The purpose of this study was to isolate and characterize bacteriocin-producing bacteria against Clostridium perfringens from domestic animals to determine their usefulness as probiotics. The feces of cattle and chicken were used as sources to isolate bacteriocin-producing bacteria using the spot-on-lawn method. In total, 900 bacterial stains were isolated from domestic animal feces, and 19 strains were finally selected after determining the inhibitory activity against the pathogenic indicator C. perfringens KCTC 3269. Eighteen strains of Bacillus subtilis and one strain of Brevibacillus parabrevis were identified by 16s rRNA sequencing. Most of the bacterial strains isolated were resistant to 0.5% bile salts and remained viable after 2 h at pH 3.0. Additionally, some B. subtilis strains showed strong inhibitory activity against Listeria monocytogenes. We isolated and screened B. subtilis strains CB 153 and CB 189 from cattle and B. subtilis MSC 156 and B. parabrevis MSC 164 from chickens using probiotic selection criteria such as inhibition activity against C. perfringens and tolerance to acid and bile salts. The isolated bacteriocin-producing bacteria and/or bacteriocin have the potential to be used as probiotics in the livestock industry.
Ewe, Joo-Ann;Wan-Abdullah, Wan-Nadiah;Alias, Abdul Karim;Liong, Min-Tze
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.22
no.7
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pp.947-959
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2012
This study was aimed at an evaluation of the potential inheritance of electroporation effects on Lactobacillus fermentum BT 8219 through to three subsequent subcultures, based on their growth, isoflavone bioconversion activities, and probiotic properties, in biotin-supplemented soymilk. Electroporation was seen to cause cell death immediately after treatment, followed by higher growth than the control during fermentation in biotin-soymilk (P<0.05). This was associated with enhanced intracellular and extracellular ${\beta}$-glucosidase specific activity, leading to increased bioconversion of isoflavone glucosides to aglycones (P<0.05). The growing characteristics, enzyme, and isoflavone bioconversion activities of the first, second, and third subcultures of treated cells in biotin-soymilk were similar to the control (P>0.05). Electroporation affected the probiotic properties of parent L. fermentum BT 8219, by reducing its tolerance towards acid (pH 2) and bile, lowering its inhibitory activities against selected pathogens, and reducing its ability for adhesion, when compared with the control (P<0.05). The first, second, and third subcultures of the treated cells showed comparable traits with that of the control (P>0.05), with the exception of their bile tolerance ability, which was inherited to the treated cells of the first and second subcultures (P<0.05). Our results suggest that electroporation could be used to increase the bioactivity of biotin-soymilk via fermentation with probiotic L. fermentum BT 8219, with a view towards the development of functional foods.
Jeong, Eun Ji;Moon, Dae Won;Oh, Joon Suk;Moon, Jin Seok;Kim, Kwang Yup;Choi, Hye Sun;Han, Nam Soo
KSBB Journal
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v.30
no.3
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pp.109-113
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2015
Current drying and encapsulation methods for probiotics manufacturing are complicate and cost-burdened processes. The aim of this study was to develop a simple ingredient mixture to make probiotic granules via one-step process, providing not only a cryoprotective effect during freezing and drying but also high survival ratio in gastrointestinal tract. As cryoprotectans, commercially available ingredients including skim milk, monosaccharide (trehalose or glycerin), maltodextrins (with low or high degree of equivalents) were used. Their cryoprotective effect during lyophilization and survival ratios in artificial gastric juice and bile salt were measured against 3 strains of lactic acid bacteria (LAB) (Lactobacillus plantarum, Lb. brevis, and Lactococcus lactis). As results, 3 mixtures with different compositions showed a cryprotective effect on LAB tested and the best compostion was dependant upon LAB; skim milk 10%, trehalose 15%, glycerin 0.5%, and NaCl 1% was for Lb. plantarum and Lc. lactis, and maltodextrin 10% instead of skim milk was for Lb. brevis. In addition, those mixtures showed similar survival effect on LAB tested. These results demonstrate that skim milk or maltodextrins with trehalose, glycerin, and NACl can be effectively used for onestep lyophilization of LAB as an alternative method of encapsulation.
