Alternaria spp.were predominantly isolated from the abnormal leaf spot lesions of pear cultivars Niitaka and Nijiiseiki. Alternaria isolates from the cultivar Niitaka were not pathogenic to both cultivars, but the isolates from the cultivar Nijiiseiki developed typical lesions of black leaf spots and were identified as A. kikuchiana. However, no typical abnormal leaf spot lesions were produced by the Alternaria isolates. Foliar spray of twelve different agrochemicals including lime sulfur, either alone or in combinations, with 7 times applications from April to July failed to reduced the disease development. Application of 17 different pesticides including fungicides, insecticides and herbicides currently used in pear orchards did not cause leaf injury similar to the abnormal leaf spot. Simulated acid rain of as low as pH 3.0 did not incite any leaf lesions alike the abnormal spot lesions. Mineral contents in the leaves of both cultivars did not differ significantly between the healthy leaves and those with abnormal leaf spots. When cuttings of pear tree were obtained in February from newly emerged twigs of the healthy or the diseased trees of Niitaka and planted in sand in the greenhouse, only those from the diseased trees developed typical leaf lesions of the abnormal spot. These results indicate that abnormal leaf spots are caused by unknown systemic agents in pear trees, rather than by Alternaria spp., chemical injury or acid rain.
Nature of graft transmissibility of pear abnormal leaf spot disease was examined by various grafting methods in the greenhouse and field. When the diseased and symptomless twigs were collected in winter and grafted in the next spring to the seed-originated healthy root stock, the abnormal leaf spot was developed only in the case of the diseased twigs. Double grafting on a seed-originated healthy root stock, where the diseased and the symptomless twigs were used as 1st and 2nd scions, respectively, developed abnormal leaf spot lesions without exception on the 2nd scions. Tongue-graft with the diseased and the symptomless trees also incited abnormal leaf spots on the both trees. Abnormal leaf spots of were also developed on HN-39, an indicator pear tree, used as a 2nd scion in a double graft test, where the diseased twig and a seed-originated healthy tree were used as the 1st scion and the root stock, respectively. When the diseased twig was top-grafted to the healthy root stock, lesion development of abnormal spot was limited to the grafted twig itself in the 1st year, but expanded to the main branches in the 2nd year, and spread over the whole tree in the 3rd year. This result indicates that the causal agent of abnormal leaf spot disease is transmitted by graft.
배나무잎 이상반점증상의 이병여부를 조기에 판별할 수 있는 가장 간편한 검정방법을 개발코자 시험하였다. 접목시기는 늦어질수록 병징발현율이 감소하였다. 접목방법은 2중절접, 2중삭아절접 순으로 양호하였으나 숙련된 기술이 필요한 이중절접방법보다 간편한 2중삭아절접 방법이 대량검정에 적합하였다. 이상반점증상의 전염에 필요한 최소 접촉시간은 1일 이상이었고 칼루스가 형성되어 접목부위가 활착된 21일 이후에서 발병이 가장 높았다.
A new unidentified pear leaf spot disease presumed to first occur in the late 1970's has recently become prevalent over the pear growing areas, and caused the greatest problem for pear production in Korea. The disease began to develop on pear leaves at mid- to late May, peaked at mid- to late une, but stopped further development until September in cool climate. Leaf lesions are 0.9∼2.5 mm in diam., oval or irregular to rectangular in shape, first appeared reddish purple, later changed to dark brown, and to whitish grey in the late season. Lesions were limited to appear only on the mature, hardened leaves, initially from leaf margin or near the leaf veins, and later scattered over the leaf surface. Individual lesions usually did not enlarge, but often coalesced each other, commonly causing shot holes and eventual early falling. The disease was most severe on the major pear cultivars Niitaka and Okusankichi ranged with 4 to 100% infections in trees, depending on the orchards, but not on the cultivar Chojuro. Damages from the disease included lower fruit weight, and higher acid and less sugar content in fruits, resulting in lowering the overall fruit quality. Etiology of the disease including identification of the causal organism is in a separate paper.
