The surfactant Tween 80 was evaluated for its ability to influence cumulative gas production, cellulose digestion, and enzyme activities by mixed ruminal microorganisms grown on barley grain or Orchardgrass hay. The addition of Tween 80 at a level of 0.10% significantly (p<0.05) decreased the cumulative gas production rate from both barley grain or Orchardgrass hay substrates. However, 0.05% Tween 80 did not affect gas production rates compared to the control treatment. The addition of 0.05% Tween 80 to cultures growing on barley grain resulted in a significant increase in cellulase (90.01%), xylanase (90.73%) and amylase (487.25%) activities after 30 h incubation. Cultures utilizing Orchardgrass hay had a significant increase in cellulase (124.43%), xylanase (108.86%) and amylase (271.22%) activities after 72 h incubation. These increases in activities were also observed with cultures supplemented with 0.10% Tween 80 throughout all the incubation times tested. These results indicated that the addition of 0.05% Tween 80 could greatly stimulate the release of some of key enzymes without decreasing cell growth rate in contrast to trends reported with aerobic microorganism. Our data indicates potential uses of the surfactant Tween 80 as a feed additive for ruminant animals.
The mycelia of Tricholoma matsutake DGUM 26001, 26101, 26210 and FRI 91024 were used to determine the extracellular enzyme activity in mycelia. When the filtrate of culture broth after 30-day cultivation at $24^{\circ}C$ was used as a crude solution of extracellular enzyme, the average specific activity of ${\alpha}-amylase$ was 6142.3 unit/mg protein. The specific activity of xylanase was comparatively high. However, little or no enzyme activities were found for ${\beta}-glucosidase$, ligninase, CMCase, chitinase, protease, and lipase.
Journal of the Korean Graphic Arts Communication Society
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v.24
no.1
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pp.13-22
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2006
We investigated the effects of the enzyme treatment of fiber for printability of coated paper. The results could summarized as follows, 1. The samples with enzyme treatment (average 87.8%) have higher ink gloss than the blank (85.6%). Printed density showed same trends with the ink gloss. However, the ${\beta}$-Glucosidase treated sample showed the lowest printed density (2.14 %) due to the lowest thickness of the ink layer, which is influenced by coated weight and surface smoothness. 2. The samples whose base paper was Xylanase and ${\beta}$-Glucosidase treated showed higher surface strength (4.2% and 4.0%, respectively) than the blank while the samples with the Hernicellulase and ${\beta}$-Glucuronidase treatment showed lower surface strength (3.2%and 3.7%, respectively) due to the influence of air permeability. 3. Hemicellulase and ${\beta}$-Glucuronidase treated base paper, which have relatively low air permeability, showed better ink repellence (4.3 and 4.4 %, respectively) than the blank (3.8 %). 4. The blank and the Xylanase treated base paper showed high set-off, which is the last category of printability.
This study was conducted in order to perform efficient extraction of lignocellulolytic enzymes amylase (EC 3.2.1.1), cellulase (EC 3.2.1.4), laccase (EC 1.10.3.2), and xylanase (EC 3.2.1.8) from spent mushroom compost (SMC) of Pleurotus ostreatus, P. eryngii, and P. cornucopiae. Optimal enzyme recovery was achieved when SMCs were extracted with 50 mM sodium citrate (pH 4.5) buffer at $4^{\circ}C$ for 2 hr. Amylase, cellulase, and xylanase activities showed high values in extracts from P. ostreatus SMC, with 2.97 U/g, 1.67 U/g, and 91.56 U/g, respectively, whereas laccase activity and filter paper degradation ability were highest in extracts from P. eryngii SMC, with values of 9.01 U/g and 0.21 U/g, respectively. Enzymatic activities varied according to the SMCs released from different mushroom farms. The synthetic dyes remazol brilliant blue R and Congo red were decolorized completely by the SMC extract of P. eryngii within 120 min, and the decolorization ability of the extract was comparable to that of 0.3 U of commercial laccase. In addition, laccase activity of the SMC extract from P. eryngii was compared to that of commercial enzymes or its industrial application in decolorization.
