Kim, Seong Ryul;Park, Jong Woo;Kim, Seong-Wan;Kim, Su Bae;Jo, You-Young;Kim, Kee Young;Choi, Kwang-Ho;Ji, Sang Deok;Kim, Jong gil;Kweon, HaeYong
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.37
no.2
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pp.95-99
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2018
In insect defense system, antimicrobial peptides (AMPs) are one of important biological molecules to survive in a variety of environments. Insect can synthesize AMPs to protect against invading pathogens in humoral immune response. Taking more advantage of biological antimicrobial molecules, we report antibacterial activity of two cecropin type peptides, cecropin and moricin, isolated from the silkworm against four salmonella species. In this work, we purified antimicrobial candidate peptides (AMCP) from the extracts of immune challenged silkworm larval hemolymph by two-step chromatographic purification procedure, cation exchange and gel permeation chromatography. The molecular weights of purified peptides were estimated to be about 4 ~ 5 kDa by Tricin SDS-PAGE analysis, and identified as silkworm cecropin and moricin by NCBI BLAST homology search with their N-terminal amino acid sequences. As antibacterial activity assay, the purified peptides showed stronger antibacterial activity against Salmonella pathogens with an MIC value of $1{\sim}4{\mu}g/mL$. Therefore two cecropin type peptides purified from the silkworm will be valuable potential materials for development of new natural antibiotics.
Thirty seven species of Fusarium were evaluated for their ability of producing extracellular enzymes using chromogenic medium containing substrates such as starch, cellobiose, CM-cellulose, xylan, and pectin. Among the tested species Fusarium mesoamericanum, F. graminearum, F. asiaticum, and F. acuminatum showed high ${\beta}$-glucosidase acitivity. Xylanase activity was strongly detected in F. proliferatum and F. oxysporum. Strong pectinase activity was also found in F. oxysporum and F. proliferatum. Amylase activity was apparent in F. oxysporum. No clear activity in cellulase was found from all the Fusarium species tested.
An exo-β-D-glucosaminidase (AorCsxA) from Aspergillus oryzae FL402 was heterologously expressed and purified. The deduced amino acid sequence indicated that AorCsxA belonged to glycoside hydrolase family 2. AorCsxA digested colloid chitosan into glucosamine but not into chitosan oligosaccharides, demonstrating exo-β-D-glucosaminidase (CsxA) activity. AorCsxA exhibited optimal activity at pH 5.5 and 50℃; however, the enzyme expressed in Pichia pastoris (PpAorCsxA) showed much stronger thermostability at 50℃ than that expressed in Escherichia coli (EcAorCsxA), which may be related to glycosylation. AorCsxA activity was inhibited by EDTA and most of the tested metal ions. A single amino acid mutation (F769W) in AorCsxA significantly enhanced the specific activity and hydrolysis velocity as revealed by comparison of Vmax and kcat values with those of the wild-type enzyme. The three-dimensional structure suggested the tightened pocket at the active site of F769W enabled efficient substrate binding. The AorCsxA gene was heterologously expressed in P. pastoris, and one transformant was found to produce 222 U/ml activity during the high-cell-density fermentation. This AorCsxA-overexpressing P. pastoris strain is feasible for large-scale production of AorCsxA.
Kim, Seong-Ryul;Lee, Eun-Mi;Yoon, Hyung-Joo;Choi, Yong-Soo;Yun, Eun-Young;Hwang, Jae-Sam;Jin, Byung-Rae;Lee, In-Hee;Kim, Ik-Soo
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.14
no.2
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pp.147-150
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2007
Abaecin is a largest member of the proline-rich anti-microbial peptide family found only in the hymenopterans. A cDNA of abaecin was previously isolated and cloned from Bombus ignitus: the mature peptide of Bombus ignitus abaecin was composed of 39 amino acid residues. In the present study, we determined the antibacterial effect of B. ignitus abaecin synthesized at several lengths against several bacteria by radial diffusion assay. The 37-mer peptide (Ab37) inhibited the growth of Gram-negative bacteria Escherichia coli ML-35, Pseudomonas aeruginosa and Salmonela typhimurium, but showed limited inhibitory activity toward Gram-positive bacteria, except for Micrococcus luteus. The truncated 26-mer peptide (Ab26), which was synthesized after truncating some amino acid residues at both N-terminus and C-terminus from the Ab37 peptide, still showed equivalent antibacterial activity to the Ab37. On the other hand, several further truncated peptides exhibited lower activity then did Ab37 peptide.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.34
no.2
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pp.38-44
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2017
Mulberry leaves containing 1-deoxynojirimycin (DNJ) have been recognized as a potentially important source for prevent or treat hyperglycemia. However, DNJ content of natural mulberry leaf are as low as 0.1%. Thus, the most effective method for increasing ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity with the DNJ high-production is needed. In this study, we investigated the influence of ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity according to different pH values (6-9) and inoculation amounts (0.1-0.5%) when Bacillus subtilis cultured on mulberry leaf powder media. We confirmed that ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity was difference according to culture conditions of different pH values, inoculation amounts, and fermentation times. The results of mulberry leaf fermentation according to pH values and inoculation amounts were shown that the optimal conditions for ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity were defined as pH 7 and 9, inoculation amount 0.4%, and incubation until 2 to 4 days. These results can be provided a basic data for the optimal culture conditions increasing ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity from mulberry leaf fermentation.
