Peroxisomes play an important role in cellular defense systems and generate secondary messengers for cellular communication. Saccharomyces cerevisiae containing oleate-induced peroxisomes were subjected to buffer-soluble extraction and two chromatographic procedures, and a protein with antifungal activity was isolated. The results of MALDI-TOF analysis identified the isolated protein as peroxisomal 3-ketoacyl-CoA thiolase (ScFox3). Purified yeast ScFox3 exhibited thiolase activity that catalyzed the thiolytic cleavage of 3-ketoacyl-CoA to acetyl-CoA and acyl-CoA. ScFox3 protein inhibited various pathogenic fungal strains, with the exception of Aspergillus flavus. Using ScFox3-GFP and PTS2 signal-truncated ScFox3M-GFP, we showed that only ScFox3-GFP, with an intact PTS2 peroxisome signal sequence, was able to translocate into peroxisomes. Yeast ScFox3 is a natural antifungal agent found in peroxisomes.
These N-acyl amino acid surfactants is normally produced by reaction of acid anhydride with sodium ${\ell}-glutamate$ hydrolysates under Schotten-Baumann condition i.e., in alkaline aqueous medium. To avoid using fatty acid chlorides, acylations were also carried out with the fatty acids themselves or with their methyl esters, but unfortunately these methods cannot be used in practice, dodecenyl succinic anhydride, was to be studied for their suitability as acylating agents the production if acylated glutamine hydrolysates. The surface activities including surface tension forming power, forming stability and emulsifying power were measured. The experimental results revealed that the products have a good emulsifying power. Thus, there derivatives will be expected to be used an emulsifying agent for O/W type cosmetic emulsion.
A Li;YY Li;QB Wuqie;X Li;H Zhang;Y Wang;YL Wang;JJ Zhu;YQ Lin
Animal Bioscience
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제36권6호
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pp.829-839
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2023
Objective: The aim of this study was to clone the mRNA sequence of the Acyl-CoA dehydrogenase long chain (ACADL) gene of goats and explore the effect of ACADL on the differentiation of subcutaneous fat cells on this basis. Methods: We obtained the ACADL gene of goats by cloning and used quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR) to detect the ACADL expression patterns of different goat tissues and subcutaneous fat cells at different lipid induction stages. In addition, we transfect intramuscular and subcutaneous adipocytes separately by constructing overexpressed ACADL vectors and synthesizing Si-ACADL; finally, we observed the changes in oil red stained cell levels under the microscope, and qPCR detected changes in mRNA levels. Results: The results showed goat ACADL gene expressed in sebum fat. During adipocyte differentiation, ACADL gradually increased from 0 to 24 h of culture, and decreased. Overexpression of ACADL promoted differentiation of subcutaneous adipocytes in goat and inhibited their differentiation after interference. Conclusion: So, we infer ACADL may have an important role in positive regulating the differentiation process in goat subcutaneous adipocytes. This study will provide basic data for further study of the role of ACADL in goat subcutaneous adipocyte differentiation and lays the foundation for final elucidating of its molecular mechanisms in regulating subcutaneous fat deposition in goats.
To study the acute effect of dietary docosahexaenoic acid (DHA, $C_{22:6}$) on the expression of adipocyte determination and differentiation-dependent factor 1 (ADD1) mRNA in pig tissues, weaned, crossbred pigs (28 d of age) were fed with either 10% (on as-fed basis) tallow (high stearic acid), soybean oil (high linoleic acid), or high DHA algal oil for 2 d. The plasma and liver DHA reflected the composition of the diet. The adipose tissue and skeletal muscle DHA did not reflect the diet in the short term feeding. The results also showed that the diet containing 10% algal DHA oil significantly decreased the total plasma cholesterol (39%) and triacylglycerol (TG; 46%) in the pigs. Soybean oil significantly decreased plasma TG (13.7%; p<0.05), but did not have an effect on plasma cholesterol. The data indicate that different dietary fatty acid compositions have different effects on plasma lipids. The ADD1 mRNA was decreased (p<0.05) in the liver of DHA oil-treated pigs compared with the tallow-treated pigs. The diets did not have significant effect on the ADD1 mRNA in adipose tissue. Addition of algal DHA oil in the diet increased acyl CoA oxidase (ACO) mRNA concentration in the liver, suggesting that dietary DHA treatment increases peroxisomal fatty acid oxidation in the liver. However, dietary soybean oil supplementation did not affect mRNA concentrations of ADD1 or ACO in the tissues of pigs. Because ADD1 increases the expression of genes associated with lipogenesis, and ACO is able to promote fatty acid oxidation, feeding DHA oil may change the utilization of fatty acids through changing the expression of ADD1 and ACO. Therefore, feeding pigs with high DHA may lead to lower body fat deposition.
