국내(國內)의 변질미(變質米)에서 분리된 A. flavus var. columnaris가 저장곡류(貯藏穀類)에 오염(汚染)되었을 때 aflatoxin 생성(生成)에 의한 위험가능성(危險可能性)을 추구(追究)하기 위하여 일련의 실험이 수행되었다. 그 결과 쌀 저장중 aflatoxin의 생성에는 80%이상의 상대습도(相對濕度)가 요구되었고 일단 축적된 aflatoxin은 다른 미생물의 번식에 의하여 분해되어 50% 수준을 유지하였으며 다른 미생물이 공존하지 않는 경우는 aflatoxin의 대량축적이 일어났다. 곡류(穀類)에서의 aflatoxin생성량은 대두(大豆), 땅콩, 옥수수, 밀, 보리, 조, 쌀, 밀쌀, 녹두, 수수의 순서로 증가하였으며 곡립(穀粒)의 크기와 유지(油脂)의 함량에 영향되는 경향을 보여 주었다.
The levels of aflatoxin (AFT) and ochratoxin (OCT) were assessed at different seasons in raw materials, different feed manufacture processing stages, and animal feeds in feed mills in Korea implementing the hazard analysis and critical control point (HACCP) system. Two hundred samples were collected in all four seasons from five feed mills implementing the HACCP system and examined for AFT and OCT contents. The AFT and OCT levels were analysed by using HPLC method to provide information on raw material and product stage. The AFT content of raw ingredients in the spring season was highest in corn gluten (3.84 ppb) and lowest in corn (1.82 ppb) The AFT content of corn was highest in the winter season (2.17 ppb). The content of OCT in wheat was highest in the winter season. The amounts of AFT and OCT at processing stages were higher than in the raw materials or feed. In particular, AFT content was higher in the transfer stage (3.88 ppb) than in the mixing (2.86 ppb) or filling stages (3.45 ppb) in the summer season. The means of AFT and OCT level in laying hen feed was 3.41 ppb and 1.14 ppb for broiler feed, respectively. The means of AFT and OCT level in and broiler feeds was 3.44 ppb and 1.17 ppb for broiler feed, respectively.
A non-instrumental immunochromatographic (ICG) strip-test and direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay (DC-ELISA) for aflatoxin B1 (AFB1) determination were developed and optimized. The detection limits of ICG strip-test and DC-ELISA were 0.5 and 0.004 ng/mL, respectively, and these methods possessed a cross-reaction to aflatoxins. The results of spiked samples by both methods were coincided with the amount spiked AFB1 and the comparative analyses of 172 real samples by 2 immunoassays and high performance liquid chromatography (HPLC) showed a good agreement. Especially, the ICG strip-test is easier to perform and quicker, but less sensitivity than DC-ELISA. Both methods could analyze a high sample throughput with short time, but the sample throughput of ICG strip-test was better. Therefore, the ICG strip-test can be used as a simple, easy, non-instrumental, and fast screening technique for AFB1 determination.
Mannan, Mohd Nazir;Kazmi, Munawwar Husain;Zakir, Mohammad;Naikodi, Mohammed Abdul Rasheed;Zahid, Uzma;Siddiqui, Javed Inam
셀메드
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제10권2호
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pp.16.1-16.8
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2020
Standardization of drug deals with confirmation of drug identity and determination of drug quality and purity. Unani herbal formulations are used in traditional medicine for the treatment of various diseases. Cancer is a disease which causes abnormal, uncontrolled growth of body tissue or cells, which tend to proliferate in an uncontrolled way. Spread of cancer from site of origin to other organs of the body is called metastasis. It is a hyper proliferative disorder involving, transformation, dysregulation of apoptosis, invasion and angiogenesis. The present study aimed to standardize a classical Unani formulation (CUF) described as anticancer properties. The CUF has been used for anti-cancerous activity (Dāfi'-i-saraṭān) in human population by Unani physicians for centuries. The standardization parameters carried out for classical Unani formulation are pharmacognostical studies, physicochemical parameters, high-performance thin layer chromatography (HPTLC), microbial load, aflatoxins, and heavy metals revealing specific identities and to evaluate Pharmacopoeial standards. Experiment and the data obtained established the Pharmacopoeial standards for this formulation for identification and quality control purpose. The CUF has been successfully standardized and standard operating procedures (SOPs) for its preparation has been laid down which may serve as a standard reference in future. The standardization data of this formulation may be used as a standard guideline for preparation of the formulation in future.