Jo, Woo-Sik;Bae, Soon-Hwa;Choi, Seung-Yong;Park, So-Deuk;Yoo, Young-Bok;Park, Seung-Chun
Mycobiology
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v.38
no.1
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pp.74-77
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2010
To obtain basic information on the detection of cellulolytic activity in Auricularia auricula-judae, the influences of dye reagent, pH, and temperature were assessed. Chromogenic dye (congo red, phenol red, remazol brilliant blue, and trypan blue) was individually incorporated into a medium containing either carboxymethyl-cellulose, Avicel, or D-cellobiose as a polysaccharide carbon substrate. The other assessments utilized pHs ranging from 4.5 to 8.0 and temperatures from $15\sim35^{\circ}C$. Overall, when A. auricula-judae species were transferred onto media contained Congo red and adjusted pH 7.0 and then incubated at $25^{\circ}C$ for 5 days, the clear zone indicative of cellulolytic activity was more pronounced.
Park, J.H.;Han, E.J.;Hong, S.J.;Ahn, N.H.;Kim, Y.K.;Jee, H.J.
Korean Journal of Organic Agriculture
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v.19
no.spc
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pp.287-290
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2011
Environment friendly agricultural material products (EFAMs) in current market were evaluated for their insecticidal or acaricidal activities. EFAMs were evaluated against Tetranychus urticae, Plutella xylostella, Myzus persicae and Nilaparvata lugens in spray method. Several EFAMs indicated high control value in spray method. Hatchability of T. urticae was relatively high after EFAM treatment. some materials show high insecticidal activities against P. xylostella larvae but not against eggs. Few mete rials showed more than 80% insecticidal activities against M. persicae and N. lugen. The control value of more than half the materials for pest control was lower than 60%. EFAMs containing S. flavescens, neem oil and Rape showed higher control value.
Lee, Joon Ha;Kim, In-Woo;Kim, Mi-Ae;Yun, Eun-Young;Nam, Sung-Hee;Ahn, Mi-Young;Lee, Young Bo;Hwang, Jae Sam
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.31
no.1
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pp.14-19
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2015
In a previous report, we identified several candidate antimicrobial peptides through de novo RNA sequencing of the centipede Scolopendra subspinipes mutilans. Here, we identify and characterize one of these peptides, Scolopendrasin I. We identified the centipede antimicrobial peptide Cecropin from the centipede transcriptome using an SVM algorithm, and subsequently analyzed the amino acid sequence for predicted secondary structure using a GOR algorithm. We identified an alpha helical region of Cecropin and named it Scolopendrasin I. We then assessed antimicrobial and hemolytic activity of Scolopendrasin I. Scolopendrasin I showed antimicrobial activity against various microbes, including antibiotic-resistant Gram-negative bacteria, in a radial diffusion assay. Scolopendrasin I had potent antibacterial activity against acne-associated microbes in a colony count assay and showed no hemolytic activity in a hemolysis assay. In addition, we confirmed that Scolopendrasin I bound to the surface of bacteria via a specific interaction with lipoteichoic acid and lipopolysaccharide, two components of bacterial cell membranes. In conclusion, the results presented here provide evidence that this is an efficient strategy for antimicrobial peptide candidate identification and that Scolopendrasin I has potential for successful antibiotic development.
We examined the effects of biological activity Phellinus linteus mycelium culture with cassiae semen extract. Firstly, the optimal temperature, initial pH and culture period for mycelial growth in a liquid culture of P. linteus were determined, and they were $30^{\circ}C$, pH 5.0 and 8 days respectively. The five herbal materials were examined against several health functional efficacies, and, as a result, Cassiae semen was chosen, with its superior inhibitory effects in ${\beta}$-glucuronidase inhibitory activity, electron donating activity, ACE inhibitory, and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities(95.3%, 80.9%, 96.1 and 24.2%, respectively). P. linteus fruit body was investigated on ${\beta}$-glucuronidase inhibitory activity, electron donating activity, ACE inhibitory, and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activities, and they were 54.7%, 81.9%, 30.0% and 20.1%, respectively. Accordingly, C. semen was used in the following experiment, to give an additive functional effect on the P. linteus. As the amount of C. semen in the cultural media increased, mycelial weight and ${\beta}$-glucan contents also increased, but final pH was not influenced. In addition, the ${\beta}$-glucuronidase inhibitory activity, electron donating activity, and ${\alpha}$-glucosidase inhibitory activity increased. P. linteus mycelium culture showed higher activities in the other three tests above, except for electron donating activity, when C. semen was added to the medium before cultivation.
In this study, to confirm the physiological activity of the grasshopper (Oxya chinensis sinuosa) antioxidant activity, antimicrobial activity, thermal stability of the antimicrobial substance, pH stability, total polyphenol content of the adult grasshopper was measured. Antibacterial activity in accordance with the extraction solvent showed a strong antibacterial activity in a mixed solvent of ethanol for the E. coli strain. Antimicrobial activity in $40^{\circ}C$ hot air drying and a freezedried condition was the highest and there was no difference in the gender. Antibacterial substance was stable to heat and pH. Antioxidant activity of the grasshopper exhibited a high activity in the 50% and 70% ethanol extract. Total polyphenol content was the 12 ~17 mg / 100 g and there was not great difference according to the drying conditions and gender.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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