Apolipoprotein H (APOH) primarily engages in fat metabolism and inflammatory disease response. This study aimed to investigate the effects of APOH on fat synthesis in duck myoblasts (CS2s) by APOH overexpression and knockdown. CS2s overexpressing APOH showed enhanced triglyceride (TG) and cholesterol (CHOL) contents and elevated the mRNA and protein expression of AKT serine/threonine kinase 1 (AKT1), ELOVL fatty acid elongase 6 (ELOVL6), and acetyl-CoA carboxylase 1 (ACC1) while reducing the expression of protein kinase AMP-activated catalytic subunit alpha 1 (AMPK), peroxisome proliferator activated receptor gamma (PPARG), acyl-CoA synthetase long chain family member 1 (ACSL1), and lipoprotein lipase (LPL). The results showed that knockdown of APOH in CS2s reduced the content of TG and CHOL, reduced the expression of ACC1, ELOVL6, and AKT1, and increased the gene and protein expression of PPARG, LPL, ACSL1, and AMPK. Our results showed that APOH affected lipid deposition in myoblasts by inhibiting fatty acid beta-oxidation and promoting fatty acid biosynthesis by regulating the expression of the AKT/AMPK pathway. This study provides the necessary basic information for the role of APOH in fat accumulation in duck myoblasts for the first time and enables researchers to study the genes related to fat deposition in meat ducks in a new direction.
Koju, Dinesh;Maharjan, Sushila;Dhakal, Dipesh;Yoo, Jin Cheol;Sohng, Jae Kyung
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제22권8호
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pp.1127-1132
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2012
Nargenicin $A_1$ is a 28-membered polyketide macrolide, with antibacterial activity against methicillin-resistant Staphylococcus aureus, produced by Nocardia sp. CS682. In this study, the production of nargenicin $A_1$ was improved by enhancing the supply of different biosynthetic precursors. In Nocardia sp. CS682 (KCTC11297BP), this improvement was ~4.62-fold with the supplementation of 30 mM methyl oleate, 4.25-fold with supplementation of 15mM sodium propionate, and 2.81-fold with supplementation of 15 mM sodium acetate. In Nocardia sp. metK18 and Nocardia sp. CS682 expressing S-adenosylmethionine synthetase (MetK), the production of nargenicin $A_1$ was improved by ~5.57-fold by supplementation with 30 mM methyl oleate, 5.01-fold by supplementation with 15 mM sodium propionate, and 3.64-fold by supplementation with 15 mM sodium acetate. Furthermore, supplementing the culture broth of Nocardia sp. ACC18 and Nocardia sp. CS682 expressing the acetyl-CoA carboxylase complex (AccA2 and AccBE) with 30 mM methyl oleate, 15 mM sodium propionate, or 15 mM sodium acetate resulted in ~6.99-, 6.46-, and 5.58-fold increases, respectively, in nargenicin $A_1$ production. Our overall results showed that among the supplements, methyl oleate was the most effective precursor supporting the highest titers of nargenicin $A_1$ in Nocardia sp. CS682, Nocardia sp. metK18, and Nocardia sp. ACC18.
Bunchasak, C.;Satoso, U.;Tanaka, K.;Ohtani, S.;Collado, Cristino M.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제10권2호
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pp.185-191
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1997
This experiment was conducted to determine the effects of a low-protein diet supplemented with DL-methionine plus L-cystine (Met + Cys) on the growth performance and fat accumulation of female broiler chicks during the growing period (3-6 wks old). A low-protein diet (17% CP; 3,200 ME kcal/kg) was supplemented with Met + Cys (1.1 : 1.0) at levels 0.75, 0.94, 1.25, 1.31 or 1.50% of diet, respectively. Another diet with 21% CP and 3,200 ME kcal/kg served as the control group. All essential amino acids were adjusted to meet the National Research Council (1984) requirement for chicks. Feed and water were given ad libitum. Body weight of the chicks fed the low-CP diets supplemented with Met + Cys were heavier than those of the control birds. Feed conversion ratio and feed intakes were not significantly different between and among the treatment groups. Similary, abdominal fat content was not significantly different among the various treatments except that of the chicks fed the low CP diet with 1.25% Met + Cys which was higher than that of the control group. Fatty acid synthetase (FAS), acetyl-CoA carboxylase (ACC) activities and carcass protein content were not influenced by dietary treatments. Carcass fat content was lowest in chicks fed low CP diet with 0.75% Met + Cys and highest in the group that received 1.50% Met + Cys supplementation. Liver triglyceride increased as Met + Cys supplementation level increased. Various lipid fraction concentrations (cholesterol ester, free cholesterol, and phospholipid) in the serum went up as Met + Cys increased up to 1.25% after which it levelled off. Results of this experiment suggest that it is possible to reduce dietary protein level from 21% to 17% for growing broiler chicks by the supplementation of Met + Cys when other EAA were sufficient.
