Fermented feed using rice, barley, wheat, and defatted rice brans as the raw materials were prepared by 3 species of wild yeasts which were selected among 35 strains of yeasts isolated, and their analytical values were examined. The results were as follows : 1. The three yeasts were identified as H.amomala var. anomala (No.225), Candida utilis (No.400), and Irpex-cellulase(consors) (no.403-A). 2. The optimum pH, and sugar concentration of these yeasts in liquid culture were pH 5.0 and Bllg. 10.deg. each. The optimum temperature was 30.deg.C for No.225 and No.403-A, 25.deg.C for No.400. The No.225 and No.403-A grow at higher temperature than 37.deg.C and 40.deg.C each. 3. The No.225 yeast had a large vegetative cell and strong sugar fermentability. The No.225 and 403-A could assimilate cellobiose, xylose, $KNO_2$ and $KNO_3$. These properties were fit for bran fermentation. 4. The No.403-A microorganism was a yeast-like microbe and showed cellulase activity which might help the propagation of other yeasts on the brans. 5. The analytical data of fermented feed indicated the following order of usable value ; rice-wheat-barley bran 4:4:2, rice-wheat bran 5:5, rice-barley bran 5:5, rice-defatted rice bran 5:5. 6. the fermented feed were prepared by mixing brans, 0.3% ammonium sulfate and 5%(w/w) inoculum of yeast suspension in 4% glucose solution. Water content 70-80%, fermentation temperature 25-30.deg.C, and fermentation time 2-3 days were given. 7. The rice-wheat bran 5:5 and rice-barley bran 5:5 fermented feed showed 11, 17-11.45% protein increase, and the rice-barley-wheat bran 4:4:2 and rice-defatted bran 5:5 showed 3.75-6.03% protein increase. 8. The fermented feed prepared in this experiment by the author might work as a nutritive feed using microbial cell body, enzymes produced by microbes and other microbial cell constituents.
To find antitumor components with low toxicity in the Basidiomycetes of Korea, the carpophores of Flammulina velutipes (Fr.) Singer were extracted with hot water for eight hours. The extract was purified by dialyzing through Visking tube and a protein-bound polysaccharide fraction was obtained as pale brownish amorphous powder after freeze-drying. The fraction was examined for antitumor activity against sarcoma 180 implanted subcutaneously in the left groin in ICR mice. The inhibition ratio of this fraction against the tumor was 62.3% at the dose of 10mg/kg/day for the period of ten days. The tumors in three of the ten treated mice were completely regressed. The chemical analysis of the antitumor component by anthrone and Lowry-Folin methods showed that it consisted of a polysaccharide (42.4%) and a protein (24.5%). The hydrolysis of the polysaccharide moiety with 3% HCl-MeOH and trimethysilylation of the hydrolyzate yielded five monosaccharides which were identified by G.L.C. Several amino acids were identified by an amino acid autoanalyzer in the acid hydrolyzate of the protein moiety.
Jung, Ji-Young;Hong, Seong-Cheol;Rinker, Danny Lee;Choi, Myung-Suk;Lee, Byung-Hyun;Yang, Jae-Kyung
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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v.38
no.2
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pp.124-134
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2010
This study was performed to evaluate the efficiency of using softwood as the sawdust medium for Lentinula edodes cultivation, effect of nutrient on the mycelial growth, spawning, the mushroom yield, and quality. The nitrogen nutrition significantly enhanced the mycelial growth of L. edodes. The glutamic acid in the L. leptolepis and P. koraiensis, and asparagine in the P. densiflora were appeared to slight increase in the mycelial growth. The vegetable oil showed very effective on the mycelial growth in the P. koraiensis sawdust medium. Carbon/nitrogen ratio of all the test was reduced after mycelial growth. The mycelial growth was exclusively dependent on reduction of carbon. The mushroom yield (32.7%) of the P. densiflora sawdust medium (carbon source: 3% active carbon, nitrogen source: 0.4% asparagines) was the best in mushroom production of L. edodes, followed by the Q. variabilis sawdust (35.4%) of the control medium. The diameter of mushroom cap was obtained from the P. densiflora sawdust (carbon source: 3% sucrose, nitrogen source: 0.4% potassium nitrate) and P. koraiensis sawdust (carbon source: 3% sucrose, nitrogen source: 0.4% potassium nitrate), and the P. koraiensis sawdust (carbon source: 3% xylose, nitrogen source: 0.4% glutamic acid, supplement: 0.05% amino acid), with values 71.5 mm, 71.5 mm and 72.1 mm, respectively. In the polypropylene bag cultivation, the weight losses of the block medium gradually increased for 80 days in the dark (13.8~16.8%) and then became stable in the range of 20.7~25.8%.
