The objective of this study was to establish the optimum alcohol fermenting conditions for the processing of kiwi wine and vinegar products. Six yeast strains were examined for their alcohol production from kiwi at $30^{\circ}C$ for 72 hr with continuous shaking at 100 rpm. Under these conditions, Saccharomyces kluyveri DJ97 produced the highest alcohol content of 10.2%. As the fermentation time extended to 96 hr, the alcohol content reached a maximum of 12.75%. The optimum alcohol fermenting conditions for kiwi fruit were accomplished when kiwi was added to an equal amount of water, inoculated with S. kluyveri DJ97 and fermented at $30^{\circ}C$ for 96 hr with continuous shaking. The content of soluble solids decreased as the alcohol concentration increased, whereas little change was observed in the pH and titratable acidity during the low temperature aging process. Other alcoholic compounds, such as methanol, isopropanol, n-propanol, isobutanol, and isoamylalcohol, tended to increase as fermentation progressed.
Two strains of yeast (RA-74-2 and RA-912) showing superior fermenting ability at a high temperature were isolated from soils and wastewaters by an enrichment culture method. Based on the morphological and physiological charateristics, the two strains were identified as Saccharomyces cerevisiae and Kluyveromyces marxianus, respectively. RA-74-2 was able to grow upto $43^{\circ}C$ and sustain similar fermenting ability in the temperatures range from 30 to $40^{\circ}C$. In addition, the sugar- and ethanol-tolerance of RA-74-2 were 30% (w/v) glucose and 10% (v/v) ethanol, which appeared to be higher than those of nine other industrial yeast strains currently being used in the alcohol factories. The thermotolerant ethanol fermenting yeast RA-912 showed identical growth in the temperatures range from 35 to $45^{\circ}C$ and was resistant to various heavy metals. The quality and quantity of byproducts of the isolated yeast strains in fermentation broth after fermentation at $40^{\circ}C$ and $45^{\circ}C$ were similiar with those obtained at $30^{\circ}C$. These results show that RA-74-2 can be adopted for the ethanol fermentation process where the expenses for cooling system is significant, and suggest that RA-912 may be applied in either SSF(simultaneous saccharification and fermentation) or Flash-fermentation process and RA-912 may be used as a gene donor for the development of thermotolerant ethanol-fermenting yeasts.
The activity of glucoamylase and pullulanase, properties of glucoamylase and ethanol productivities of fusants were studied. Glucoamylase and pullulanase activity of fusants were higher than parents. The optimal pH and temperature of glucoamylase of fusants were very similar to the those produced by S. diastaticus. In alcohol fermentation. fermenting ability and fermentation rate of fusants were higher and faster than either of its parental strain. The maximum of alcohol yield in 15% of liquefied potato starch was 7.8% (v/v)
The fusants which contain starch utilizing ability and alcohol fermenting ability were developed by protoplast fusion of Saccharomyces cerevisiae KOY-1 and Saccharomyces diastaticus KCTC 1804. Sacharomyces cerevisiae KH-12 was obtained by haploid induction from Saccharomyces cerevisiae KOY-1. The auxotropic mutants of yeast were obtained by using an ethylmethane sulfonate (EMS). The frequency of protoplast formation in Saccharomyces cerevisiae KOY-1 $(Met^-)$ and Saccharomyces diastaticus KCTC 1804 $(Trp^-)$ were 90.5% and 97.7%, respectively. The frequency of fusant formation was $1.79{\times}10^{-4 }$ for the regenerated protoplast and the 1,000 fusants were obtained. Fusant FA 776 was selected as a potential yeast which contain an alcohol fermenting ability in the starch medium. The genetic stability was 4.64% for 10 passages of generation. Fusant FA 776 produced 13mg/ml of alcohol in 24% starch medium and showed 1.86-fold higher alcohol fermenting ability than Saccharomyces diastaticus KCTC 1804.
To improve a new yeast strain capable of converting xylan to ethanol directly, we tried protoplast fusion between xylose fermenting yeast (Candida sp. X-6-41) and xylan assimilating yeast (Crypto-coccus sp. XB-33), finally selected the most promising two fusants (XFU-1 and XFU-2). As the optimum conditions for protoplast formation, the yeast cells were cultured to exponential phase in YPD and YPX containing 0.6M KCI, respectively, and then treated with zymolyase (0.25mg/$m\ell$), cellulase(4mg/$m\ell$) and 100mM 2-mercaptoethanol at pH 8 and 3$0^{\circ}C$. The protoplasts of parental auxotrophs were fused in the presence of 20mM CaCl$_2$and 40% polyethylene glycol(M.W.4000). The physiological and morphological characteristics of the fusants, such as assimilation of carbon sources, cell size, growth rate, xylanase activity and xylan fermentation ability were investigated. Xylanase activity of fusants that cultured in chemically minimal medium was higher than that of fusants that cultured in completed medium, because xylanase producing activity of xylose fermenting yeast(X-6-41) was inhibited by isoleucine.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.17
no.8
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pp.637-645
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2016
This study was conducted to investigate the characteristics of fermentation and quality of Cheongju prepared by mashing using rice Nuruk inoculated with Aspergillus oryzae. Mashes were prepared by fermentation for 30-50 days using different amounts of fermenting agent, brewing water, milling ratios and fermenting temperatures. Adding fermenting agent at 15% resulted in slow fermentation, but a final alcohol content of 17% (v/v), similar to other samples tested. Addition of higher amounts of Nuruk resulted in increased amounts of citric acid, tartaric acid and malic acid, but low levels of succinic acid. Incomplete fermentation occurred when the ratio of brewing water was low, but the alcohol content (17%) of all samples was similar. When the amount of brewing water was high, the organic acid was levels were high. The speed of saccharification and fermentation was low when fermentation was conducted at $10^{\circ}C$, but the final alcohol content was the highest at this temperature. However, the content of n-propanol, isobutanol, isoamyl alcohol and organic acid was low at low temperature. At this time, the content of citric acid and malic acid was low, but the content of succinic acid was high. A higher milling degree resulted in a lower content of alcohol, organic acid and higher alcohols, with 10% milling resulting in a significantly higher content than the other samples.