This study investigated the effects of fermented product from Bacillus subtilis (FPBS) on feed conversion efficiency, fat accumulation and ammonia production in broiler chicks. Sixty female broilers (strain Chunky, 7-day old) were divided into four groups and raised in individual cages. One group was fed a commercial diet without supplementation of FPBS as the control and the other three groups were fed commercial diets containing FPBS, either 0.5, 1.0 or 2.0%, for 21 days from 7 to 28 days of age. Water and feed were given ad libitum. Feed conversion efficiency was significantly improved in chicks supplemented with 0.5 or 1.0% of FPBS as compared with the control (p<0.05). The activities of hepatic acetyl-CoA carboxylase and fatty acid synthetase, and contents of triglyceride and cholesterol in the liver were significantly decreased in treatment groups (p<0.05) as compared with the control group. FPBS had no effect on the concentration of plasma triglyceride, phospholipids and cholesterol. Feeding FPBS at 1 % or 2% levels reduced ammonia gas release (p<0.05). The inclusion of FPBS at 1 % level may be recommended both to improve production efficiency and to reduce air pollution caused by ammonia gas release. For production efficiency to reach maximal profit, the inclusion of FPBS at 0.5% level can be recommended. Feeding FPBS reduced fat accumulation in the liver.
This experiment was conducted with male chicks to investigate the influence of hormones and nutrients on the development of fatty liver syndrome (FLS) as well as the effects of dietary lipotropic factors on hepatic fat accumulation and lipogenic enzyme gene expression. A total of two-hundred sixteen 4-wk-old Hy-Line male chicks were divided into six groups and fed an experimental diet (T1, low-energy diet with low levels of lipotropic factors; T2, high-energy diet with low levels of lipotropic factors; T3 and T5, low-energy diet with high levels of lipotropic factors; T4 and T6, high-energy diet with high levels of lipotropic factors) for six weeks. The chicks in T5 and T6 groups were treated with intramuscular injections of estradiol benzoate for three days prior to biopsy and clinical analysis of FLS. Chicks treated with estrogen had significantly greater liver weights than untreated chicks. The abdominal fat contents were increased in chicks consuming high-energy diets as compared to those consuming low-energy diets. Treatment with estrogen significantly increased the concentrations of serum cholesterol, triacylglycerol and phospholipid (p<0.05). The hepatic triacylglycerol levels were tenfold higher in the estrogen treated chicks than in the untreated chicks. There were no significant differences in malondialdehyde levels between the treatment groups. Estrogen treatment dramatically increased the levels of fatty acid synthetase, acetyl-CoA carboxylase and ApoB mRNA. The results indicated that treatment with exogenous estrogen in growing male chicks induced hepatic fat accumulation, which might be partially due to increased lipogenic enzyme gene expression.
Objective: This study was conducted to investigate the potential effects of prolonged photoperiod on the serum lipids, carcass traits, and meat quality of Jinjiang cattle during winter. Methods: Thirty-four Jinjiang bulls aged between 14 and 16 months were randomly assigned to two groups that were alternatively subjected to either natural daylight +4 h supplemental light (long photoperiod, LP) or natural daylight (natural photoperiod, NP) for 96 days. The potential effects on the levels of serum lipids, carcass traits, meat quality, and genes regulating lipid metabolism in the intramuscular fat (IMF) of the cattle were evaluated. Results: Jinjiang cattle kept under LP showed significant increase in both dry matter intake and backfat thickness. the serum glucose and the plasma leptin levels were significantly reduced, while that of melatonin and insulin were observed to be increased. The crude fat contents of biceps femoris muscle and longissimus dorsi muscle were higher in LP than in NP group. In longissimus dorsi muscle, the proportions of C17:0 and C18:0 were significantly higher but that of the C16:1 was found to be significantly lower in LP group. The relative mRNA expressions in IMF of longissimus dorsi muscle, the lipid synthesis genes (proliferator-activated receptor gamma, fatty acid-binding protein) and the fatty acid synthesis genes (acetyl-coa carboxylase, fatty acid synthetase, 1-acylglycerol-3-phosphate acyltransferase) were significantly up-regulated in LP group (p<0.05); whereas the hormone-sensitive lipase and stearoyl-CoA desaturase 1 were significantly down-regulated in LP than in NP group. Conclusion: Prolonged photoperiod significantly altered the growth performance, hormonal levels, gene expression and fat deposition in Jinjiang cattle. It suggested that the LP improved the fat deposition by regulating the levels of different hormones and genes related to lipid metabolism, thereby improving the fattening of Jinjiang cattle during winter.