Nine sesquiterpene lactones, which were isolated from Hemisteptia lyrata Bunge, Chrysanthemum zawadskii Herbich var. latilobum Kitamura and Chrysanthemum boreale Makino were evaluated for the inhibition upon the nitric oxide release from the Raw cell and for the ACAT (acyl Co A: cholesterol acyltransferase) inhibitory assay. In the nitric oxide release inhibitory experiment, hemistepsin B $(IC_{50}\;=\;0.05\;{\mu}g/ml,\;0.15\;{\mu}M),$ cumambrin B, tulipinolide and costunolide exhibited strong inhibition with $IC_{50}$ values $0.05\;{\mu}g/ml\;(0.15\;{\mu}M),\;0.1\;{\mu}g/ml\;(0.38\;{\mu}M),\;0.2\;{\mu}g/ml\;(0.69\;{\mu}M)$ and $0.2\;{\mu}g/ml(0.86\;{\mu}M),$ respectively. In the ACAT inhibitory assay, angeloylcumambrin B, tigloylcumambrin B, tulipinolide and costunolide exhibited strong inhibition with $IC_{50}$ values $33\;{\mu}g/ml\;(95.4\;{\mu}M),\;22\;{\mu}g/ml\;(63.6\;{\mu}M),\;38\;{\mu}g/ml\;(151\;{\mu}M)$ and $17\;{\mu}g/ml(73.3\;{\mu}M),$ respectively, whereas other compounds did not exhibit significant activity against ACAT above $100\; {\mu}g/ml.$.
Nan, Jinyan;Lee, Ji Seon;Lee, Seung-Ah;Lee, Dong-Sup;Park, Kyong Soo;Chung, Sung Soo
Molecules and Cells
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제44권9호
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pp.637-646
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2021
Free fatty acids are converted to acyl-CoA by long-chain acyl-CoA synthetases (ACSLs) before entering into metabolic pathways for lipid biosynthesis or degradation. ACSL family members have highly conserved amino acid sequences except for their N-terminal regions. Several reports have shown that ACSL1, among the ACSLs, is located in mitochondria and mainly leads fatty acids to the β-oxidation pathway in various cell types. In this study, we investigated how ACSL1 was localized in mitochondria and whether ACSL1 overexpression affected fatty acid oxidation (FAO) rates in C2C12 myotubes. We generated an ACSL1 mutant in which the N-terminal 100 amino acids were deleted and compared its localization and function with those of the ACSL1 wild type. We found that ACSL1 adjoined the outer membrane of mitochondria through interaction of its N-terminal region with carnitine palmitoyltransferase-1b (CPT1b) in C2C12 myotubes. In addition, overexpressed ACSL1, but not the ACSL1 mutant, increased FAO, and ameliorated palmitate-induced insulin resistance in C2C12 myotubes. These results suggested that targeting of ACSL1 to mitochondria is essential in increasing FAO in myotubes, which can reduce insulin resistance in obesity and related metabolic disorders.
Kim, Yu-Sam;An, Jae-Hyung;Yang, Bu-Hyun;Kim, Kyu-Wan
BMB Reports
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제29권4호
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pp.277-285
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1996
In Pseudomonas fluorescens grown on malonate as sole carbon source, acetyl-CoA synthetase was induced, suggesting that malonate is metabolized through acetate and then acetyl-CoA. Acetyl-CoA synthetase was purified 18.6-fold in 4 steps to apparent homogeneity. The native molecular mass of the enzyme estimated by a native acrylamide gel electrophoresis was 130 kDa. The enzyme was composed of two identical subunits with a molecular mass of 67 kDa. Optimum pH was 70. The acetyl-CoA synthetase showed typical Michaelis-Menten kinetics for the substrates, acetate, ATP and CoA, whose $K_m$ values were calculated to be 33.4, 74.8, and 40.7 mM respectively. Propionate. butyrate and pentanoate were also used as substrates by the enzyme, but the rate of the formation of the CoA derivatives was decreased in the order of the increase in carbon number. The enzyme was inhibited by the group-specific reagents diethylpyro-carbonate, 2,3-butanedione, pyridoxal-5'-phosphate and N-bromosuccinimide. In the presence of substrates the inactivation rate of the enzyme, by all of the group-specific reagents mentioned above decreased, indicating the presence of catalytically essential histidine, arginine, lysine and tryptophan residues at or near the active site. Preincubation of the enzyme with ATP, $Mg^{2+}$ resulted in the increase of its susceptibility to diethylpyrocarbonate, suggesting that ATP, $Mg^{2+}$ may induce a conformational change in the active site exposing the essential histidine residue to diethylpyrocarbonate. The enzyme was acetylated in the presence of acetyl-CoA, indicating that this is one of acyl-enzyme.
