Wood chips of oak(Quercus mongolica) and larch(Larix leptolepis) were exploded with the optimum condition. Main components of exploded wood were separated with hot hot water and methanol. The hemicelluloses were purified from hot water extracts and alditol complexs were prepared from purified hemicellulose. And also, cellulose nitrate was prepared from extractive residue and characterized. The results can be summarized as follows. 1. Amounts of carbohydrate(72~79%) in the crude hemicellulose of larch wood was more than those of oak wood(55~66%). 2. The crude hemicelluloses were mainly composed of oligosaccharides in oak wood but those in larch wood contained about 50% monosaccharides. 3. Decolorization of hemicellulose was successful with activated charcoal and ion-exchange resin treatment. The alditol yields were 56.3~82.9%. 4. The degree of substitution(D.S.) of cellulose nitrate was 1.95~2.87 and it showed a good acetone solubility.
The products of reactions catalyzed by Methanococcus. jannaschii (Mj) aldolase using various substrates were identified by gas chromatography (GC). Although Mj aldolase is considered a fuculose-1-phosphate aldolase based on homology searching after gene sequencing, it has not been proven to be a fuculose-1-phosphate aldolase based on its reaction products. Mj aldolase was found to catalyze reactions between glycoaldehyde or D, L-glyceraldehyde and DHAP (dihydroxyacetone phosphate). Before performing GC the ketoses produced were converted into peracetylated alditol derivatives by sequential reactions, i.e., dephosphorylation, $NaBH_4$ reduction, and acetylation. By comparing the GC data of final products with those of standard alditol samples, it was found that the enzymatic reactions with glycoaldehyde, D-glyceraldehyde, and D, L-glyceraldehyde produced D-ribulose-1-phosphate, D-psicose-1-phosphate, and a mixture of D-psicose and L-tagatose-1-phosphate, respectively. These results provide direct evidence that Mj aldolase is a fuculose-1-phosphate aldolase.
This study was performed to study utilization of separated carbohydrates as well as separation, following analysis of the major components and separation of the carbohydrates in waste liquors of SP, KP, ASAM and AS. The result can be summerized as follows; Inorganic contents in waste liquors increase in this order AS
천연고분자인 키틴으로부터 저분자 키토산을 얻은 후 이를 아질산을 이용한 분해반응에 의해 세포증식효과 및 상처치유효과 등의 생리적인 효과가 있는 키토산 올리고당을 합성하였다 이를 위해 아질산을 이용하여 deamination한 후, sodium borohydride로 환원시켜 reducing-end residue들을 alditol unit로 치환하였으며 MBTH시약을 사용하여 반응이 진행하였음을 확인하였다. 얻어진 키토산 올리고 당의 분자량 분포를 HPLC로 확인한 결과 중합도가 2∼6 인 올리고당이 얻어졌음 을 알 수 있었다. 상대습도 43%와 81%에서 측정한 흡습력 실험결과, 글리세린 에 대해 각각 63%, 57%의 흡습력을 보였으며, 상대습도 43%와 실리카겔 분위기 하의 보습력 측정결과, 각각 98%, 91%의 수분잔존률을 나타내었다 키토산 올리고당은 0,000032∼0.01% 농도 범위에서 세포증식효과를 보였으며, 2%와 20%로 처리한 경우 상처치유효과를 나타내었다.
약산성 다당 GL-4IIb2'에 대해 연속적 부분 산가수 분해 과정을 거쳐, 2종의 oligo당 획분 PA-2' 및 PA-1-III를 분리하고 그들의 구조분석을 행하였다. PA-2'는 주요 구성당으로 Rha 와 특이당 Kdo를 동일한 비율로 함유하고 있었으며, permethylated oligosaccharide-alditol로 전환시켜, GC-MS로 분석한 결과, m/z 189$(bA_1)$및 m/z 308 $(aJ_2)$에서 6-deoxyhexose와 Kdo에 기인하는 fragment ion이 관찰되었다. 이 peak는 m/z 162에서 특징적인 ion을 나타낸 반면 m/z 177 ion이 관찰되지 않음으로써 Kdo의 C4위치가 아닌 C5위치가 치환되어 있음을 알 수 있었다. 한 methyl화 분석 결과, PA-2'은 환원말단 Rhap와 5-substituted Kdo가 높은 비율로 검출되었으며 환원 형태의 PA-2'를 대상으로 $^1M-NMR$ 분석을 하였을 때 ${\delta}$ 5.09 ppm에서 ${\alpha}-L-Rha$의 anomeric proton에 기인한 단일 signal이 관찰되었다. 이상의 결과로 부터 PA-2'는 주로 ${\alpha}-L-Rhap-(1{\rightarrow}5)-Kdo$로 구성되었다는 사실을 알 수 있었다 한편. PA-1-III는 소량의 Ara 믹 Dha와, 다량의 Rha 및 Kdo가 주요 구성당으로 나타났으며, PA-1-III 획분의 permethylated oligosaccharide-alditol 유도체는 GC상에서 3개의 peak (1P, 2P 및 3P)로 분리되었다. 이들의 MS 분석 결과, 높은 비율로 검출된 1P는 $Rhap-(1{\rightarrow}5)-Kdo$의 구조로 나타났으며 반면 낮은 비율의 2P및 3P는 $Araf-(1{\rightarrow}5)-Dha$의 동일구조를 갖는 것으로 확인되었는데 이는 Dha의 carbonyl 환원과정 중 생성된 epimer로 판단되었다.
