In Serratia marcescens, acetolactate produced by the catabolic acetolactate synthase (ALS) is converted into acetoin, its physiological role of which is to maintain intracellular pH homeostasis. In this study, the expression mode of catabolic ALS by aeration and branched-chain amino acids was examined by the ELISA method. The amount of catabolic ALS decreased approximately 93% under aerobic conditions. We also showed that the expression of catabolic ALS decreased approximately 34 % and 65 % in the presence of 2.5 mM and 10 mM leucine, respectively. The repression of catabolic ALS by leucine has not been reported previously. In contrast to leucine, catabolic ALS levels increased approximately 13% and 38% by treatment with 2.5 mM and 10 mM isoleucine, respectively, while valine alone did not have any significant effect on the synthesis of catabolic ALS. The amount of catabolic ALS was also reduced to approximately 32% and 45% in the presence of 10 mM Leu+Ile and Leu+Ile+Val, respectively. The regulatory mode of the Serratia catabolic ALS suggests that catabolic ALS may also have a role in supplying acetolactate as an intermediate of valine and leucine biosynthesis in addition to the maintenance of internal pH.
Eight strains of Aeromonas hydrophila isolated from diseased trout in Korea were characterized and compared with an American type strain by various methods including biochemical and physiological tests, PCR, randomly amplified polymorphic DNA (RAPD), plasmid profiling, and gel electrophoresis of total, membrane, and extracellular proteins. Virulence factors such as surface array proteins, cytotoxin, hemolysin, haemagglutinin, and protease were also investigated. The Korean strains showed heterogeneity in Iysine decarboxylase production, utilization of various carbon sources, and production of acetoin. Five strains had the same profiles of total and membrane proteins. Six strains haemagglutinated with trout red blood cells (RBCs) which was inhibited by fucose, galactose, and mannose, except for No. 1 where haemagglutination was inhibited by only galactose and mannose, but not by fucose. Four isolates haemagglutinated with human RBCs which was inhibited by fucose and mannose yet not by galactose. The type strain haemagglutinated only with trout RBCs which was inhibited by fucose, galactose, and mannose. Every isolate secreted protease, hemolysin, cytotoxin, and siderophore, but no enterotoxin. Results showed that the Korean isolates, except for No.7, had very different biochemical and molecular characteristics from those of the American type strain.
한국응용약물학회 1998년도 Proceedings of UNESCO-internetwork Cooperative Regional Seminar and Workshop on Bioassay Guided Isolation of Bioactive Substances from Natural Products and Microbial Products
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pp.171-171
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1998
The metabolic behavior of Debaryomyces hansenii was investigated in terms of substrate utilization and by product formation under different cultural conditions. Debaryomyces hansenii exhibited best growth and most tolerant of increased NaCl, sucrose and potassium sorbate at their optimum pH (5.0). A combination of two or more environmental stresses had stronger inhibitory effects on their growth kinetics, utilization of carbohydrate substrates and the production of organic acids, volatile compounds and other metabolites. Significant amounts of glycerol (0.35-4.4 g/L) and arabitol (0.08-9.8 g/L) were produced by D. hansenii. The main organic acids produced were citric (0.6-1.4 g/L), acetic (0.3-2.8 g/L), fumaric (0.2-1.0 g/L) and malic acids (1.1-1.7 g/L). A range of other compounds such as ethyl acetate, n-propanol, isoamyl alcohol, 2-phenylethanol and acetoin were also produced. The concentration of these compounds varied with the cultural conditions. Such compounds would have specific impacts on food quality in which D. hansenii is found.
Sixteen isolates showing relatively strong antagonicity against the ginger rhizome rot pathogen, Pythium zingiberum, were selected among the 155 isolates from ginger rhizome surfaces and rhizospheres of ginger cultivation fields in Wanju, Chonbuk. The isolate, 'HB 26-5'showing the strongest antagonicity was finally selected by testing duration of inhibition effect and pathogenicity to ginger. The isolated antagonistic microorganism, 'HB 26-5' was rod shape, gram positive and formed endospore. The isolate produced acids utilizing glucose, arabinose, xylose and mannitol, and acetoin at VP test, and grew anaerobically. Temperature range for growth was from 10 to 4$0^{\circ}C$ . Reaction to catalase and gelatin, hydrolysis were positive, and casein hydrolysis and indol production were negative. Based on the mycological characters and the fatty acid composition, it was identified as Bacillus polymyxa. The pathogenicity test of isolated Bacillus polymyxa 'HB 26-5'on 22 crop cultivars resulted that only the lettuce was influenced in germination, and the others were not affected.