We previously reported that the truncated Cel44C-$Man26A_{P558}$${\beta}$-glycosyl hydrolase protein exhibits multifunctional activities, including cellulase, xylanase, and lichenase. DNA shuffling of the truncated Cel44C-$Man26A_{P558}$ enzyme was performed to enhance the enzymatic activity of the multifunctional ${\beta}$-glycosyl hydrolase. Two mutant enzymes, M2Cel44C-$Man26A_{P558}$ that carries one mutation (P438A) and M21Cel44C-$Man26A_{P558}$ that carries two mutations (A273T and P438A) were obtained. The enzymatic activity of the M21Cel44C-$Man26A_{P558}$ double mutant was lower than enzymatic activity of the single mutant (M2Cel44C-$Man26A_{P558}$). However, both mutants displayed the enhancements in their enzyme activities that were ${\approx}1.3$- to 2.2-fold higher than the original enzymatic activity in Cel44C-$Man26A_{P558}$. In particular, the mutant M2Cel44C-$Man26A_{P558}$ exhibited an approximate 1.5- to 2.2-fold increase in the cellulase, xylanase, and lichenase activities in comparison with the control (Cel44C-$Man26A_{P558}$). The optimum cellulase, linchenase, and xylanase activities of ${\beta}$-glycosyl hydrolase were observed at pH 7.0, pH 7.0 and pH 6.0, respectively. These results, therefore, suggest that the amino acid residue Ala438 plays important roles in the enhancement of the activity of multifunctional ${\beta}$-glycosyl hydrolase.
This study was conducted to determine effects of supplementation levels of aqueous direct-fed microbials (DFM; Bacillus spp.) to TMR(exp. 1.) and aqueous DFM addition under the various ratios of starch and cellulose(exp. 2.) on ruminal fermentation and fibrolytic enzyme activity. In experiment 1, ruminal fluids taken from rumen-cannulated Holstein cows were incubated during 24 hr by using TMR as substrates. Aqueous DFM was applied at a rate of 0, 0.025 and 0.05%, respectively. The pH of 0.025% treatment was not significantly different from that of control at 6 and 9 hr, but it was significantly lower (P<0.05) than 0.05% treatment. Concentrations of ammonia-N and VFAs were not affected by supplementing aqueous DFM. The A:P ratio of 0.05% treatment was significantly increased(P<0.05) by supplementation of aqueous DFM as compared with that of control at 24 hr. Although overall fibrolytic enzyme activities were not significantly affected by supplementing aqueous DFM, CMCase(carboxymethylcellulase) activity showed significant increase(P<0.05) compared to control at 6hr. However, the xylanase activity of 0.05% treatment significantly decreased(P<0.05) at 12 hr due to the application of aqueous DFM. There was no significant difference for in vitro dry matter disappearance among treatments. In experiment 2, ruminal fluids were incubated under the condition of various ratios of starch to cellulose(90:10, 70:30, 50:50, 30:70 and 10:90) with or without aqueous DFM(0.025%). Ruminal pH was unaffected by the addition of aqueous DFM, however, as increased level of starch, ruminal pH partially showed significant decrease(P<0.05). Ammonia-N concentration was not affected by aqueous DFM and ratio of starch and cellulose. On 9 hr incubation, DFM addition at a ratio of 70:30 showed significantly (P<0.05) lower value of ammonia-N(35.65 mg/dL) than that(65.05 mg/dL) of control. Concentrations of VFAs were significantly increased(P<0.05) by aqueous DFM addition compared with control at the same ratio on 6 hr incubation. The overall CMCase activity was not affected by aqueous DFM addition. However, the xylanase activity by aqueous DFM partially showed significant differences at the ratios of 90:10, 30:70 and 10:90. Our results indicated that supplementation of aqueous DFM did not significantly improve in vitro fermentation and fibrolytic enzyme activity. In addition, the DFM utilized in this study did not show consistent results by having various effects on ruminal fermentation under different feeding regimens.
The study was conducted to isolate and identify highly fibrolytic anaerobic fungi from the guts of a Hanwoo steer and a Korean native goat, and then investigate the characterization of cellulolytic activity of an anaerobic fungus. Twenty-one anaerobic fungal colonies were isolated in the study, in which 16 colonies were isolated from the rumen contents of the Hanwoo steer and 5 colonies from the duodenal fluids of the Korean native goat. Four anaerobic fungi were selected based on higher cellulolytic enzyme activities to identify under a optical microscope. NLRI-M003 and -T004 belong to Neocallimastix genus and NLRI-M014 belongs to Piromyces genus based on the morphology of their thallus, sporangia, rhizoid and the number of flagella. NLRI-M001 appeared to be an unknown strain of anaerobic fungi due to its different morphology from existing types of anaerobic fungi, though the morpholgoy is similar to Orpinomyces sp. Supplementation of 2% anaerobic fungal culture(NLRI-M003) in rumen-mixed microorganisms increased in vitro DM degradability of rice straw and filter paper up to 4 and 11%, respectively, compared with non-supplementation(control). CMCase and xylanase activities in in vitro culture were also higher in 2% fungal supplementation than controls in both rice straw and filter paper substrates.