Kim, Yeong-Shik;Park, Kyung-Shin;Park, Ho-Koon;Kim, Sung-Whan
Archives of Pharmacal Research
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제17권5호
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pp.337-342
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1994
Carbohydrate analysis is important in studying structure and activity of complex polysaccharides. New analytical method was applied to get an information on the composition of polysaccharides showing antitumor activity. Monosaccharides were labeled with 7-amino-1, 3-naph-thalenedisulfonic acid (7-AGA) by reductive amination and separated by HPLC. Five kinds of polysaccharides from Basidiomycetes were hydrolyzed and analyzed in combination with electrophresis and HPLC. At the same time, alditol acetate derivatives were prepared and analyzed by gas chromatography. Two different techniques using different derivatization methods showed very similar results. The monosaccharides from Coriolus versicolor and Cordyceps militaris were glucose and galactose. Phellinus linteus composed of glucose, glactose, mannose, arabinose and fucose. The HPLC method with fluorescence detector was very sensitive compared to other methods.
β-Cyclodextrin, amylose, and cellulose were partially methylated and acetylated in order to examine the relative reactivities of 2-, 3-, and 6-OH groups to alkylation and acylation. The partially methylated samples of the polysaccharides were treated with excess of ethyl iodide and sodium hydroxide in dimethyl sulfoxide to convert all of the free hydroxyl groups to ethyl ether groups. The partially O-ethylated and O-methylated polysaccharides were reductively cleaved with triethylsilane in the presence of trimethylsilyl methanesulfonate and borontrifluoride etherate (5 : 1 by mole) and the resulting 4-OH group was acetylated and benzoylated to form mixtures of eight 4-O-acyl-1,5-anhydroalditols. The relative ratio of the alditol esters were analyzed by gas chromatography to determine the degree of substitution at each position. A similar sequence of reactions was carried out with partially acetylated polysaccharides. The results indicated that the order of relative reactivities for methylation are 2-OH > 6-OH > 3-OH and for acylation are 6-OH > 2-OH > 3-OH regardless of the anomeric configuration.
D-xylose의 통성 발효성 효모, Candida sp. BT001로부터 D-xylose를 xylitol로의 전환을 촉매하는 효소, xylose reductase(alditol: $MADP^+$ 1-oxidoreductase, EC 1.1.1.21)를 salt fractionation, ion exchange, gel filtration과 affinity chromatography를 거쳐 정제하여 그 성질을 조사하였다. 정제된 xylose reductase는 보효소 NADPH 및 NADH에 모두 특이성을 나타내었으며, 또한 각각의 보효소에 대해 활성을 지니는 효소는 따로 분리되지 않았다. Specific activity는 NADPH에 대해 11.78 U/mg, MADH에 대해 6.01 U/mg이었으며, NADH/NADPH의 활성비는 0.51이었다. 정제된 xylose reductase의 분자량은 SDS-PAGE상에서 31,000, gel filtration상에서 61,000으로 2개의 subunit로 구성된 효소로 추정하였다. 정제된 xylose reductase의 D-xylose와 NADPH 및 NADH에 대한 Km값은 각각 $94.2{\times}10^{-3}M,\;0.011{\times}10^{-3}M$ 및 $0.032{\times}10^{-3}M$ 이었다. Aldose들에 대한 xylose reductase의 활성은 L-arabinose, D-xylose순으로 높았다. 최적 효소 반응의 pH 및 반응 온도는 각각 6.2와 $45^{\circ}C$이었으며, 이 효소는 $30^{\circ}C$에서 20분간 안정하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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