The odor substances generated in a feed manufactory operating for the commercialization of animal-vegetable materials were analyzed and the odor reduction efficiency by a chemical scrubber was evaluated. The major causative substances in the feed manufactory comprised about 45.4% of ketone compounds and about 13.3% of aldehyde compounds. On the other hand, the removal efficiencies of diacetyl and acetoin as ketone compounds were 77.3% and 78.1%, respectively, by a chemical scrubber. Additionally, the removal efficiencies of acetaldehyde, butyraldehyde, valeraldehyde, 2-furancarboxaldehyde, and nonanal were 86.0%, 78.9%, 67.4%, 52.8%, and 71.9%, respectively. These rates were higher than the odor generation substance contribution rate as a result of treating the exhaust gas generated from the feed manufactory by the chemical scrubber using 5% of C3. It was also found that xylene, methylcyclopentane, benzene, ethylbenzene, 1,3,5-trimethylbenzene, and decane were almost not removed.
Milk protein concentrate (MPC) is widely used to enhance the stability and texture of fermented dairy products. However, most research has focused on yogurt products, and the effects of MPC on sour cream characteristics remain unknown. Therefore, we investigated the effects of different MPC levels (0%, 1%, 2%, and 3% w/w) on the rheological, physicochemical, microbiological, and aroma characteristics of sour creams in this study. We found that MPC supplementation stimulated the growth of lactic acid bacteria (LAB) in sour creams, resulting in higher acidity than that in the control sample due to the lactic acid produced by LAB. Three aroma compounds, acetaldehyde, diacetyl, and acetoin, were detected in all sour cream samples. All sour creams showed shear-thinning behavior (n=0.41-0.50), and the addition of MPC led to an increase in the rheological parameters (ηa,50, K, G', and G"). In particular, sour cream with 3% MPC showed the best elastic property owing to the interaction between denatured whey protein and caseins. In addition, these protein interactions resulted in the formation of a gel network, which enhanced the water-holding capacity and improved the whey separation. These findings revealed that MPC can be used as a supplementary protein to improve the rheological and physicochemical characteristics of sour cream.
식품의 안전성 평가를 위한 기초자료를 얻기 위하여, 식품의 가공, 저장 및 조리중에 식품성분간의 상호반응인 Maillard 반응을 이용하여 당의 분해로 생성되는 각종 카르보닐화합물을 강력한 돌연변이원성물질로 알려진 Trp-P-1, Trp-P-2, Glu-P-1, Glu-P-2 및 IQ에 각각 작용시켜서 이들 물질의 돌연변이성 억제효과를 연구 검토하였다. 그 결과, 카르보닐화합물에 의하여 돌연변이원성물질의 돌연변이원 활성이 크게 억제되었다. 사용한 카르보닐화합물중 ${\alpha}$-hydroxycarbonyl 화합물의 경우, glyceraldehyde, glycolaldehyde 및 dihydroxyacetone에서 돌연변이원성 억제효과가 크게 나타났다. ${\alpha}$-dicarbonyl 화합물의 경우, diacetyl에서 그 억제효과가 우수한 것으로 나타서, 전반적으로 ${\alpha}$-dicarbonyl 화합물이 ${\alpha}$-hydroxycarbonyl 화합물보다 돌연변이성 억제효과가 높게 나타났다. 한편, 공시한 카르보닐화합물 단독으로는 돌연변이 성을 나타내었으나, Trp-P-1등의 돌연변이원성물질과의 상호반응로 이들 두 물질의 돌연변이성이 동시에 소실되는 것이 입증되었다.
