A chimeric gene encoding enhanced green fluorescent protein (EGFP) and a S-layer protein from Lactobacillus brevis KCTC3102, and/or two copies of the Fe-binding Z-domain, a synthetic analog of the B-domain of protein A, was constructed and expressed in Escherichia coli BL21(DE3). The S-layer fusion proteins produced in a 500-1 fermentor were likely to be stable in the range of pH 5 to 8 and $0^{\circ}C$ to $40^{\circ}C$. Their adhesive property enabled an easy and rapid immobilization of enzymes or antibodies on solid materials such as plastics, glass, sol-gel films, and intestinal epithelial cells. Owing to their affinity towards intestinal cells and immunoglobulin G, the S-layer fusion proteins enabled the adhesion of antibodies to human epithelial cells. In addition, feeding a mixture of the S-layer fusion proteins and antibodies against neonatal calf diarrhea (coronavirus, rotavirus, Escherichia coli, and Salmonella typhimurium) to Hanwoo calves resulted in 100% prevention of neonatal calf diarrhea syndrome (p<0.01), whereas feeding antibodies only resulted in 56% prevention.
Phyllanthus emblica (PE) is known to exhibit various pharmacological properties. This study aimed to evaluate the antimetastatic potential of a PE aqueous extract. Cytotoxicity to human fibrosarcoma cells, HT1080, was determined by viability assay using the 3-(4,5-dimethylthiazol,2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) reagent. Cell migration and invasion were investigated using chemotaxis chambers containing membranes precoated with collagen IV and Matrigel, respectively. Cell attachment onto normal surfaces of cell culture plates was tested to determine the cell-adhesion capability. The molecular mechanism of antimetastatic activity was assessed by measuring the gene expression of matrix metalloproteinases, MMP2, and MMP9, using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) assay. The mRNA levels of both genes were significantly down-regulated after pretreatment with PE extract for 5 days. Our findings show the antimetastatic function of PE extract in reducing cell proliferation, migration, invasion, and adhesion in both dose- and time-dependent manners, especially growth arrest with low $IC_{50}$ value. A decrease in the expression of both MMP2 and MMP9 seems to be the cellular mechanism for antimetastasis in this case. There is a high potential to use PE extracts clinically as an optional adjuvant therapeutic drug for therapeutic intervention strategies in cancer therapy or chemoprevention.
Adhesions are the most common postoperative complication in intestinal surgery in dogs. This study was aimed at verify to the efficacy of sodium carboxymethylcellulose (SCMC) in the adhesion prevention during healing of intestinal anastomosis. Twenty three healthy dogs were taken with average 4.17 years and weight was 5.68 kg and divided into 4 groups. The dogs of group III and IV, a pedicle of greater omentum was wrapped around the suture line. In the animals of group II and IV, 1% SCMC was infused (5 ml/kg, IP) at just before closure of the abdominal cavity. Two weeks after surgery, animals were reoperated and the adhesions were evaluated and graded. We found various degrees of intraabdominal adhesions in animals of all the groups. The significantly (P<0.05) lower adhesion score was observed in group IV than that of other groups. Nevertheless, varying intra-peritoneal adhesions, healing of anastomotic site was normal in all groups. It could be concluded that intra-peritoneal administration of SCMC solution reduces postoperative adhesions without any adverse effects on healing, and a synergistic beneficial effect can be obtained by supplementation with omental graft for intestinal anastomosis.
Tumor metastasis remains the principal cause of treatment failure and poor prognosis in patients with colorectal cancer. It is a multistage process which includes proteolysis, motility and migration of cells, proliferation in a new site, and neoangiogenesis. A crucial step in the process of intra- and extra-vasation is the activation of proteolytic enzymes capable of degrading the extracellular matrix (ECM). In this stage, urokinase plasminogen activator receptor (uPAR) and matrix metalloproteinases (MMPs) are necessary. Micrometastases need the presence of growth factor and vascular growth factor so that they can form macrometastasis. In addition, cell adhesion molecules (CAMs) and guanine nucleotide exchange factors (GEFs) play important roles in the progression of colorectal cancer and metastatic migration. Further elucidation of the mechanisms of how these molecules contribute will aid in the identification of diagnostic and prognostic markers as well as therapeutic targets for patients with colorectal metastasis.
Intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) is a member of the immunoglobulin superfamily, its main function being to participate in recognition and adhesion between cells. ICAM-1 is considered closely related to occurrence, development, metastasis and invasion process of hepatocellular carcinoma (HCC). A variety of inflammatory cytokines and stimulus affect its expression through the nuclear factor-kappa B (NF-${\kappa}B$) signal transduction pathway. In the initial stage of inflammation, hepatocirrhosis and tumor development, ICAM-1 is expressed differently, and has varied effects on different cells to promote occurrence of malignancy and metastasis. ICAM-1 has diagnostic significance for AFP-negative or suspected HCC, and may be a prognositic significance. It is thus widely used in studies as a biomarker which reflects cancer cells metastasis as well as curative effect of drugs. Many new treatments of HCC may be based on the effects of ICAM-1 on different levels of function.
