To evaluate the effect of Baepungtang(BPT) water extract on cultured mouse spinal sensory neuron which was inhibited by xanthine oxidase(XO) and hypoxanthine(HX)-induced oxigen radicals, MTT assay, NR assay, Neurofilament enzymeimmuno assay and LDH activity assay were carried out after the cultured mouse spinal sensory neuron were preincubated with various concentrations of BPT water extract for 3 hours prior to exposure of XO/HX. The results obtained were as follows: 1. XO/HX, a oxigen radical, decreased the survival rate of the cultured mouse spinal sensory neuron cell on NR assay and MTT assay. 2. $MTT_{50}$ value and $NR_{50}$ value of XO/HX were 30 mU/ml XO/O.2 mM HX. 3. BPT water extract have efficacy of increasing neurofilament. 4. BPT water extract have efficacy of increasing LDH activity. From above the results, It is concluded that BPT has marked efficacy as a treatment for the damages caused in the XO/HX-mediated oxidative process.
Sa, S. J;H. T. Cheong;Lee, S. Y.;Lee, J. H.;I. S. Ryu;B. K. Yang;Kim, C. I.;Park, C. K.
한국가축번식학회지
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제27권1호
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pp.77-85
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2003
본 연구는 xanthine(X)-xanthine oxidase(XO) system하에서 돼지 난자의 체외성숙과 체외수정에 대한 catalase의 영향을 검토하였다. 그 결과 돼지 난포난자가 X 또는 XO하에서 배양되었을 때, 난포난자의 성숙율은 다른 배양시간에도 불구하고 catalase 첨가 유무에 따른 유의적인 차이를 나타내지 않았다. 그렇지만, X-XO-catalase system하에서 배양한 경우 유의적으로 높은 성숙율을 얻었다(P<0.05). 퇴행난자의 비율은 배양기간이 늘어남에 따라 증가되었으며, 배양 120시간에서는 catalase 첨가시보다 무첨가시에 유의적으로 높았다. 다른 한편으로, 단위발생 난자들이 배양 72시간에 높은 비율로 관찰되었지만, 다양한 배양시간에서 catalase 첨가유무에 따른 차이는 발견되지 않았다. 또 다른 실험에서, 동결-응해된 돼지 정자가 체외수정을 위해 X-XO system으로 처리되었다. 난자투명대에 대한 정자침입율은 none (P<0.05), XO, X+XO하에서 체외수정시 catalase 무첨가시보다 첨가시에 높게 나타났다. 다른 한편으로, 돼지정자가 none, X, XO, X+XO로 처리되었을 때, lipid peroxidation은 catalase 첨가시보다 무첨가시에 높은 비율로 나타났으며, 그 결과 정자침입과 lipid peroxidation에서의 변화가 상반되는 양상을 보였다. 그렇지만, 모든 조건하에서 정자의 sulfhydry (-SH) group의 함량은 catalase 첨가시에 높게 측정되었다. 난자의 투명대에 대한 정자의 접착 정도는 salt-stored 돼지 난자에 대한 정자접착을 통해서 평가되었으며, control group의 경우 X, XO, X+XO group에 비해 높은 정자접착율이 관찰되었다. 그렇지만, catalase 첨가유무에 따른 유의적인 차이는 인정되지 않았다. 본 연구의 결과는 X-XO-catalase system에 대한 난포난자와 정자의 노출이 돼지에서의 체외성숙과 체외수정을 촉진시키는 것으로 생각된다.
시판 과일 주스와 발효식초의 총 페놀 함량, 플라보노이드함량, 유기산 함량, 그리고 xanthine oxidase(XO) 저해 활성을 비교하였다. 과일 주스와 식초에 함유된 총 페놀(mg gallic acid equivalent/100 mL)과 플라보노이드(mg catechin equivalent/100 mL) 함량은 각각 82.8~157.6 mg과 15.7~85.8 mg으로 측정되었다. 주스류에서는 사과 주스, 식초류에서는 흑초가 각각 가장 높은 총 페놀 함량과 플라보노이드를 함유하였다. 유기산의 함량 중 citric acid, malic acid, ascorbic acid는 주로 과일 주스에서 검출되었다. Acetic acid가 주성분인(688.3~4,413.7 mg/100 mL) 식초류 중에서 흑초는 acetic acid뿐 아니라 citric acid, malic acid, tartaric acid를 함유하여 유기산의 분포가 가장 다양하였다. XO 저해 활성은 과일 주스보다 식초가 평균 34.2% 더 높게 측정되었으며, 흑초는 64.9%로 가장 높은 저해 활성을 나타내었다. 특히 유기산의 종류 중에서 아세트산의 함량과 XO 저해 활성 간에 높은 정의 상관성이 존재하여($R^2=0.7192$) 식초류의 XO 저해 활성의 주요 지표물질로 나타났다.