Kim, Byung-Hong;Lee, Jung-Yoon;Bae, Moo;Kim, Sung-Ki
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.9
no.2
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pp.65-69
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1981
As a process to utilize agricultural residues, simultaneous hydrolysis-fermentation (SSF) was compared with fermentation of enzymic hydrolyzate using koji cultures of Trichoderma sp. KI 7-2 and a thermotolerant yeast Saccharomyces cerevisiae NCYC 716. Cellobiose was not detected in SSF broth whilst 15 mg/$m\ell$ of the disaccharide was found in enzymic hydrolysate of rice straw using the same enzyme source. It was found that converting glucose to ethanol in SSF process reactivated the cellobiase activity, which is inhibited by the accumulation of glucose in enzymic hydrolysis process. Cutting milled rice straw was fermented as effectively as ball milled one in SSF process. From tile results discussions are made on the product inhibition mechanism of cllulolytic enzyme system.
The xylanase producing microorganisms occurring on rotten woods were selectively isolated on the modified Czapek-Dox medium supplemented with 0.5% xylan as a sole carbon source. Among more than three-hundred isolates of xylanase producing microorganisms, only two bacterial isolates were turned out to be more potent xylanase producer than the reference strain of xylanase producer, Aureobaszdium pullulans NRRL Y-2311. The exo-xylanase producer, bacterial isolate No. 33 was identified as a strain of Pseudomonas sp. on the basis of morphological and biochemical characterizations as well as cellular fatty acid composition. Optima of pH and of temperature for enzyme reactions of xylanase were 5.5 and $50^{\circ}C$ respectively. The enzyme was stable in a range of pH 5.0~7.0 and below $45^{\circ}C$. Among the number of carbohydrate substrates, xylose was turned out to be a potent inducer of Pseudomonas sp. No.33 exo-xylanase. Among the raw materials tested, rice straw was the best material for xylanase production by Pseudomonas sp. strain No. 33.
To characterize thermo-chemical feature of sugar conversion of woody biomass, poplar wood ($Populus\;alba{\times}glandulosa$) powder was treated with supercritical water system. Supercritical water treatment (SCWT) was performed for 60 seconds at different temperatures (subcritical zone 350; supercritical zone $300,\;400,\;425^{\circ}C$) under two pressures $230{\pm}10atm$ as well as $330{\pm}10atm$, respectively, using flow type system. After separation of solid residues from SCWT products, the monomeric sugars in aqueous part converted from poplar wood powder were quantitatively determined by high performance anionic exchange chromatography [HPAEC] equipped with PAD detector and Carbo Pac PA10 column. As the temperature treated increased, the degradation of poplar wood powder was enhanced and ca 83% of woody biomass was dissolved into the water at $425^{\circ}C$. However, the pressure didn't help the degradation of biomass components. At subcritical temperature range, xylose was first formed by degradation of xylan, which is main hemicellulose component in hardwood species, while cellulose degradation started at the transition zone between sub and supercritical conditions and was remarkably accelerated at the supercritical temperature. In the supercritical water system the maximum yield of monomeric sugars amounts to ca. 7.3% based on oven dried wood weight at $425^{\circ}C$.
