Combinations of plant growth regulators, darkness treatments, and the order of expanding leaves for explants were evaluated for optimizing in vitro shoot regeneration rate of 'Whangkeumbae' pear. In a MS medium, supplemented with $8.88{\mu}M$ 6-benzylaminopurine (BA) and $0.49{\mu}M$ indole-3-butyric acid (IBA), green foci were observed on the surface of the callus 8 days after culture initiation. Some adventitious buds were later induced from those green foci, resulting in the appearance of normal shoots. In a medium containing $22.20{\mu}M\;BA$, the surface of the callus became compact and greenish, and many adventitious buds were formed over the entire area of the callus surface. When comparing BA concentration via histological observation, the section which had been treated with $22.20{\mu}M\;BA$ exhibited closer cell aggregation than those with $8.88{\mu}M\;BA$. The darkness treatment enhanced the formation of adventitious shoots for up to 3 weeks. The youngest two expanding leaves, proximal to the shoot apex, were proved to be the most regenerative, and yielded the highest shoot number per regenerating leaf. A fourth strength MS medium, which was supplemented with $0.54{\mu}M\;NAA$, yielded good quality plantlets, with regard to root number and root length.
This experiment was conducted to study the effect of $CO_2$(0, 2, 500, 5, 000, 10, 000ppm) enrichment by enabling ventilation on micropropagation of multi-shoot and on the saponin contents in vitro in Korean ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer). Embryo was cultured in Murashige and Skoog medium added 3mg/ l of Indolbutyric acid, Benzyladenin and Gibberellic acid $(GA_3)$, respectively. $CO_2$, enrichment had little effects on the number of adventitious buds and shoots originated from adventitious buds. The ratio of differentiated shoots to adventitious buds were about 50% in $CO_2$, enrichment treatment. The shoots originated from adventitious bud showed more rapid growth and had larger leaf area than the shoots originated from the leaf primordia did. The number of shoot primordia was the highest in 2, 500ppm of $CO_2$ enrichment treatment. On the contrary, 10,000ppm of $CO_2$, enrichment made smaller the number of shoot primordia and ratio of shoots to shoot primordia. The range of shoots differentiated was from shoot primordia were 15. 4 to 23. 9. The rate of dry weight of cultured shoots showed lowest (7. 5%) in control and highest (8. 59%) in 2, 500ppm of $CO_2$, enrichment. Rate of in vitro flower in control was 7.6% and that in 2500ppm of $CO_2$ was about twice (15.7-16.3%) as much as in control. Flower number per a embryo cultured was about 1.2-1.3. In the multi-shoots with callus enriched by 2, 500ppm of $CO_2$, the contents of crude saponin and ginsenosides in multi-shoots alone were higher than in multi-shoots with callus. The characteristics of ginsenosides in multi-shoots were especially the higher content of ginsenoside Rd, Re, and $Rg_1$.
This study describes culture conditions for a plant regeneration system via a combined pathway of somatic embryogenesis and organogenesis in root explant cultures of the commercial rose cultivar 'Charming'. Root explants formed white calluses at a frequency of 30% after 6 weeks of culture on Schenk and Hildebrandt (SH) medium supplemented with $11mg\;1^{-1}$ 2,4-dichlorophenoxyacetic acid. After 6 weeks of transfer to SH medium without growth regulators, initial white calluses gave rise to globular somatic embryos at a frequency of 2.8%, which were subsequently dedifferentiated to embryonic tissues. Somatic embryos or embryonic tissues initially derived from root explants did not undergo development beyond cotyledonary stage. To produce adventitious shoots, embryonic tissues were sliced and cultured on SH medium with $0.5mg\;1^{-1}$ 6-benzyladenine. After 4 weeks of culture, 28% of embryonic tissue explants formed adventitious shoots. Regenerated shoots were rooted on half strength SH medium with $0.1mg\;1^{-1}$${\alpha}-naphthalaneacetic$ acid and subsequently grown to maturity. Root-derived embryonic tissues were proliferated by subculture, while retaining the capacity for shoot production for a few years.
