 (Nrf2) along with the mRNA levels of Nrf2 downstream antioxidants. The results showed that pretreatment of taurine could reverse the inhibition of cell viability and suppress the induced apoptosis in a dose-dependent manner: taurine significantly reduced $H_2O_2$-induced oxidative damage and expression of CHOP, while it induced protein expression of Nrf2 and ${\beta}-catenin$ and activated ERK phosphorylation. DKK1, a Wnt/${\beta}-catenin$ signaling inhibitor, significantly suppressed the taurine-induced Nrf2 signaling pathway and increased CHOP. Activation of ERK signaling mediated by taurine in the presence of $H_2O_2$ was significantly inhibited by DKK1. These data demonstrated that taurine protects osteoblast cells against oxidative damage via Wnt/${\beta}-catenin$-mediated activation of the ERK signaling pathway.
A gene encoding a putative alanine racemase in B. pseudomycoides was cloned and expressed in Escherichia coli BL21(DE3) using a pET-21 vector harbouring 6xHistidine tag. Affinity purification of the recombinant alanine racemase with a nickel resin resulted in one band by SDS-PAGE analysis. The purified enzyme showed a molecular weight of 46 kDa. The enzyme was the most active toward L-alanine and secondly D-alanine, implying that the enzyme is an alanine racemase. D-cysteine significantly inhibited the enzyme activity and also L-cysteine to a lesser extent. The enzyme was considerably activated by addition of pyridoxal-5'-phosphate (PLP), showing that 73% increase in activity was observed at 0.3 mM, compared to control. The enzyme was the most active at pH 9.0 and more stable at alkaline pHs than acidic pHs.
Kim, Haebom;Kim, Changhee;Kim, Do Un;Chung, Hee Chul;Hwang, Jae-Kwan
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권3호
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pp.357-366
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2018
Periodontitis, an infective disease caused by oral pathogens and the intrinsic aging process, results in the destruction of periodontal tissues and the loss of alveolar bone. This study investigated whether Boesenbergia pandurata extract (BPE) standardized with panduratin A exerted anti-periodontitis effects, using an aging model representative of naturally occurring periodontitis. In aged rats, the oral administration of BPE ($200mg{\cdot}kg^{-1}{\cdot}day^{-1}$) for 8 weeks significantly reduced the mRNA and protein expression of $interleukin-1{\beta}$, nuclear factor-kappa B, matrix metalloproteinase (MMP)-2, and MMP-8 in gingival tissues (p < 0.01). In alveolar bone, histological analysis with staining and micro-computed tomography revealed the attenuation of alveolar bone resorption in the BPE-treated aged group, which led to a significant reduction in the mRNA and protein expression of nuclear factor of activated T-cells c1 (NFATc1), c-Fos, tartrate-resistant acid phosphatase, and cathepsin K (p < 0.01). BPE not only increased the expression of osteoblast differentiation markers, such as alkaline phosphate, and collagen type I (COL1A1), but also increased the ratio of osteoprotegerin to RANKL. Collectively, the results strongly suggested that BPE is a natural resource for the prevention or treatment of periodontal diseases.
Lim, Jung Eun;Moon, Deok Hyun;Kim, Kwon-Rae;Yang, Jae E;Lee, Sang Soo;Ok, Yong Sik
Journal of Applied Biological Chemistry
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제58권2호
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pp.157-174
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2015
Stabilization of metals in contaminated soils using various waste materials has been reported. Alkaline materials (limes, shells, industrial byproducts, etc.), phosphorous (P) containing materials (animal bones, phosphate rock, etc.), organic materials (composts, manures, biochars, etc.) and others (zerovalent iron, zeolite, etc.) were widely evaluated to ensure its effectiveness/applicability of stabilization of metals in soils. Stabilization mechanisms of those materials above were partially revealed, but the related literatures are still lacked and not sufficient for approaching to long-term stability/applicability in the field. The aims of this review are to summarize current knowledge of metal stabilization in contaminated soils using various waste materials and to suggest a direction for future field research.