Aflatoxin은 세계 여러 곳에서 식품에 오염되어 발견되며 증가하는 인간의 간암발생과 빈번히 역학적으로 관련하여 보고되는 발암물질이다. 이러한 aflatoxin의 발암성 규명에 대한 연구의 일환으로 20 mg calf thynmus DNA와 8 mg 표준 aflatoxin $B_1$을 반응시켜 화학적으로 aflatoxin $B_1$을 반응시켜 화학적으로 aflatoxin $B_1-DNA$ adduct를 합성하였다. 합성된 aflatoxin $B_1-DNA$ adduct는 산가수분해와 열처리에 의해 거대한 DNA 분자를 절단하였고, immunoaffinity column을 통과시켜 aflatoxin $B_1-DNA$ adduct만 선택적으로 정제한 후 HPLC법으로 정량하였다. 그 결과 반응생성물의 대부분은 aflatoxin $B_1-guanine$ adduct였으며, 그 함량은 aflatoxin $B_1$으로 5.2 mg이었다.
Lee, Kyu Ri;Yang, Sun Min;Cho, Sung Min;Kim, Myunghee;Hong, Sung-Yong;Chung, Soo Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권1호
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pp.57-66
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2017
Aflatoxins are classified as Group 1 (carcinogenic to humans) by the International Agency for Research on Cancer. In this study, a total of 134 fungal strains were isolated from 65 meju samples, and two fungal isolates were selected as potential aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$)-biodetoxification fungi. These fungi were identified as Aspergillus oryzae MAO103 and A. oryzae MAO104 by sequencing the beta-tubulin gene. The two A. oryzae strains were able to degrade more than 90% of $AFB_1$ (initial concentration: $40{\mu}g/l$) in a culture broth in 14 days. The mutagenic effects of $AFB_1$ treated with A. oryzae MAO103 and MAO104 significantly decreased to 5.7% and 6.4%, respectively, in the frame-shift mutation of Ames tests using Salmonella typhimurium TA98. The base-substituting mutagenicity of $AFB_1$ was also decreased by the two fungi. Moreover, $AFB_1$ production by Aspergillus flavus was significantly decreased by the two A. oryzae strains on soybean-based agar plates. Our data suggest that the two $AFB_1$-detoxifying A. oryzae strains have potential application to control $AFB_1$ in foods and feeds.
Aspergillus oryzae is generally recognized as safe, but it is closely related to A. flavus in morphology and genetic characteristics. In this study, we tested the aflatoxigenicity and genetic analysis of nine commercial A. oryzae strains that were used in Korean soybean fermented products. Cultural and HPLC analyses showed that none of the commercial strains produced detectable amount of aflatoxins. According to the molecular analysis of 17 genes in the aflatoxin (AF) biosynthetic pathway, the commercial strains could be classified into three groups. The group I strains contained all the 17 AF biosynthetic genes tested in this study; the group II strains deleted nine AF biosynthetic genes and possessed eight genes, including aflG, aflI, aflK, aflL, aflM, aflO, aflP, and aflQ; the group III strains only had six AF biosynthetic genes, including aflG, aflI, aflK, aflO, aflP, and aflQ. With the reverse transcription polymerase chain reaction, the group I A. oryzae strains showed no expression of aflG, aflQ and/or aflM genes, which resulted in the lack of AF-producing ability. Group II and group III strains could not produce AF owing to the deletion of more than half of the AF biosynthetic genes. In addition, the sequence data of polyketide synthase A (pksA) of group I strains of A. oryzae showed that there were three point mutations (two silent mutations and one missense mutation) compared with aflatoxigenic A. flavus used as the positive control in this study.
Lee, Jin Hee;Jo, Eun Hye;Hong, Eun Jin;Kim, Kyung Min;Lee, Inhyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제24권10호
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pp.1397-1404
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2014
A few starters have been developed and used for doenjang fermentation but often without safety evaluation. Filamentous fungi were isolated from industrial doenjang koji, and their potential for mycotoxin production was evaluated. Two fungi were isolated; one was more dominantly present (90%). Both greenish (SNU-G) and whitish (SNU-W) fungi showed 97% and 95% internal transcribed spacer sequence identities to Aspergillus oryzae/flavus, respectively. However, the SmaI digestion pattern of their genomic DNA suggested that both belong to A. oryzae. Moreover, both fungi had morphological characteristics similar to that of A. oryzae. SNU-G and SNU-W did not form sclerotia, which is a typical characteristic of A. oryzae. Therefore, both fungi were identified to be A. oryzae. In aflatoxin gene cluster analysis, both fungi had norB-cypA genes similar to that of A. oryzae. Consistent with this, aflatoxins were not detected in SNU-G and SNU-W using ammonia vapor, TLC, and HPLC analyses. Both fungi seemed to have a whole cyclopiazonic acid (CPA) gene cluster based on PCR of the maoA, dmaT, and pks-nrps genes, which are key genes for CPA biosynthesis. However, CPA was not detected in TLC and HPLC analyses. Therefore, both fungi seem to be safe to use as doenjang koji starters and may be suitable fungal candidates for further development of starters for traditional doenjang fermentation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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