Kim, Eun Jin;Kang, Yeong Im;Bang, Tae Il;Lee, Myoung Han;Lee, Sang Won;Choi, In Soo;Song, Chang Seon;Lee, Joong Bok;Park, Seung Yong
Korean Journal of Veterinary Research
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v.56
no.2
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pp.75-84
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2016
Probiotics that are able to provide beneficial effects on animal health have become important ingredients of dog foods. This study was conducted to characterize the probiotic potentials of two strains, Lactobacillus reuteri BCLR-42 and Lactobacillus plantarum BCLP-51, that were derived from feces of healthy dogs and evaluated based on tolerance to low pH and bile acid, antimicrobial activities, enzyme profiles, sensitivity to antibiotics, and innate immune enhancing potentials. Both strains showed survival of more than 90% at pH 3 and 0.2% bile acid and exhibited broad antimicrobial activities against indicator bacteria. Moreover, both strains showed high sensitivity to antibiotics, except vancomycin, metronidazole, and gentamicin. The alkaline phosphatase was negligible (score 0), whereas they showed strong beta galactosidase activity (score range 5 or 3, respectively). The phagocytosis and oxidative burst activities of canine granulocytes were significantly enhanced in response to both strains. These results show that both strains have the capability to act as probiotics and the potential for application as ingredients in dog foods.
Previous studies have suggested that microbial fermentation is an attractive process to develop food products using seaweed. The objective of this study was to isolate and characterize lactic acid bacteria (LAB), which are used as starters for seaweed fermentation. The isolation of LAB strains was conducted using kelp Saccharina japonica kimchi, a well-known fermented seaweed in southeastern Korea. Based on the assay of acid tolerance, bile tolerance and antioxidant activity, 15 strains of LAB were selected for further study. The LABs exhibited cholesterol lowering activity in the range of 15.50 to 94.77%. Among the LABs suitable for food production, Lactobacillus plantarum D-11 had the highest antioxidant and cholesterol lowering activities. This probiotic strain will be applied to develop various kelp fermentation products.
Three hundred lactic acid bacteria isolated from human feces were studied their probiotic characters to develop potential probiotics. The properties were tested on the basis of guideline for probiotic selection protocol such as tolerance for acid or bile salt, thermal stability, antimicrobial, anticancer cell, and antiviral activity. Strain Miny-148 was selected as a potential probiotic bacterium which showed resistance to low pH, bile salts and thermal stability. On the basis of fatty acid profiles and 16S rDNA sequences analysis, the strain was identified as Lactobacillus pentosus (similarity 99.9%). The strain, L. pentosus Miny-148, showed broad antimicrobial spectrum against E. coli O157:H7, Shigella flexneri, Bacillus anthracis, Staphylococcus aureus, E. coli, Vibrio cholerae, V. vulnificus, Salmonella typhimurium, and Methicillin-resistant S. aureus (MRSA). Cell-free culture supernatant of the strain also inhibited against the growth of HT-29 colon cancer cell and transmissible gastroenterits virus.
Kim, Eun-Ji;Jo, Seung-Wha;Kim, Jin-Kyeong;Jeong, Do-Youn
Journal of Life Science
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v.29
no.6
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pp.697-704
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2019
This study performed to investigate the probiotic properties of lactic acid bacteria 200 strains isolated from traditional fermented foods. Based on being higher tolerance to bile salts and showing higher acid resistance, 4 LAB Strains were selected in the screening experiment; Lactobacillus plantarum SRCM 102224, Lb. plantarum SRCM102227, Lb. paracasei SRCM102329, Lb. paracasei SRCM102343. Antibacterial activity against various pathogens, acid and bile salt tolerance, hemolytic phenomenon, cell surface hydrophobicity, and antibiotic resistance were examined. Among the tested strains, SRCM 102343 (95.9%) was highly observed hydrophobicity compared to Lb. rhmanosus GG (13.4%) as control. In this study, the in vitro adhesion properties of 4 strains of LAB was investigated using human intestinal caco-2 cell cultures. SRCM102329 and SRCM102343showed higher adherence to caco-2 cells than Lb. rhamnosus GG. The antibacterial activities of 4 strains LAB were investigated. the 3 strains showing strongly antimicrobial activity against Escherichia coli ATCC10798, Staphylococcus aureus KCCM11593, Listeria invanovii KCTC3444, Bacillus cereus ATCC11778 and S. enterica serovar. Typhi KCTC1926. These results suggest that selected strains have good probiotic potential for application in functional foods.
