Thirty-day-old piglets were intranasally or subcutaneously inoculated with 2ml of Aujeszky's disease virus, NYJ-1 strain, at the titer of $10^{6.75}$$TCID_{50}/0.1ml$, that was isolated from the diseased piglets in Korea, and histopathological studies were performed to elucidate the pathognomonic characters of the isolate. Results obtained through the experiments were as follows: 1. Major clinical signs on the 2nd and 3rd days post inoculation (p.i.) were fever, anorexia and dyspnea. On the 6th and 7th days p.i., nervous signs, severe dyspnea and salivation were observed in the group of intranasal inoculation, and one out of 3 piglets in this group died on the 7th day p.i.. General signs were more severe in the group of intranasal inoculation than the group of subcntaneous injection. Between the 8th and l0th days p.i., the signs subsided and the piglets were completely recovered from the illness. 2. Hematologically, most of the inoculated pigs showed a mild lymphocytopenia on the 5th and 6th days p.i.. 3. By necropsy, swelling and hemorrhagic lesions were observed in tonsil, central nervous system and lung. No specific changes were grossly found in other parenchymatous organs. 4. In histopathological study, degeneration and necrosis of nervous cells, non-suppurative meningoencephalitis, diffuse or focal gliosis, perivascular cutting and degeneration of ganglion cells were observed in central nervous system, and swelling and hemorrhagic changes were shown in the tissues of liver, lung and lymph nodes. 5. By indirect immunofluorescence antibody assay using ADV-monoclonal antibody, specific ADV antigens were detected in the tissues of tonsil, brain and spleen of the succumbed piglet. However, in the experimentally slaughtered piglets, the specific reactions were noted only in the tonsils.
To evaluate the effects of Zoletil (tiletamine- zolazepam) that have been widely used for the chemical restraint and anesthesia of primates, on physiologic alteration, blood gas analysis and anesthetic duration in the Japanese macaque(Macaca fuscata), this study was carried out. Zoletil was administered by intramuscular injection. Evaluation of temperature, heart rate, respiration rate and blood gas analysis were performed before administration and at 1, 10, 20, 30, 40, 50 and 60 min after administration, and induction and maintenance time was recorded. There was no significant difference in heart rate, $PCO_2$, $PO_2$ after Zoletil administration rut temperature, respiraticn rate, pH were significant difference compared with these of Mere administration. The induction time was $2.5{\pm}1.0min$ and maintenance time was $86{\pm}23.2min$. It was considered that Zoletil could be usefully used for the sedation and immobilization of Japanese macaque reared in zoological garden.
In this study, we applied biodegradable drug delivery carries (BDDC) for food-and-mouth (FMD) vaccination. After FMD vaccination using BDDC, we estimated the percentage inhibition (PI) of antibody, decomposed patterns, and histopathologic features of BDDC. PI of antibody was higher than 50 at two weeks after injection and sustained positive PI until 10 weeks after injection. BBDC injection group showed significantly an increased pattern of blood monocyte at two and three weeks after injection. According to the Micro CT, micro-cracks were observed at two weeks after injection and the morphology of BDDC was lost at four weeks after injection. For histopathological examination, acute inflammation with neutrophil infiltration and micro-metallic residues were observed around BDDC until four weeks after injection and inflammatory responses gradually decreased at 10 weeks. Based on our experiment, BDDC is considered as an alternative way to vaccine injection for veterinary applications. Our study can be used as basic data for the drug delivery system using biodegradable metals in the future.