The use of renewable energy sources is becoming increasingly necessary to minimize the problems derived from the global warming impacts caused by the utilization of fossil fuels as well as their limited supply and reservoir. Also, localized heavy rain has occurred in many areas. As a result, suspended wood waste is being inflow into the dam and the problem of waste disposal has occurred. It is a unique renewable and alternative source for the production of energy. The experiment using wood waste (dry weight 25.0g) was conducted for extraction sugars such as xylose, lactose and glucose. For the sugar extraction from wood waste, hydrolysis experiment using wood waste was conducted by two steps. First step was reacted with 72% sulfuric acid (24.0N and 37.5 ml) for 1hr at $30^{\circ}C$ and second step was reacted at $105^{\circ}C$ for one hour after adding 2.45times of hot water. Extracted sugar was used in the experiment of sugar consumption to estimate feasibility of ethanol production using yeast(P. Stipitis and S cerevisiae). As a result, sugar extracted from wood waste was effective consumed by yeast(P. Stipitis and S cerevisiae). The consumption rate by yeast was S. cerevisiae was faster than that of P. stipitis. It can be confirmed that resource as ethanol production using wood waste was available.
세계적인 자원고갈과 지구온난화와 같은 환경문제가 발생됨에 따라 대체에너지 개발에 대한 연구가 활발히 이루어지고 있다. 섬유소 기질을 이용한 바이오에탄올 생산은 세계적으로 막대한 자원이 있으며 광합성에 의해 재생산되는 무한한 재원으로서 환경적으로도 대기오염물질을 적게 배출하여 유용한 에너지원으로 각광받고 있다. 하지만 섬유소 기질은 cellulose, hemicellulose, lignin과 같은 고분자 화합물이 유기적으로 결합된 단단한 결정구조로 이루어져 있어 이를 분해하여 원하는 물질을 얻기 위해서는 전처리 과정이 필요하다. 전처리 공정은 바이오에탄올을 생산하는 당화 및 발효공정의 효율 및 반응시간 단축에 기여하며, 특히 섬유소 기질일 경우에는 필수불가결한 공정이다. 전처리 공정은 물리적, 화학적, 생물학적 방법으로 나누어지며, 이러한 방법들 중 기질의 특성과 처리효율에 따라 기술들을 병합하여 사용하기도 한다. 이에 본 연구에서는 산 처리, 암모니아 처리, 과산화수소 처리 및 효소를 이용한 생물학적 처리를 단독 또는 병행하여, 전환된 당 성분 및 함량을 조사함으로서 섬유소계 기질인 채소 음식물류 쓰레기를 대상으로 바이오에탄올을 경제적으로 생산하기 위한 적합한 전처리법을 검토하였다. 전처리 방법별 당화율을 살펴보면, 산 처리와 암모니아-과산화수소-계면활성제 처리가 각각 65.3 % 및 65.7 %로 가장 높았으며, 과산화수소 처리는 16.2 %로 가장 낮았다. 반면 전처리 공정 없이 효소를 이용한 당화만을 실시한 경우에는 4.3 %의 낮은 당화율을 나타내었다. 섬유소계 기질의 전처리 효율을 향상시키기 위해 첨가하는 계면활성제의 효과는 암모니아-과산화수소 및 암모니아-과산화수소-계면활성제 처리의 당화율을 비교한 결과, 뚜렷한 효과를 확인할 수 없었다. 전처리 방법별 당의 성분 및 함량을 비교한 결과 육탄당은 암모니아-과산화수소-계면활성제 전처리에서 가장 많이 검출되었다. 오탄당은 산 처리 후 그 함량이 현저히 높았으며, 오탄당 중 xylose의 함량이 60.49 mg/g로 가장 많이 차지하고 있었다. 이 결과로부터 전처리 방법에 관계없이 당화율은 유사한 수준을 보이지만, 당화된 당의 성분 및 함량에는 큰 차이가 있음을 알 수 있었다. 이당류의 경우 과산화수소 및 암모니아-과산화수소 처리를 제외한 나머지 전처리 방법에서 유사한 수준을 나타내었다. 암모니아 처리 및 과산화수소 처리를 순차적으로 병행한 암모니아-과산화수소 처리에서는 각각의 처리시보다 육탄당의 함량은 증가하였으나 암모니아 처리시보다 이당류의 함량은 감소한 것으로 나타났다.