배나무잎 이상반점증상의 보독여부를 신속정확하게 검정할 수 있는 목본 지표식물을 선발하기 위해 시험을 수행하였다. 신고x조생적 등 5개 교배조합 102개체를 공시해서 1차로 10개체를 선발하였다. 1차로 선발된 개체중에서 전형적인 이상반점증상이 조기에 잘 나타나고 이상반점증상과 유사한 검은무늬병에 저항성인 신고$\times$조생적 86-2-2 계통을 최종선발하였다. 선발된 지표식물을 사용하여 농가포장에서 이상반점 증상의 보독여부를 실증시험한 결과 보독유무의 조기판별이 가능하였다. 이상의 결과에서 최종 선발된 신고$\times$조생적 86-2-2계통을 PS-95로 명명하고자 한다.
배나무잎 이상반점증상의 발병환경 조건을 조사하고자 실험한 결과 주간 23$^{\circ}C$, 야간 18$^{\circ}C$ 온도조건에서 병징발현이 가장 심하였고 이보다 높은 온도인 28/23$^{\circ}C$와 낮은 온도인 18/13$^{\circ}C$에서는 발병이 아주 적었다. 배나무잎에 봉지를 피복하면 발병이 전혀 없거나 극히 저조하였다. 이것은 봉지내의 온도가 최고 46.8$^{\circ}C$까지 올라가 고온에 의하여 발병이 억제된 것으로 생각된다. 이병주 토양과 건전주 토양의 화학성을 조사한 결과 이병주 토양에서는 건전주 토양보다 유효인산량이 많게 나타났다. 토양수분이 많거나 적었을 때는 병징발현이 다소 늦어지기는 하나 최종 조사시 발병정도는 큰 차이를 나타내지 않았다.
2016년 5월, 우리나라 복숭아의 주요산지인 경북 영천 지역에서 퇴록, 괴저반점, 엽맥퇴록, 황화와 같은 바이러스 병징과 이상증상을 보이는 복숭아 잎 24점을 채집하였다. 이 시료들의 바이러스 감염 여부를 확인하기 위해 RT-PCR 진단법을 이용하여 진단하였다. 진단 대상은 검역 병원체로 지정된 바이러스 또는 바이로이드를 중심으로, 국내외 연구를 참고하여 국내 발생가능성이 높거나 발생 시 위험도가 높은 종 17종이다. 진단결과, 국내에서 보고된 적이 없는 바이러스 1종(Apricot pseudo-chlorotic leaf spot virus, APCLSV)과 검역 바이로이드 1종(Peach latent mosaic viroid, PLMVd)을 포함하여, 총 7종의 바이러스와 바이로이드가 검출되었다. 바이러스를 동정하기 위해, RT-PCR 산물을 sequencing 하여 확인하였다. 또, 국내 미보고 종인 APCLSV가 검출된 시료를 이용하여 APCLSV의 외피단백질을 암호화하고 있는 염기서열을 증폭하여 결정하였다. 결정된 염기서열은 기 보고된 APCLSV 분리주와 97%의 상동성을 보였다. 이 외피단백질 염기서열을 Trichovirus속 바이러스들과 비교 분석하여, 최종적으로 APCLSV임을 확인하였다. 동정된 APCLSV를 Yeongcheon 분리주로 명명하고 결정된 외피단백질 염기서열은 NCBI GenBank에 등록하였다. APCLSV의 발생 양상을 보면, APCLSV가 검출된 시료들은 모두 Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV)가 복합감염되어 있었으며, APCLSV는 ACLSV와 유전학적 유연관계가 가까운 것으로 알려져 있다. ACLSV의 특성에 비추어 볼 때, APCLSV는 국내 과수 농가에 널리 퍼질 가능성이 높을 것으로 생각된다. 따라서, 추후 국내 농가에 미칠 영향 등에 관련된 연구가 필요하다.