Park, Min Hee;Park, Ji Eun;Kim, Min Seong;Lee, Kwon Young;Hwang, Jae Yeon;Yun, Jung Im;Choi, Jung Hoon;Lee, Eunsong;Lee, Seung Tae
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권10호
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pp.1398-1406
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2016
In general, the seminiferous tubule basement membrane (STBM), comprising laminin, collagen IV, perlecan, and entactin, plays an important role in self-renewal and spermatogenesis of spermatogonial stem cells (SSCs) in the testis. However, among the diverse extracellular matrix (ECM) proteins constituting the STBM, the mechanism by which each regulates SSC fate has yet to be revealed. Accordingly, we investigated the effects of various ECM proteins on the maintenance of the undifferentiated state of SSCs in pigs. First, an extracellular signaling-free culture system was optimized, and alkaline phosphatase (AP) activity and transcriptional regulation of SSC-specific genes were analyzed in porcine SSCs (pSSCs) cultured for 1, 3, and 5 days on non-, laminin- and collagen IV-coated Petri dishes in the optimized culture system. The microenvironment consisting of glial cell-derived neurotrophic factor (GDNF)-supplemented mouse embryonic stem cell culture medium (mESCCM) (GDNF-mESCCM) demonstrated the highest efficiency in the maintenance of AP activity. Moreover, under the established extracellular signaling-free microenvironment, effective maintenance of AP activity and SSC-specific gene expression was detected in pSSCs experiencing laminin-derived signaling. From these results, we believe that laminin can serve as an extracellular niche factor required for the in vitro maintenance of undifferentiated pSSCs in the establishment of the pSSC culture system.
For evaluating the boar semen quality, sperm motility (MOT) is an important parameter because the movement of spermatozoa indicates active metabolism, membrane integrity and fertilizing capacity. Estrogen receptors 2(ESR2) is involved in estrogen related apoptosis in cell cycle spermatogenesis, but their functions have not been confirmed in pig until now. Therefore, this study was conducted to analyze their association with sperm motility and kinematic characteristics. DNA samples from 105 Duroc pigs with records of semen motility and kinematic characteristics [Total motile spermatozoa (MOT), Curvilinear velocity(VCL), Straight-line velocity(VSL), the ratio between VSL and VCL(LIN), Amplitude of Lateral Head displacement(ALH)] were analyzed. A SNP in coding region of ESR2 g.35547A > G in exon 5 was associated with MOT (p < 0.05) in Duroc population. Therefore, we suggest that the porcine ESR2 gene may be used as a molecular marker for Duroc boar semen quality, although its functional effects were not defined yet. These results might shed new light on the roles of ESR2 in spermatogenesis as candidate gene for boar fertility, but still the lack of association across populations should be considered.
Jeong, Yong Dae;Lee, Suhyup;Kim, Doo Wan;Kim, Yong Min;Min, Ye Jin;Yu, Dong Jo;Kim, Young Hwa
농업과학연구
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제44권4호
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pp.519-524
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2017
The present study investigated the impacts of mating age of gilts (A1, < 230 days; A2, 230 - 249 days and A3, $250{\leq}days$) on reproductive performance and litter size of sows at farrowing to weaning. A total of 102 crossbred gilts ($Yorkshire{\times}Landrace$; average days old, 90 days) were purchased from a commercial breeding company. After identification of third estrus, the gilts were artificially inseminated using semen of Duroc boars. Pregnant pigs were allotted to one of three groups including A1, A2, and A3. Experimental diets and water were fed ad libitum during each experimental period which included the first, second, and third parities. Backfat thickness (BFT) of sows was higher in A3 at farrowing in the first parity than in others. At weaning time in the second parity, sows in A3 group showed a numerically higher BFT than those in A1. There was no effect of mating age on the total number of piglets born and total weaned piglets. There was a tendency to decrease the wean-to estrus-interval in the first parity as age increased at mating. Results obtained in the present study indicate that the first mating age does not affect the subsequent parites' reproductive performance; however, weaned to estrus interval tended to decrease in A2 at the first parity.
본 연구는 Lightcycler (Roche)를 이용한 Real-Time PCR(LC-PCR)기법을 통하여 원유시료에서 신속, 정확하게 황색포도상구균을 검출하는 기법을 개발하고자 하였다. coagulase 전구체를 coding하는 113 bp의 coa 유전자의 증폭, melting curve 분석 및 DNA염기서열을 분석하여 황색포도상구균 특유의 유전자 검출하는 기법을 개발하였다. 또한 분리된 균주중 메치실린에 내성을 나타내는 균주를 검출하고자 penicillin-binding protein, PBP2a (mecA)를 coding 하는 209 bp의 mecA 유전자의 증폭, melting curve 분석 및 DNA염기서열을 분석하여 메치실린내성 황색 포도상구균을 real-time PCR 기법으로 검출하는 기술을 개발하였다. 본 실험에 따르면 647개의 원유시료중 6개의 시료에서 황색포도상구균이 검출되었으며 이중 2개의 시료에서 분리된 황생포도상구균이 메치실린내성 황색포도상구균임을 확인하였다. 또한 DNA 검출한계는 10 fg으로 기존 PCR에 비해 매우 감도가 우수한 것을 확인하였다. 또한 3개의 원유시료에서 돼지나 소의 삼출성 피부염의 원인균인 Staphylococcus chromogenes가 분리되었다.