Sa S.J.;H.T. Cheong;B.K. Yang;Kim, C.I.;Park, C.K.
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2002년도 춘계학술발표대회 발표논문초록집
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pp.74-74
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2002
This study was undertaken to evaluate the effects of β-mercaptoethanol on lipid peroxidation and fertilization ability in vitro by xanthine (X)-xanthine oxidase (XO) system in boar spermatozoa frozen-thawed. When spermatozoa were inseminated in medium with X and/or XO, the penetration rates in all conditions were higher in medium with that than without β-mercaptoethanol. However, significant differences were not observed between medium with and without β-mercaptoethanol. The lipid peroxidation of sperm was evaluated on the basis of malondialdehyde (MDA) production. (omitted)
Xanthine Oxidase is an enzyme, which oxidizes hypoxanthine to xanthine, and xanthine to uric acid. It is widely distributed throughout various organsincluding the liver, gut, lung, kidney, heart, brain and plasma. It is involved in gout pathogenesis. In this study, we have performed Comparative Molecular Field Analysis (CoMSIA) on a series of 2-(indol-5-yl) thiazole derivatives as xanthine oxidase (XO) inhibitors to identify the structural variations with their inhibitory activities. Ligand based CoMSIA models were generated based on atom-by-atom matching alignment. In atom-by-atom matching, the bioactive conformation of highly active molecule 11 was generated using systematic search. Compounds were aligned using the bioactive conformation and it is used for model generation. Different CoMSIA models were generated using different alignments and the best model yielded across-validated $q^2$ of 0.698 with five components and non-cross-validated correlation coefficient ($r^2$) of 0.992 with Fisher value as 236.431, and an estimated standard error of 0.068. The predictive ability of the best CoMSIA models was found to be $r{^2}_{pred}$ 0.653. The study revealed the important structural features required for the biological activity of the inhibitors and could provide useful for the designing of novel and potent drugs for the inhibition of Xanthine oxidase.
To evaluate the effect of ethanol pretreatment on the liver and serum xanthine oxidase(XO) activity, the bromobenzene(40mg/kg body wt., i.p.) was orally given 3 times daily to the Sprague-Dawley male rats pretreated with 5% ethanol throughout 2 months. Bromobenzene treated rats pretreated with ethanol showed the more decreased activity of serum and liver XO, and lower value of V than those of only bromobenzene treated rats. Bu the bromobenzene treatment, ethanol pretreated rats showed the more decreased levels of serum alanine aminotransferase activity and liver weight/bo여 weight(%), and decreased degree of liver damage on histopathological observation than the control group.
To clarify the vasculotoxicity of reactive oxygen intermediate(ROI) in cultured vascular endotherial cells(VEC), of mouse, cytototoxicity was measured by MTS assay after VEC was incubated to 10~80mU/ml xanthine oxidase(XO) and hypoxanthine(HX) for 2 hours. and also, the protective effect of Radix Polygoni Multiflori(RPM) was determined by MTT assay in these cultrures. Cell viability was positively decreased dose-, and time-dependently, after the treatment with 40mU/ml XO/0.1 mM HX to cultured VEC for 2 hours. In the vasculoprotective effect of RPM on the toxicity induced by XO/HX, RPM prevented the XO/HX-induced cytotoxicity in these cultures. From above the results, it suggests that XO/HX is toxic in cultured VEC and herb extract, RPM has protective effect against the vasculotoxicity induced by XO/HX.