A new functional lipolytic enzyme (AT4) has recently been found from Agrobacterium tumefaciens C58 Cereon using a genome-wide approach. The enzyme has some sequence similarity to E. coli acetyl hydrolase, Emericella nidulans lipase, Moraxella sp. lipase, Acinetobacter lwoffii esterase, and Streptomyces hygroscopicus acetyl hydrolase. However, the sequence similarities are very low (less than $25\%$), suggesting that it is a new lipase/esterase enzyme. ill the present study, intact cell of the A. tumefaciens strain was shown to have lipolytic activity on a tributyrin-LB plate. The AT4 gene was then expressed at a high level in E. coli BL21 (DE3) cells and the enzyme was purified simply by Ni-NTA column chromatography. The purified enzyme showed hydrolytic activity toward p-nitrophenyl caproate, but not toward olive oil, suggesting that the AT4 enzyme was a typical esterase rather than lipase. AT4 esterase had a maximum hydrolytic activity at $45^{\circ}C$ and pH 8.0, when p-nitrophenyl caproate was used as a substrate. It was relatively stable up to $40^{\circ}C$ and at pH 5.0-9.0. Calcium ion and EDT A did not affect the activity and thermal stability of the enzyme. As for substrate specificity, AT4 enzyme could rapidly hydrolyze acetyl and butyl groups from p-nitrophenyl esters and 1-naphthyl esters. In addition, it also released acetyl residues from acetylated glucose and xylose substrates. Therefore, this new esterase enzyme might be used as a biocatalyst in acetylation and deacetylation reactions performed in the fine chemical industry.
Bramhachari P.V.;Kishor P.B. Kavi;Ramadevi R.;Kumar Ranadheer;Rao, B. Rama;Dubey Santosh Kumar
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.1
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pp.44-51
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2007
Marine bacterial strains were isolated trom coastal regions of Goa and screened for the strains that produce the highest amount of mucous expolysaccharide (EPS). Our screening resulted in the identification of the strain Vibrio furnissii VB0S3 (hereafter called VB0S3), as it produced the highest EPS in batch cultures during the late logarithmic growth phase. The isolate was identified as VB0S3 based on morphological and biochemical properties. Growth and EPS production were studied in mineral salts medium supplemented with NaCl (1.5%) and glucose (0.2%). The exopolymer was recovered from the culture supernatant by using three volumes of cold ethanol precipitation and dialysis procedure. Chemical analyses of EPS revealed that it is primarily composed of neutral sugars, uronic acids, and proteins. Fourier-transform infrared (FT-IR) spectroscopy revealed the presence of carboxyl, hydroxyl, and amide groups, which correspond to a typical heteropolymeric polysaccharide, and the EPS also possessed good emulsification activity. The gas chromatographic analysis of an alditol-acetate derivatized sample of EPS revealed that it was mainly composed of galactose and glucose. Minor components found were mannose, rhamnose, fucose, ribose, arabinose, and xylose. EPS was readily isolated from culture supernatants, which suggests that the EPS was a slime-like exopolysaccharide. This is the first report of exopolysaccharide characterization that describes the isolation and characterization of an EPS expressed by Vibrio surnissii strain VB0S3. The results of the study contribute significantly and go a long way towards an understanding of the correlation between growth and EPS production, chemical composition, and industrial applications of the exopolysaccharide in environmental biotechnology and bioremediation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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