S. diastaticus hydrolysised $\alpha$-1.4 linkage of the starch and was known fermenting yeast strain, but poorly hydrolized $\alpha$-1.6 linkage of the starch. To improve the starch fermentation ability of yeast, we tried that protoplast fusion between S. diastaticus and C. tropicalis and finally two starins of fusant (FPDC42, FPDC43) were obtained. C. tropicalis well hydrolysis both $\alpha$-1.4 and $\alpha$-1.6 linkanges in the starch. The protoplast of parental auxotrophic cells were fused in the presence of 10mM CaCl$_2$ and 35% of polyethylene glycol (M. W. 4,000). The fusion frequency was 10$^{-5}$ to 10$^{-6}$. Properties of the fusants(genetic stability, assimilation of carbon sources, random spore formation, copper resistance, NaCl tolerance, DNA content, cell size and growth rate) were investigated.
Ethanol productivity of a xylose fermenting yeast (Candida sp. X-6-4l) isolated from soil was investigated in laboratory scale using Erlenmeyer flask and mini-jar tormentor. The optimal conditions of xylose fermentation in flask experiment were pH 4, asparagine as nitrogen source, xylose 20g/$\ell$, and in these condition, ethanol yield was about 80% to theoretical yield. Using mini-jar fermentor containing 5% total sugar with 2.5% xylose and 2.5% glucose, we obtained 2.3%(v/ v) ethanol and the corresponding efficiency was 72.3% of total sugar. In this case, the consumming speed of sugar under aerobic condition was faster than that of anaerobic condition, and glucose was used previously to xylose. The optimum concentration of xylose for ethanol fermentation in mini-jar fer-mentor scale was 5%, and the efficiency was 69% of total sugar(Alc.2.2% v/v).
Yeast with excellent ferment ability was isolated and selected from wild grape to manufacture wild grape wine. Wild grape wine by SMR-3 isolated from wild grape was better than other strains in quality, such as high alcohol content and low acidity, residual sugar, organic acid and fusel oil content. Fermentation condition was optimized to manufacture wild grape wine with response surface methodology using isolated SMR-3 as an alcohol fermentation strain. As a result of culture conditions, 10.61% of alcohol content was expected under the conditions of $21.91^{\circ}C$ fermenting temperature, $21.48^{\circ}brix$ of initial sugar content, and 14.65 day of fermentation time. Residual sugar content showed the lowest value at $24.48^{\circ}C$ fermentation temperature, $12.78^{\circ}brix$ of initial sugar content, and 9.02 day fermentation time. The highest level of sensory evaluation was found at $20.23^{\circ}C$ fermentation temperature, $25.30^{\circ}brix$ of initial sugar content, and 5.94 day fermentation time. Ethyl alcohol was the main alcohol component in wild grape wine and fusel oil in wild grape wine was hardly detected; thus, the quality of wild grape wine was considered excellent. The optimal fermentation conditions of wild grape wine was superimposed by deriving a regression equation for alcohol content, fusel oil, ethyl alcohol content, and overall palatability for each variable of wild grape wine. Hence, the optimal fermentation conditions are estimated to be: fermentation temperature $24{\sim}28^{\circ}C$, initial sugar content $20{\sim}24^{\circ}brix$, and fermenting time $12{\sim}14$ days.
Whey is by-product from natural cheese manufacturing process. For alcoholic fermentation, the initial lactose content and pH were adjusted to 4.5% and 4.2, respectively. Two strains of yeasts (Kluyveromyces marxianus, Saccharomyces cerevisiae) and seven strains of lactic acid bacteria (Lactobacillus brevis, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus lactis, Leuconostoc cremoris, Lactococcus lactis and Streptococcus thermophilus) were examined for their alcohol production and sensory acceptability. Ethanol content in the whey fermented by lactose-fermenting K. marxianus was 2.8% at 4th day of incubation and that fermented by nonlactose fermenting S. cerevisiae was 0.2%. In case of mixed fermentation with yeasts and tactic acid bacteria (LAB being inoculated at 0 hr), the maximum ethanol production was obtained in the sample inoculated at 16 hr by s. cerevisiae, and in the sample inoculated at 24 hr by K. marxianus. The optimum temperature was $37^{\circ}C$ for alcohol production under static condition. The production of $CO_2$ gas was higher in the whey fermented by K. marxianus (1.88%) than by S. cerevisiae (0.04%). The titratable acidity of the whey gradually increased with fermentation time and its content was 0.39% at 4th day of fermentation by K. marxianus and 0.52% by S. cerevisiae. Among seven strain of latic acid bacteria tested, Lactococcus lactis exerted synergistic effect for acid production with K. marxianus. Therefore, overall results suggestd that the combination of Lactococcus lactis and K. marxianus was best choice in fermenting cheese whey for edible purpose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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