Species competition among the toxic dinoflagellates Alexandrium tamarense and Gymnodinium catenatum and the diatom Skeletonema costatum was simulated using a mathematical model. Prior to the model simulation competition experiments using the three species were conducted to obtain data for validation by the simulation model. S. costatum dominated at a density of ${\sim}10^{4}\;cells/mL$ compared to the other species in the medium with dissolved inorganic phosphorus (DIP). The growth of S. costatum was also stimulated by the addition of dissolved organic phosphorus (DOP), such as uridine-5-monophosphate (UMP) or glycerophosphate (Glycero-P), although this species is unable to take up DOP. This implies that the growth of S. costatum may be supported by DIP, which is hydrolyzed by alkaline phosphatase produced from A. tamarense and G. catenatum. The species competition model was run assuming the environmental conditions of northern Hiroshima Bay, Japan, during spring and summer. G. catenatum increased in cell density and neared the level of S. costatum at the end of the calculation. In the sensitivity analyses by means of doubling and halving parameters, depleted DIP had little effect on the cell density of G. catenatum. However the growth of A. tamarense and S. costatum was significantly affected by changes in the parameter values. These results indicate that if DIP depletion is ongoing, species that have a large phosphate pool in their cells, such as G. catenatum, will predominate in the community.
Ethanolic leaf extract of Bauhinia variegata has been tested for its possible antioxidant potentials against sodium arsenite induced toxicity in mice. Mice were randomized into two groups of five and fifty mice. Group I consisting of 5 mice without any treatment with food and water ad libitum which served as normal control. Group II mice were fed with sodium arsenite in drinking water at 100 ppm concentration for two monthsthen they were segregated into five groups which were treated differently. Group II a mice received only arsenic as sodium arsenite with drinking water, Group II b were fed chronically 1 : 20 alcohol to distilled water (vehicle), Group II c, d, e mice were orally fed 50 mg/kg, 150 mg/kg and 250 mg/kg of B. variegata leaf extract of once daily for 15 and 30 days respectively along with arsenic. Several toxicity marker enzymes such as gamma glutamyl transferase, lactate dehydrogenase, aspartate and alanine aminotransferase, acid and alkaline phosphatase, catalase and superoxide dismutase along with haematological variables such as glucose 6-phosphate dehydrogenase, creatinine, bilirubin, haemoglobin and sugar in different groups of treated and control mice were studied. Results obtained from the in vivo experiment revealed that administration of sodium arsenite caused a significant increase in some enzymes while decrease in some. A similar trend was also observed with haematological variables. In contrast B. variegata treatment at 150 mg/kg favourably modulated these alterations and maintained the antioxidant status than other two doses i.e. 50 mg/kg and 250 mg/kg thereby making it a good candidate to be used as supportive palliating measures in arsenic induced toxicity.
A gene encoding a putative alanine racemase in Xanthomonas. oryzae pv. oryzae was cloned, expressed and characterized. Expression of the cloned gene was performed in Escherichia coli BL21(DE3)pLys using a pET-21(a) vector harbouring $6{\times}histidine$ tag. Purification of the recombinant alanine racemase by affinity chromatography resulted in major one band by sodium dodecyl sulfate polyacryl amide gel electrophoresis analysis, showing about 45 kDa of molecular weight. The alanine racemase gene, cloned in this experiment, appears to be constitutively expressed in X. oryzae, as analyzed by reverse transcriptase polymerase chain reaction. The enzyme was the most active toward L-alanine and secondly D-alanine, showing a racemic reaction, thus the enzyme is considered as an alanine racemase. The enzyme was considerably activated by addition of pyridoxal-5-phosphate (PLP), showing that 75% increase in activity was observed at 0.3 mM, compared with control. D-Cysteine as well as L-cysteine significantly inhibited the enzyme activity. The inhibitions by cysteines were more prominent in the absence of PLP, showing 9 and 5% of control activity at 2 mM of addition, respectively. The enzyme was the most active at pH 8.0 and more stable at alkaline pHs than acidic pH condition.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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