In the present work, the influence of prebiotic fructooligosaccharide (FOS) on adhesion to Caco-2 cells, viability, acid and bile tolerance, antibacterial, antioxidant, enzymatic, and metabolic activities of the probiotic starters Lactobacillus acidophilus GK20 and Lactobacillus paracasei GK74, has been explored. Experiments were conducted with fermented yoghurt over a period of 7 days at $4^{\circ}C$. When compared to control fermentations without prebiotic, the addition of FOS was seen to significantly (p<0.05) increase the viable cell counts of the probiotics, overall viscosity, and concurrently reduce the pH of the fermented yoghurts. Both Escherichia coli ATCC 11229 and Salmonella enteritidis ATCC 13076 were inhibited by the probiotics' antibacterial activities, while the synbiotic yoghurt containing mixed probiotics and FOS was noted to highly improve antagonistic action. When fermented with mixed starters, the addition of FOS (1.0%) resulted in the highest proteolytic ($1.06{\pm}0.06$ unit) and ${\beta}$-galactosidase activities ($20.14{\pm}0.31$ unit). However, FOS did not affect acid and bile tolerance, adhesion to Caco-2 cells or the antioxidant activity of the probiotics, although both L. acidophilus GK20 and L. paracasei GK74 had functionality as probiotic strains. Hence, a significant synbiotic effect was observed in fermented yoghurt after 7 days of storage at $4^{\circ}C$, and as a result, such synbiotic yoghurt can be said to possess synergistic actions which improve the gastrointestinal environment and promote of health.
In this study, the survival capacity (acid and bile salt tolerance, and adhesion to gut epithelial cells) and probiotic properties (enzyme activity-inhibition and anti-inflammatory activities, inhibition of adipogenesis, and stress hormone level reduction) of Lactiplantibacillus plantarum LRCC5314, isolated from kimchi (Korean traditional fermented cabbage), were investigated. LRCC5314 exhibited very stable survival at ph 2.0 and in 0.2% bile acid with 89.9% adhesion to Caco-2 intestinal epithelial cells after treatment for 2 h. LRCC5314 also inhibited the activities of α-amylase and α-glucosidase, which are involved in elevating postprandial blood glucose levels, by approximately 72.9% and 51.2%, respectively. Treatment of lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells with the LRCC5314 lysate decreased the levels of the inflammatory factors nitric oxide, tumor necrosis factor (TNF-α), interleukin (IL)-1β, and interferon-γ by 88.5%, 49.3%, 97.2%, and 99.8%, respectively, relative to those of the cells treated with LPS alone. LRCC5314 also inhibited adipogenesis in differentiating preadipocytes (3T3-L1 cells), showing a 14.7% decrease in lipid droplet levels and a 74.0% decrease in triglyceride levels, as well as distinct reductions in the mRNA expression levels of adiponectin, FAS, PPAR/γ, C/EBPα, TNF-α, and IL-6. Moreover, LRCC5314 reduced the level of cortisol, a hormone with important effect on stress, by approximately 35.6% in H295R cells. L. plantarum LRCC5314 is identified as a new probiotic with excellent in vitro multifunctional properties. Subsequent in vivo studies may further demonstrate its potential as a functional food or pharmabiotic.
The growth characteristics and the cellular protein patterns of the Lactobacillus plantarum isolated and identified from oat silage were examined in order to confirm whether it will be used practically as probiotics or not. L plantarum was identified by morphological and biochemical tests including of final conforming by API 50CHL kit. The cultivation in MRS broth of the strain under the condition of different temperature, proved that they grew into $2.0{\times}10^{9}$ in $25^{\circ}C$, into $1.4{\times}10^{9}$ in $35^{\circ}C$ but they decreased into $4.5{\times}10^{5}$ growth in $45^{\circ}C$. The comparison of the growth by measurement of O.D600nm value after 24 hour cultivation between L plantarum and commercial probiotics, showed that the strain had a higher growth than commercial as 1.841 : 1.623. The measurement of it under bile acid's existence, indicated that this isolation was not influenced by bile acid and the tolerance was $3.2{\times}10^{9}$, $3.9{\times}10^{9}$ and $3.2{\times}10^{9}$, respectively, when each of 0%, 1%, and 2% oxigall existed. The examination of their antibiotics susceptibility by disk diffusion test, proved that L plantarum showed resistance against danofloxacin(5mcg), gentamycin(10mcg), kanamycin(30mcg), neomycin(30mcg) and streptomycin(10mcg). Based upon the test of the bacteriocin formation of this L plantarum, it was found out that the inhibition zone was not formed. In growth of L plantarum and E coli in nutrient broth, all E coli died out within 6 hours after cultures.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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