Park, Sung-Yong;Bang, Mi-Ae;Oh, Boung-Jun;Park, Jeong-Hoon;Song, Won-Seob;Choi, Kyung-Min;Choung, Eui-Su;Boo, Hee-Ock;Cho, Seung-Sik
Korean Journal of Microbiology
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v.49
no.3
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pp.262-269
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2013
The object of this study was to improve the quality of Cheonggukjang with new starter, Bacillus subtilis BC-P1. Twenty strains were isolated from the commercial cheonggukjang and 1 Bacillus strain (BC-P1) with protease activity was selected. The 16S rRNA gene sequence revealed that the BC-P1 was closely related to B. subtilis with 99% homology. The quality characteristics of chunggukjang fermented with B. subtilis BC-P1, Bacillus nato (PC) and commercial chunggukjang (NC) were investigated. The characteristics of fermentation were determined by protease, lipase, xylanase, chitinase, and fibrinolytic activities, reducing sugar, nutrient composition and amino acid contents of cheonggukjang sample. Cheonggukjang fermented with B. subtilis BC-P1 showed the strongest fibrinolytic, xylanase, and chitinase activities. Reducung sugar contents of Cheonggukjang samples were $30.16{\pm}2.11$ mg/g (NC), $28.56{\pm}1.52$ mg/g (PC), $32.39{\pm}1.87$ mg/g (BC-P1). And their total amino acid contents were 338.99 mg% (NC), 445.19 mg% (PC), 741.35 mg% (BC-P1). These results suggested that B. subtilis BC-P1 was suitable to be used as a starter to enhance the quality and effects of cheonggukjang.
Zhao, Yanyu;Meng, Kun;Luo, Huiying;Yang, Peilong;Shi, Pengjun;Huang, Huoqing;Bai, Yingguo;Yao, Bin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.8
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pp.861-868
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2011
A xylanase gene, xyn7c, was cloned from Paenibacillus sp. 12-11, an alkalophilic strain isolated from the alkaline wastewater sludge of a paper mill, and expressed in Escherichia coli. The full-length gene consists of 1,296 bp and encodes a mature protein of 400 residues (excluding the putative signal peptide) that belongs to the glycoside hydrolase family 10. The optimal pH of the purified recombinant XYN7C was found to be 8.0, and the enzyme had good pH adaptability at 6.5-8.5 and stability over a broad pH range of 5.0-11.0. XYN7C exhibited maximum activity at $55^{\circ}C$ and was thermostable at $50^{\circ}C$ and below. Using wheat arabinoxylan as the substrate, XYN7C had a high specific activity of 1,886 U/mg, and the apparent $K_m$ and $V_{max}$ values were 1.18 mg/ml and 1,961 ${\mu}mol$/mg/min, respectively. XYN7C also had substrate specificity towards various xylans, and was highly resistant to neutral proteases. The main hydrolysis products of xylans were xylose and xylobiose. These properties make XYN7C a promising candidate to be used in biobleaching, baking, and cotton scouring processes.
Three trials were conducted to determine the available energy of different wheat screening varieties collected from different locations of Khorasan in Iran. In experiment 1, chemical composition and the nitrogen corrected true metabolisable energy (TMEn) were evaluated. A precision-fed rooster assay was used, in which, each wheat screening sample was tube fed to adult roosters, and the excreta were collected for 48-h. In Exp. 2 and 3, five and two wheat screening verities-based diets with or without xylanase and phytase were fed to 16-day old battery reared chicks respectively, and total feed consumption and excreta were measured during next three days. The variable nature of wheat screening varieties led to significant differences in mean TMEn values (p<0.01). The TMEn values of samples determined with adult roosters varied by ${\pm}5.03%$ of the mean value ($3,097.65{\pm}49.32\;kcal/kg$) and ranged from 2,734.90 to 3,245.12 kcal/kg. There was a significant correlation (p<0.05) between crude fiber (CF), neutral detergent fiber (NDF), and acid detergent fiber (ADF) with TMEn, and the greatest correlation coefficient was observed between NDF and TMEn (r = -0.947; p<0.001). The optimal equation in terms of $R^2$ from using a single chemical analysis was obtained with NDF: TMEn = 4,152.09-27.80 NDF ($R^2$ = 0.90, p<0.0001), and the TME prediction equation was improved by the addition of the crude protein (CP) and ASH content to sequential analysis: TMEn = 3,656.97-28.65 NDF+32.54 CP+38.70 ASH ($R^2$ = 0.98, p<0.0001). The average AMEn values of 5 and 2 wheat screening varieties determined with young broiler chickens were $2,968.41{\pm}25.70\;kcal/kg$ and $2,976.38{\pm}8.34\;kcal/kg$ in Exp. 2 and Exp. 3, respectively. Addition of xylanase and phytase to wheat screenings resulted in significant (p<0.01) improvement in AMEn by 4.21 and 2.92%, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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