An efficient protocol for in vitro organogenesis was achieved from callus-derived immature and mature leaf explants of Momordica charantia, a very important vegetable and medicinal plant. Calluses were induced from immature leaf explants excised from in vitro (15-day-old seedlings) mature leaf explants of vivo plants (45 days old). The explants were grown on Murashige and Skoog (MS) medium with Gamborg (B5) vitamins containing 30 g $1^{-1}$ sucrose, 2.2 g $1^{-1}$ Gelrite, and 7.7 lM naphthalene acetic acid (NAA) with 2.2 ${\mu}M$ thidiazuron (TDZ). Regeneration of adventitious shoots from callus (30-40 shoots per explant) was achieved on MS medium containing 5.5 ${\mu}M$ TDZ, 2.2 ${\mu}M$ NAA, and 3.3 ${\mu}M$ silver nitrate ($AgNO_3$). The shoots (1.0 cm length) were excised from callus and elongated in MS medium fortified with 3.5 ${\mu}M$ gibberellic acid ($GA_3$). The elongated shoots were rooted in MS medium supplemented with 4.0 ${\mu}M$ indole 3-butyric acid (IBA). Rooted plants were acclimatized in the greenhouse and subsequently established in soil with a survival rate of 90%. This protocol yielded an average of 40 plants per leaf explant with a culture period of 98 days.
Kim ,Kwang-Soo;Sung, Nak-Sool;Kim, Myung-Won;Pyo, Byung-Sik;Hwang, Baik
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.24
no.6
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pp.357-360
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1997
Multiple shoot formation was obtained from excised axillary buds of Achyranthes japonica NAKAI cultured on MS media containing various growth regulators such as auxin and cytokinin. The highest average number of shoots was obtained in 1 mg/L NAA and 2 mg/L BA after 6 weeks (25.8 adventitious shoots per node). Although the regeneration rate was less than the former condition, optimal combination for the production of more shoots with a suitable size was 0.5 mg/L NAA and 1 mg/L BA (19.7 adventitious shoots per node). Roots were induced from regenerated shoots after 3 weeks culture, transferred to 1/2 MS medium supplemented with 0.1 mg/L IBA. Micropropagated plants were successfully transferred to soil.
Proceedings of the Plant Resources Society of Korea Conference
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2021.04a
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pp.37-37
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2021
Calystegia soldanella L. is a perennial herbaceous halophyte belonging to the convolvulaceae family, which mainly grows in coastal sand dunes in Korea. Shoots and rhizomes are edible, and roots called 'Hyoseon Chogeun' are known to have medicinal effects such as antipyretic, sterilization, and diuretic. In addition, physiological activities of antioxidant, anti-inflammatory, antiviral, antifungal and PTP-1B (protein tyrosine phosphate-1B) inhibition have been reported. In this study, in vitro induction cell lines of C. soldanella L. collected from the coastal sand dunes in Jeju island was redifferentiated into adventitious roots that can be used as medicinal resources. Also the biomass of mass-proliferated adventitious roots using a bioreactor were evaluated. Plants of C. soldanella L. were collected from the crevice of the seashore in the coastal area of Taeheung 2-ri, Namwon-eup, Seogwipo-si. Then, it was separated into leaves, stems, rhizomes, and roots, and surface sterilized with 70% ethyl alcohol and 2% NaOCl (sodium hypochlorite). After washing with sterilized water, each organ section was cultured in Hormone-free MS medium (Murashige & Skoog Medium). As a result, the induction response rates were evaluated at 85% and 55%, respectively, in terms of callus formation and shoot generation in the rhizome segment. In the case of the adventitious roots morphological characteristics induced by single-use treatment of auxin-based plant growth regulators IBA and NAA from redifferentiated shoots were compared. Most efficient adventitious root culture method as a rooting rate, number, length, and biomass proliferation in the bioreactor system was confirmed when treated by culturing in MS salts, Sucrose 30 g·L-1, and IBA 1mg·L-1 for 4 weeks. In this study, the medium composition and culture period were confirmed using a bioreactor system to mass-proliferate adventitious roots derived from C. soldanella L. in Jeju island. Also this adventitious root line developed a new medicinal material could increase value of the bio-industry ingredient through quantitative and qualitative screening of phyto-bioactive compounds.