Objectives and Methods : In order to elucidate toxic mechanism of myocardial damage and protective effect of myrrha water extract against cytotoxic effect of xanthine oxidase/hypoxanthine(XO/HX), cardioprotective effect of myrrha water extract was examined by MTT assay, LDH (Lactate Dehydrogenase) activity and heart beating rate after cultured myocardial cells derived from neonatal mouse were treated with various concentration of XO/HX, a free radical. Results : XO/HX induced a decrease of cell viability, an increase in the amount of LDH, and a decrease of heart beating rate on cultured myocardial cells in a dose-dependent manner. In cardioprotective effect of myrrha water extract, it showed a decrease in the amount of LDH and an increase of heart beating rate on cultured myocardial cells damaged by XO/HX. Conclusions : From the above results, it is suggested that XO/HX showed toxic effect in cultured myocardial cells derived from neonatal mouse and that myrrha water extract is very effective in the prevention of XO/HX-induced cardiotoxicity.
The present study was aimed at investigating the hypouricemic and xanthine oxidase inhibitory activities of the various fractions of the hydromethanolic extract of the leaves of Coccinia grandis L. Voigt (Cucurbitaceae). The leaves of this species was used in traditional medicinal system for the treatment of gout, rheumatism, jaundice, bronchitis, fever, skin eruptions, wounds, etc. The degree of xanthine oxidase inhibition was determined in vitro by measuring the increase in absorbance at 295 nm associated with uric acid formation. Among the fractions tested, the chloroform fraction exhibited highest potency ($IC_{50}$$17.8\;{\mu}g/ml$). This was followed by the pet-ether ($IC_{50}$$29.7\;{\mu}g/ml$), ethyl acetate ($IC_{50}$$41.2\;{\mu}g/ml$) and residual ($IC_{50}$$47\;{\mu}g/ml$) fractions. The $IC_{50}$ value of allopurinol was $6.1\;{\mu}g/ml$. In addition, the hypouricemic and hepatic xanthine oxidase (XO)/xanthine dehydrogenase (XDH) inhibitory activities of the fractions were examined in vivo using oxonate (280 mg/kg, i.p.) induced hyperuricemic mice. At a dose of 200 mg/kg orally for 7 days, the pet-ether, chloroform and ethyl acetate fractions produced a significant (P < 0.01) reduction in serum urate level and also inhibited hepatic XO/XDH activities when compared to hyperuricemic mice. These inhibitory effects were weaker than that observed for the standard drug, allopurinol (10 mg/kg, p.o.). Lineweaver-Burk analysis of the enzyme kinetics indicated that the mode of inhibition was of a mixed type. These results suggest that the use of Coccinia grandis leaves for the treatment of gout could be attributed to its XO inhibitory activity.
Sa, S.J.;Park, C.K.;Cheong, H.T.;Yang, B.K.;Kim, C.I.
한국동물번식학회:학술대회논문집
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한국동물번식학회 2001년도 춘계학술발표대회
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pp.13-13
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2001
This study was undertaken to evaluate the effects of catalase using xanthine (X) - xanthine oxidase (XO) system on in vitro maturation and fertilization in pig. When follicular oocytes were cultured in maturation medium with X and/or XO, the maturation rates were not significantly different between in medium with and without catalase despite of different culture periods. However, significantly (P<0.05) higher maturation rates were obrained in culture with X-XO system. The rates of degenerated oocytes were increased with culture periods prolonged, and were significantly (P<0.05) higher in medium without than with catalase at 120 h of culture. On the other hand, the parthenogenetic oocytes were observed with high proportions at 72 h of culture, hut were not different in medium with and without catalase at various times of culture. In another experiment, the frozen-thawed boar spermatozoa treated with X-XO system for in vitro fertilization. The penetration rates were higher in medium with that than without catalase during the in vitro fertilization with, none (P<0.05), XO and X+XO. On the other hand, when sperm were treated with none, X, XO and X+XO, lipid peroxidation were higher in medium without that than with catalase. However, the changes in sperm penetration and lipid peroxidation showed opposite patterns. The sperm suspensions were also treated with X and/or XO for assay of sulfhydryl (-SH) group content. Under the above all conditions, sperm-SH group were higher detected In medium with that than without catalase. The activity of sperm binding to zona pellucida was also evaluated through binding to salt-stored porcine oocytes. In control group, sperm binding to zona pellucida were higher than in medium with X, XO and X+XO groups. No significant differences, however, were observed between medium with and without catalase. In conclusion, the exposure of follicular oocytes and spermatozoa to X-XO system may be caused stimulating in vitro maturation and fertilization in pig. This work was supported by grant No. 2000-1-22200-001-3 from the Basic Research Program of the Korea Science & Engineering Foundation.
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