Our previous results showed that kisspeptin-10 (Kp-10) injections via intraperitoneal (i.p.) once daily for three weeks notably promoted the egg laying rate in quails. In order to investigate the mechanism behind the effects of Kp-10 on enhancing the egg laying rate in birds, this study focused on the alternations of lipids synthesis in liver after Kp-10 injections. 75 female quails (22 d of age) were allocated to three groups randomly, and subjected to 0 (control, Con), 10 nmol (low dosage, L) and 100 nmol (high dosage, H) Kp-10 injections via i.p. once daily for three weeks, respectively. At d 52, quails were sacrificed and sampled for further analyses. Serum $E_2$ concentration was increased by Kp-10 injections, and reached statistical significance in H group. Serum triglyceride (TG) concentrations were increased by 46.7% in L group and 36.8% in H group, respectively, but did not reach statistical significance, and TG contents in liver were significantly elevated by Kp-10 injections in a dose-dependent manner. Serum total cholesterol (Tch) concentrations significantly decreased in H group, while in H group the hepatic Tch content was markedly increased. The level of non-esterified fatty acid (NEFA), apolipoprotein A1 and B (apoA1 and apoB) were not altered by Kp-10 injections. The genes expression of sterol regulatory element binding protein-1 (SREBP-1), fatty acid synthetase (FAS), apolipoprotein VLDL-II (apoVLDL-II), cholesterol $7{\alpha}$-hydroxylase (CYP7A1) and vitellogenin II (VTG-II) were significantly up-regulated by high but not low dosage of Kp-10 injection compared to the control group. However, the expression of SREBP-2, acetyl-CoA carboxylase ($ACC_{\alpha}$), malic enzyme (ME), stearoyl-CoA (${\Delta}9$) desaturase 1 (SCD1), apolipoprotein A1 (apoA1), fatty acid binding protein 2 (FABP2), 3-hydroxyl-3-methyl glutaryl-coenzyme A reductases (HMGCR), estrogen receptor ${\alpha}$, ${\beta}$($ER{\alpha}$ and ${\beta}$) mRNA were not affected by Kp-10 treatment. In line with hepatic mRNA abundance, hepatic SREBP1 protein content was significantly higher in H group. Although the mRNA expression was not altered, the content of $ER{\alpha}$ protein in liver was also significantly increased in H group. However, SREBP-2 protein content in liver was not changed by Kp-10 treatment. In conclusion, exogenous Kp-10 consecutive injections during juvenile stage significantly advanced the tempo of egg laying in quails, which was associated with the significant elevation in hepatic lipids synthesis and transport.
To understand the molecular mechanisms that regulate intramuscular fat deposition and its release, cDNA clones expressed in adipose tissues of Korean cattle were identified by differential screening from adipose tissue cDNA library. By partial nucleotide sequencing of 486 clones and a search for sequence similarity in NCBI nucleotide databases, 245 clones revealed unique clones. By a functional grouping of the clones, 14% of the clones were categorized to metabolism and enzyme-related group (stearoyl CoA desaturase, lactate dehydrogenase, fatty acid synthase, ATP citrate lyase, lipoprotein lipase, acetyl CoA synthetase, etc), and 6% to signal transduction/cell cycle-related group (C/EBP, cAMP-regulated phosphoprotein, calmodulin, cyclin G1, cyclin H, etc), and 4% to cytoskeleton and extracellular matrix components (vimentin, ankyrin 2, gelosin, syntenin, talin, prefoldin 5). The obtained 245 clones will be useful to study lipid metabolism and signal transduction pathway in adipose tissues and to study obesity in human. Some clones were subjected to full-sequencing containing open reading frame. The cDNA clone of bovine homolog of human prefoldin 5 gene had a total length of 959 nucleotides coding for 139 amino acids. Comparison of the deduced amino acid sequences of bovine prefoldin 5 with those of human and mouse showed over 95% identity. The cDNA clone of bovine homolog of human ubiquitin-like/S30 ribosomal fusion protein gene had a total length of 484 nucleotides coding for 133 amino acids. Comparison of the deduced amino acid sequences of bovine ubiquitin-like/S30 ribosomal fusion protein gene with those of human, rat and mouse showed over 97% identity. The cDNA clone of bovine homolog of human proteolipid protein 2 mRNA had a total length of 928 nucleotides coding for 152 amino acids. Comparison of the deduced amino acid sequences of bovine proteolipid protein 2 with those of human and mouse showed 87.5% similarity. The cDNA clone of bovine homolog of rat thymosin beta 4 had a total length of 602 nucleotides coding for 44 amino acids. Comparison of the deduced amino acid sequences of bovine thymosin beta 4 gene with those of human, mouse and rat showed 93.1% similarity. The cDNA clone of bovine homolog of human myotrophin mRNA had a total length of 790 nucleotides coding for 118 amino acids. Comparison of the deduced amino acid sequences of bovine myotrophin gene with those of human, mouse and rat showed 83.9% similarity. The functional role of these clones in adipose tissues needs to be established.