This study was performed to examine the antigenic potential of purified bee venom (Apis mellifera L., PBV) collected using bee venom collector. Antigenic potential of PBV was examined by active systemic anaphylaxis (ASA) in guinea pigs. PBV was subcutaneously administered at 0.025 and 0.05 mg/kg and also as a suspension with adjuvant (Freund's complete adjuvant, FCA). Ovalbumin (OVA) as a suspension with adjuvant was used to introduce positive control response. In the weight measurement and clinical observation, experimental groups didn't show any significant changes compared with control group. In the autopsy of body, the abnormalities of lung were detected only in the positive control. In the ASA test, experimental groups didn't show any symptoms of anaphylaxis like piloerection, hyperpnea and staggering gait. These results suggested that PBV didn't have antigenic potential in guinea pig.
Lee, Jun Beom;Bae, Sung Min;Shin, Tae Young;Woo, Soo Dong
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제30권2호
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pp.50-57
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2015
Porcine circovirus type 2 (PCV2) is an important infectious swine virus causing postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). PCV2 capsid protein, encoded by ORF2 has type-specific epitopes, is very immunogenic, and is associated with the induction of neutralizing antibodies. For the efficient production of capsid protein, recombinant Autographa californica nucleopolyhedroviruses were generated to express ORF2 fused with two forms of a partial polyhedrin. Recombinant capsid protein was produced successfully with the partial polyhedrin fusion form and the yield was high, as was shown by SDS-PAGE. Production of recombinant capsid proteins in insect cells was confirmed by Western blot analysis using anti-His monoclonal antibody, anti-ORF2 monoclonal antibody, and anti-PCV2 porcine serum. Fusion expression with amino acids 19 to 110 of the polyhedrin increased the production of recombinant capsid protein, but fusion with amino acids 32 to 85 did not. Additionally, PCV2 capsid protein is a glycoprotein; however, the glycosylation of recombinant protein was not observed. The results of an Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed that recombinant capsid proteins could be utilized as antigens for fast, large-scale diagnosis of PCV2-infected pigs. Our results suggest that the fusion expression of partial polyhedrin is able to increase the production of recombinant PCV2 capsid protein in insect cells.
To establish more specific and simple diagnostic methods for detection of the antibodies and antigens of Aujeszky's disease virus(ADV), we designed indirect dot-immunoassay(IDI) and double sandwich dotimmunoassay(DSDI) using the solid phases of nitrocellolose paper and polystyrene plate. The diagnostic efficacy of these methods was investigated. As the sensitivity of IDI was tested by various virus concentration, the specimens with the virus titer above $10^{4.0}TCID_{50}/0.2ml$ showed positive reaction, but that below $10^{1.0}TCID_{50}/ml$ revealed negative. Tonsil emulsion at the virus titer of $10^{4.5}TCID_{50}/0.2ml$ showed the highest sensitivity as diluted by 1/100. In detection of ADV antigens from the various tissues of the rats and pigs infected with ADV, IDI using monoclonal antibody showed the higher specificity as compared with IDI using polyclonal antibody and virus isolation method. The efficacy of the DSDI for detection of ADV antibody was compared with other tests. The sensitivity of DSDI was higher than virus neutralization(VN) and agar gel immunodiffusion test(AGID). Meanwhile, specificity of DSDI was lower than AGID, but similar to IDEA. In comparison with VN test, DSDI showed 96.9% agreement to VN test that is the highest of three tests. In general, application of polyclonal antibody in both tests caused the higher sensitivity but the lower specificty.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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