배나무잎 검은점병에 이병된 신고와 지표식물 PS-95의 잎을 전자현미경으로 세포내 미세구조를 검경한 결과 굴곡성 사상형 유사바이러스 입자가 집단으로 존재하고 있는 것을 확인하였다. 엽육유세포질에 있는 유사바이러스 입자들의 직경은 12 nm였으나 입자들의 길이는 측정하지 못하였다. 섬유사를 함유하고 있는 소포는 일반적으로 ssRNA genome을 갖는 식물바이러스에 의해 이병된 세포에서 생성된다. 본 연구에서 이 소포들은 tonoplast에 형성되었다. 배나무잎 검정점병의 이병잎을 초본 지표식물에 즙액접종하였으나 어떠한 병징도 나타나지 않았다. 또한 접목접종 전염에 의하여 전염되어 전형적인 검은점이 발병하였다. 발병된 잎에는 유사바이러스 입자가 존재하고 있었다. 이상의 결과 병징, 섬유사를 함유한 소포의 존재, 그리고 접목전염을 기초로하여 볼 때 배나무 검은점병을 일으키는 유사바이러스 입자는 closteroviruses의 하나로 생각된다.
본시험은 사탕무우 GW 359를 공시하여 고령지인 대관령에 4월 24일, 중부평야지인 수원에 4월 1일, 최남단인 제주도에 6월 21일 파종하여 지역별 생육과정을 조사하였다. 1) 대관령은 7월 15일까지가 초기생육기로 비교적 길고 8월 15일에서 9월 15일까지가 생육최성기로 갈반병의 피해도 적었고 9월 15일 이후가 등열기로 평등엽생활일수가 110일 이내로 지상부 및 근부 생육곡선이 정상적이나 초기생육기간을 단축하고 등열기로 기온급강을 해소할 수 있는 조열품종의 도입 및 육성이 필요하다. 2) 수원은 생육최성기까지의 지상부 생육은 양호하나 7월말부터 갈반병이 발생하여 엽위 25∼35까지의 엽은 대부분 고사하였다가 10월초부터 재생하므로 이로 인하여 근중당분도 하강하다가 10월중순에 다시 상승하였다. 근중은 이와는 달리 7월부터 수확기까지 계속 증가하나 비정상적인 생육곡선을 보이고 있어 재배 부적지로 본다. 3) 제주는 초기생육기가 8월말까지로 대관령에 비하여 약 15일 단축되며 생육최성기는 9월초부터 10말까지로 보며 11월초부터는 비교적 장기간의 등열기에 속하므로써 당분축적에 유리하며 전반적인 생육곡선이 정상적이나 추동작재배시의 내추태성품종의 도입과 육성이 필요할 것으로 본다. 4) 이상의 종합적인 성적으로 보아 수원은 사탕무우재배에 많은 기상적 장해가 있으나 대관령과 같은 해발 600∼800m의 지역에는 춘작형, 제주도는 추동작형으로서 경제적재배가 가능할 것으로 본다.
4주 배양된 애기장대의 엽육조직으로부터 원형질체를 분리하여 2.0mg/L NAA, 0.5mg/L BAP및 9% mannitol이 포함된 MS 액체배지에서 $25^{\circ}C$, 암조건에서 배양하였다. 원형질체 유래 microcolonies를 dehydration시켜 배양하였을 때 non-dehydration에 비해 7배의 높은 캘러스 유도율을 나타내었다. Dehydrated microcolonies들 중에서 50개의 캘러스를 선별하여 0.05 mg/L NAA, 7mg/L 2-iP가 첨가된 MS배지에서 광조건으로 배양하였을 때 점차적으로 녹화되기 시작하였으며 배양 4주 후부터 전체적으로 녹화된 SF캘러스에서 green spots이 형성되었다 Shoot형성률은 식물생장조절물질의 종류에 따라 3.5%~56%로 나타났다. 재분화된 shoot는 식물생장조절물질이 첨가되지 않은 MS배지에서 뿌리를 유도하였으며 이들을 토양에 이식하여 완전한 재분화 식물체를 얻을 수 있었다. Shoot 형성과정을 조직학적인 측면에서 관찰한 결과, 배양초기에는 신장된 무정형의 세포가 대부분이었으나 배양이 진전됨에 따라 주위 세포들과 구별이 뚜렷한 도관요소 (tracheary element)와 분열조직군 (meristemoid)이 형성되면서 shoot primodia가 shoot로 발달되는 것을 관찰할 수 있었다. 재분화 식물체는 형태적으로 normal type이 78%이고 abnormal type이 22%였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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