Addition of probiotics to yogurt with desired health benefits is gaining increasing attention. To further understand the effect of probiotic Lactobacillus plantarum on the quality and function of fermented milk, probiotic fermented milk (PFM) made with probiotic L. plantarum K25 and yogurt starter (L. delbrueckii ssp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus) was compared with the control fermented milk (FM) made with only the yogurt starter. The probiotic strain was shown to survive well with a viable count of 7.1 ± 0.1 log CFU/g in the PFM sample after 21 days of storage at 4℃. The strain was shown to promote formation of volatiles such as acetoin and 2,3-butanediol with milk fragrance, and it did not cause post-acidification during refrigerated storage. Metabolomics analysis by GC-MS datasets coupled with multivariate statistical analysis showed that addition of L. plantarum K25 increased formation of over 20 metabolites detected in fermented milk, among which γ-aminobutyric acid was the most prominent. Together with several other metabolites with relatively high levels in fermented milk such as glyceric acid, malic acid, succinic acid, glycine, alanine, ribose, and 1,3-dihydroxyacetone, they might play important roles in the probiotic function of L. plantarum K25. Further assay of the bioactivity of the PFM sample showed significant (p < 0.05) increase of ACE inhibitory activity from 22.3% at day 1 to 49.3% at day 21 of the refrigerated storage. Therefore, probiotic L. plantarum K25 could be explored for potential application in functional dairy products.
제주지역 양식 넙치의 주요 세균성 질병의 일종인 연쇄구균증 원인균 Streptococcus iniae 및 Streptococcus parauberis에 대한 생물학적 특성을 시험하였다.온도별 성장 시험결과 S. parauberis 균주는 10℃ 배양조건에서 성장이 이루어졌으나 S. iniae 균주의 경우는 10℃에서는 성장이 확인되지 않았으며, 용혈성 시험결과에서는 S. iniae 균주의 경우에만 β용혈성을 나타내었다.생화학적특성 시험결과 acetoin production test (VP test), hippurate hydrolysis test (HIP test)에서는 S. parauberis 균주의 경우에만 양성반응을 보여 두 균주사이에 뚜렷한 차이를 보였다.또한 α-D-glucose, D-mannose, D-psicose, D-trehalose, pyruvatic acid methyl ester, glycerol은 두 균주 모두 기질로 이용하였으나 L-lactic acid는 S. iniae 균주만이 이용하였고, β-methyl-D-glucoside의 경우는 S. parauberis 균주만이 기질로 이용하는 것으로 나타났다.병원성 시험결과, S. iniae는 급성감염 형태를 보인 반면에 S. parauberis는 만성 감염형태를 보임으로써 차이를 나타내었다.
The stringent response (SR) is characterized as a bacterial defense mechanism in response to various growth-inhibiting stresses. It is activated by accumulation of a small nucleotide regulator, (p)ppGpp, and induces global changes in bacterial transcription and translation. Recent work from our group has shown that (p)ppGpp plays a critical role in virulence and survival in Vibrio cholerae. The genes, relA and relV, are involved in the production of (p)ppGpp, while the spoT gene encodes an enzyme that hydrolyzes it in V. cholerae. A mutant strain defective in (p)ppGpp production (i.e. ${\Delta}relA{\Delta}relV{\Delta}spoT$ mutant) lost the ability to produce cholera toxin (CT) and lost their viability due to uncontrolled production of organic acids, when grown with extra glucose. In contrast, the ${\Delta}relA{\Delta}spoT$ mutant, a (p)ppGpp overproducer strain, produced enhanced level of CT and exhibited better growth in glucose supplemented media via glucose metabolic switch from organic fermentation to acetoin, a neutral fermentation end product, fermentation. These findings indicates that (p)ppGpp, in addition to its well-known role as a SR mediator, positively regulates CT production and maintenance of growth fitness in V. cholerae. This implicates SR as a promising drug target, inhibition of which may possibly downregulate V. cholerae virulence and survival fitness. Therefore, we screened a chemical library and identified a compound that induces medium acidification (termed iMAC) and thereby loss of wild type V. cholerae viability under glucose-rich conditions. Further, we present a potential mechanism by which the compound inhibits (p)ppGpp accumulation. Together, these results indicate that iMAC treatment causes V. cholerae cells to produce significantly less (p)ppGpp, an important regulator of the bacterial virulence and survival response, and further suggesting that it has a therapeutic potential to be developed as a novel antibacterial agent against cholera.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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