Lee, Soo-Young;Park, Pil-Son;Chung, Hwa-Jee;In, Dong-Soo;Park, Dong-Woog;Jang R. Liu
Journal of Plant Biotechnology
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v.5
no.1
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pp.59-61
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2003
Petiole explants from 20 cultivars of Catharanthus roseus were cultured on various shoot-inducing media to assess their competence for adventitious shoot formation. After eight weeks of culture on Murashige and Skoog' s medium supplemented with 4.4 $\mu\textrm{m}$6-benzyladenine and 0.5 $\mu\textrm{m}$$\alpha$-naphthaleneacetic acid, petiole explants from 'Cooler Icy Pink' exhibited the greatest frequency of adventitious shoot formation at 40%, which was followed by 'Little Bright Eye'. By comparing with a previous study on assessment of competence for adventitious shoot formation in hypocotyl explant cultures of various cultures, it is indicated that the relative degree of their competence among cultivars varies to the organ used for the source of explant. Excised adventitious shoots were readily rooted on half-strength MS basal medium. Regenerated plantlets were successfully transplanted to potting soil and grown to maturity in a greenhouse.
Mature nodal segments of 2-year-old greenhouse stock plant were cultured on Murashige and Skoog basal medium supplemented with the different kinds and various concentrations of cytokinins to produce multiple shoots in in vitro condition. The most adventitious shoots were produced from excised ends of nodal segments. The highest average number $(24.6\;{\pm}\;4.6)$ of shoots was produced with the combination of BA 1.0mg/L and TDZ 0.1mg/L in MS medium. In addition, several shoots were formed from lenticels of bark cambium with the same treatment. These concentrations promoted high shooting capability upto $94.6\%$ and NAA was the best cytokinin among five different PGR sources.
In order to micropropagate uniform plantlets of Philodendron cannifolium in vitro, the shoot tips were cultured on MS media supplemented with $0.5{\sim}10.0$ mg/L BA or $0.05{\sim}0.1$ mg/L thidiazuron(TDZ). The adventitious multi-bud clusters from basal part of shoots were formed on MS media containing $2.0{\sim}5.0$ mg/L BA or $0.05{\sim}0.1$ mg/L TDZ. But the shoots grown on MS media with TDZ showed necrosis by the lack of chlorophyll. The adventitious multi-bus clusters were cut into $5{\sim}7$ mm sections and cultured on MS media containing BA and TDZ for shoot proliferation. Shoots were proliferated vigorously on MS medium supplemented with $1.0{\sim}3.0$ mg/L BA with up to 30 shoots. But abnormally swollen hard calli were formed from basal parts of shoots on MS media with TDZ and high concentration of BA(10.0 mg/L). The proliferated shoots on same media also showed necrosis by the lack of chlorophyll. The shoot growth and rooting were favorable on MS media containing $0.5{\sim}2.0$ mg/L IBA. The rooted plantlets were acclimatizated effectively in soil mixed with perlite 1:vermiculite 1 or vermiculite alone. Fifteen mL of liquid medium containing 10 g/L activated charcoal and 30 g/L sucrose were added in same vessels after small shoots were proliferated to stimulate shoot growth and rooting. After 8 weeks in culture, the shoots were dipped into high concentration of IBA solution. and planted in soil mexed with perlite 1:vermiculite 1. The shoot growth and rooting were favorable in dipping treatments of $500{\sim}2,000$ ppm IBA solutions for 10 sec.
This study was conducted to examine the effect of BA and NAA on adventitious bud induction from in vitro germinants E. pellita. The capacity of adventitious bud formation greatly depends on juvenility and explants origin; the more juvenile materials are the better ability to form adventitious buds even in in vitro raised plantlets. In case of in vitro germinants, 7 day old plantlets showed a better morphological response than did 14 day old ones in the induction of adventitious buds. The capacity to show morphological response was in decreasing order : cotyledons> petioles> roots. Ho adventitious buds formed when root segments were used as culture material. And optimum medium appeared to be MS + 0.5 mg/L BA and 0.2 mg/L NAA. Adventitious buds could be developed into multiple shoots and regenerated normal plantlets on DKW medium plus 0.2 mg/L BA and 0.01 mg/L NAA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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