Biocompatible and biodegradable hydrogels based on carboxymethyl cellulose(CMC) and polyethyleneglycol(PEG) were prepared far physical barriers for preventing surgical adhesions. These interpolymeric hydrogels were synthesized by a gamma irradiation crosslinking technique. The 1Scmxl.Scm of cecal serosa and adjacent abdominal wail were abraded with bane burr until tbe serosal surface was disrupted and hemorrhagic but not perforated. and the serosa of tbe cecum was sutured to the abdominal wall in 5mm apart from the injured sire. The denuded cecum was covered with either CMC/PEG hydrogels or solution from CMC/PEG hydrogel. Control rat serosa was not covered. Two weeks later. the rats were sacrificed and adhesion was scored on a 0-5 scale. No treatment showed the significantly higher incidence of adhesions than either CMC/BEC hydrogels or solution from CMC/PEG hydrogel. In conclusion, these studies demonstrate that CMC/BEG hydrogels have a function of prevention of intra abdominal adhesion in a rat model.
Park, Suk-Hee;Kim, Hyo-Chan;Kim, Taek-Gyoung;Jung, Hyun-Jeong;Park, Tae-Gwan;Yang, Dong-Yol
Journal of the Korean Society for Precision Engineering
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v.24
no.4
s.193
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pp.138-146
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2007
Some biodegradable polymers and other materials such as hydrogels have shown the promising potential for surgical applications. Post surgical adhesion caused by the natural consequence of surgical wound healing results in repeated surgery and harmful effects. Recently, scientists have developed absorbable anti-adhesion barriers that can protect a tissue from adhesion in case they are in use; however, they are dissolved when no longer needed. Although these approaches have been attempted to fulfill the criteria for adhesion prevention, none can perfectly prevent adhesions in all situations. Overall, we developed a new method to fabricate an anti-adhesion membrane using biodegradable polymer and hydrogel. It employed a highly accurate three-dimensional positioning system with pressure-controlled syringe to deposit biopolymer solution. The pressure-activated microsyringe was equipped with fine-bore nozzles of various inner-diameters. This process allowed that inner and outer shapes could be controlled arbitrarily when it was applied to a surgical region with arbitrary shapes. In order to fulfill the properties of the ideal barriers f3r preventing postoperative adhesion, we adopted the pre-mentioned method combined with surface modification with the hydrogel coating by which anti-adhesion property was improved.
This study was performed to compare the efficacy of carboxymethylchitosan fabric (CMCF) with that of the combination of CMCF and low molecular weight heparin (LMWH) for the prevention of postoperative uterine adhesion in rats. Adhesions were induced by suturing both the uterine serosa and peritoneum abrased until petechial bleeding occurred. Fourteen days later, adhesions were evaluated clinically and histopathologically. The mean tensile strength was significantly decreased in the CMCF and CMCF+LMWH groups compared to that of control group, and the CMCF+LMWH group had the lowest tensile strength. The distance of adhesion site was highest in the CMCF group and slightly decreased in the CMCF+LMWH group comparing to that of control group. The inflammatory cell infiltration and neovascularization of the CMCF group were significantly lower than those of the control group. It was observed that the damage at intestinal serosa was significantly decreased in the CMCF+LMWH group comparing to that of control group. Therefore, it was concluded that CMCF and LMWH may be useful to prevent postoperative uterine adhesion in rats.
Platelets play an essential role in hemostasis through aggregation and adhesion to vascular injury sites but their unnecessary activation can often lead to thrombotic diseases. Upon exposure to physical or biochemical stimuli, remarkable platelet shape changes precede aggregation or adhesion. Platelets shape changes facilitate the formation and adhesion of platelet aggregates, but are readily reversible in contrast to the irrevocable characteristics of aggregation and adhesion. In this dynamic phenomenon, complex molecular signaling pathways and a host of diverse cytoskeleton proteins are involved. Platelet shape change is easily primed by diverse pro-thrombotic xenobiotics and stimuli, and its inhibition can modulate thrombosis, which can ultimately contribute to the development or prevention of thrombotic diseases. In this review, we discussed the current knowledge on the mechanisms of platelet shape change and also pathological implications and therapeutic opportunities for regulating the related cytoskeleton dynamics.
Purpose: The aim of this study was to investigate the relationship between cell adhesion and anoikis evasion among human osteosarcoma cells (MG-63), and to further study the molecular mechanisms. Materials and Methods: Human osteosarcoma cells (MG-63) were assessed for apoptosis, and caspase-3, E-cadherin and ${\beta}$-catenin expression in EDTA and control non-EDTA groups. Results: MG-63 cells were predominantly aggregated when in suspension, and the suspended cells were more dispersed in the EDTA group. Following culture in suspension for 24 h, 48 h, or 72 h, the rates of apoptosis were $34.88%{\pm}3.64%$, $59.3%{\pm}7.22%$ and $78.5%{\pm}5.21%$ in the experimental group and $7.34%{\pm}2.13%$, $14.7%{\pm}3.69%$, and $21.4%{\pm}3.60%$ in the control group, respectively. Caspase-3 expression progressively increased and E-cadherin and ${\beta}$-catenin were decreased in the experimental group, whereas there was no change in the control group. Conclusions: MG-63 cells could avoid anoikis through cell adhesion, and E-cadherin might play a role in this process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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