It is suggested that ovariectomy induces body weight gain primarily in the form of adipose tissue in rodents. Since liver peroxisome proliferator-activated receptor ${\alpha}$ (PPAR${\alpha}$) and uncoupling 2 (UCP2) are involved in the regulation of energy expenditure, it was investigated whether swim training regulates ovariectomy-induced adiposity and steatosis through liver PPAR${\alpha}$ and UCP2 activation in female ovariectomized mice, an animal model of postmenopausal women. Swim-trained mice had significantly decreased adipose tissue weights compared with sedentary control mice. Histological analysis showed that hepatic lipid accumulation was inhibited by swim training. Concomitantly, swim training significantly increased mRNA levels of PPAR${\alpha}$ and its target genes responsible for peroxisomal fatty acid ${\beta}$-oxidation, such as acyl-CoA oxidase, enoyl-CoA hydratase/3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase and thiolase in the liver. Moreover, swim training induced the mRNA expression of UCP2. These results suggest that swim training can effectively prevent adiposity and steatosis caused by ovariectomy, in part through activation of liver PPAR${\alpha}$ and UCP2 in female obese mice.
Objective: The aim of the study was to evaluate the influence of gene polymorphisms and nongenetic factors on the somatic cell score (SCS) in the milk of Holstein (n = 148) and Simmental (n = 73) cows and their crosses (n = 6). Methods: The SCS was calculated by the formula SCS = log2(SCC/100,000)+3, where SCC is the somatic cell count. Polymorphisms in the casein alpha S1 (CSN1S1), beta-casein (CSN2), kappa-casein (CSN3), beta-lactoglobulin (LGB), acyl-CoA diacylglycerol transferase 1 (DGAT1), leptin (LEP), fatty acid synthase (FASN), stearoyl CoA desaturase 1 (SCD1), and 1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase 6 (AGPAT6) genes were genotyped, and association analysis to the SCS in the cow's milk was performed. Further, the impact of breed, farm, year, month of the year, lactation stage and parity on the SCS were analysed. Phenotype correlations among SCS and milk constituents were computed by Pearson correlation coefficients. Results: Only CSN2 genotypes A1/A2 were found to have significant association with the SCS (p<0.05), and alleles of CSN1S1 and DGAT1 genes (p<0.05). Other polymorphisms were not found to be significant. SCS had significant association with the combined effect of farm and year, lactation stage and month of the year. Lactation parity and breed had not significant association with SCS. The phenotypic correlation of SCS to lactose content was negative and significant, while the correlation to protein content was positive and significant. The correlations of SCS to fat, casein, nonfat solids, urea, citric acid, acetone and ketones contents were very low and not significant. Conclusion: Only CSN2 genotypes, CSN1S1 and DGAT1 alleles did show an obvious association to the SCS. The results confirmed the importance of general quality management of farms on the microbial milk quality, and effects of lactation stage and month of the year. The lactose content in milk reflects the health status of the udder.
췌장에서 분비되는 cholesterol esterase(CEase)와 소장의 acyl coenzyme A: cholesterol acyltransferase(ACAT)는 흡수된 콜레스테롤을 다시 ester화하는데 관여한다. 한방재료 중 건위, 진토 및 수렴지사작용 등을 가지는 초두구(Alpiniae Katusumadaii Semen)의 에탄올 추출물이 in vitro에서 cholesterol esterase활성에 대하여 강한 저해작용을 보였으며 에탄올추출물의 용매분획 중 클로로포름분획이 다른 분획들, 즉 에틸 아세테이트분획, 부탄올분획 및 물 분획보다 강하였다. 초두구의 클로로포름분획이 고 콜레스테롤식이를 섭취시킨 rat에서 혈중 콜레스테롤치를 저하시키는 효과가 있는지 측정한 실험에서 chloroform분획을 100 mg/kg 및 150 mg/kg 섭취시켰을 경우 각각 총cholesterol 함량이 11.8% 및 20.8% 감소하였으며 HDL-cholesterol 함량 및 동맥경화지수는 정상군에 가깝게 회복된 것으로 나타났다. 또한 초두구 chloroform분획의 독성검사 결과 mouse에서 $LD_{50}$은 1,625mg/kg으로 산출되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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