마늘과 마늘의 황화합물은 여러 가지 미생물(그람양성 및 음성 세균, 곰팡이, 효모, 원생동물)의 번식을 저해하므로 마늘을 감염증치료에 쓰고자 하는 노력이 많았고 따라서 병원성 미생물에 대한 번식저해연구가 많이 수행되었다. 마늘에 의한 병원성 미생물의 번식저해작용을 연구한 대상 미생물 중에서 세균으로는 Staphylococcus aureus가 가장 많이 연구되었고 기타 많은 종류의 그람음성 및 앙성 병원성 세균이 연구대상이었다. 효모와 곰팡이를 통털어 Candide albicans의 번식저해 연구가 전체 진균류 연구의 대부분을 차지하였다. 특이하게 Giardia intestinalis에 대한 연구보고도 있었으며 마늘은 시험한 대부분의 미생물에 대해 강력한 천연 항균제로서 인정되었다. 마늘은 원래 가열하지 않은 생마늘이어야 알린이 alliinase 효소에 의해 분해되어 강력한 항균물질인 알리신을 생성하게 되므로 주로 생마늘의 항균작용연구가 주를 이루었다 알리신은 불안정하여 저장중에 분해되어 여러 가지 물질로 변화하게 되는 데 알리신이 분해되어 생성되는 ajoene이나 기타 여러 가지 sulfide류 역시 세균이나 효모에 매우 강력한 항균작용을 나타낸다. 마늘의 알리신이 나타내는 항균작용은 thiosulfinate기가 미생물의 대사에 중요한 역할을 하는 효소중에서 -SH 기를 가지는 효소단백질과 결합하여 불활성화시키기 때문에 결과적으로 미생물이 사멸하는 것으로 설명되고 있다. 하지만 이와 같은 일반적인 독성 메카니즘 이외에 특이한 효소에 특이하게 저해작용을 나타낸다는 가설이 있고 그 중에서도 지방산 합성에 관여하는 효소를 저해하기 때문이라는 의견이 많다. 최근에 식품의 조리 온도에서 가열한 마늘이 항균작용이 있는 것이 발견되었는데 그 작용은 주로 항진균작용이며 그 항균작용물질은 알린이 열분해 되어 생성되는 allyl alcohol인 것으로 보고되었다.
The time, yield, and related genes expression of PHB accumulation of Acidiphilium cryptum DX1-1 were investigated under four different initial C/N ratios, 1.2, 2.4, 7.5, and 24. The results of time and yield of poly-$\beta$-hydroxybutyrate (PHB) accumulation show that the initial C/N ratio of 2.4 was optimum for strain DX1-1 to accumulate PHB, but both higher and lower initial C/N ratios did not favor that process. Based on the genome of Acidiphilium cryptum JF-5, 13 PHB accumulation related genes in strain JF-5 were chosen and successfully cloned from strain DX1-1. The differential expressions of the 13 functional genes, in different C/N ratios as cited above, were then studied by real-time PCR. The results show that all the 13 genes were most upregulated when the initial C/N ratio was 2.4, and among which the gene Acry_3030 encoding poly-$\beta$-hydroxybutyrate polymerase and Aery_0626 encoding acetyl-CoA synthetase were much more upregulated than the other genes, which proved that they play the most important role for PHB accumulation, and acetate is the main initial substance for PHB accumulation for strain DX1-1. Potential regulatory motifs analysis showed that the genes related to PHB accumulation are regulated by different promoters and that the motif had weak similarity to the model promoters, suggesting that PHB metabolism in Acidiphilium cryptum may be mediated by a different mechanism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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