Recombinant antigenic proteins of Toxoplasma gondii are alternative source of antigens which are easily obtainable for serodiagnosis of toxoplasmosis. In this study, highly antigenic secretory organellar proteins, dense granular GRA2 and GRA3, rhoptrial ROP2, and micronemal MIC2, were analyzed by bioinformatics approach to express as water-soluble forms of antigenic domains. The transmembrane region and disorder tendency of 4 secretory proteins were predicted to clone the genes into pGEX-4T-1 vector. Recombinant plasmids were transformed into BL21 (DE3) pLysS E. coli, and GST fusion proteins were expressed with IPTG. As a result, GST fusion proteins with $GRA2_{25-105}$, $GRA3_{39-138}$, $ROP2_{324-561}$, and $MIC2_{1-284}$ domains had respectively higher value of IgG avidity. The $rGST-GRA2_{25-105}$ and $rGST-GRA3_{39-138}$ were soluble, while $rGST-ROP2_{324-561}$ and $rGST-MIC2_{1-284}$ were not. $GRA2_{31-71}$, intrinsically unstructured domain (IUD) of GRA2, was used as a linker to enhance the solubility. The $rGST-GRA2_{31-71}-ROP2_{324-561}$, a chimeric protein, appeared to be soluble. Moreover, $rGST-GRA2_{31-71}-MIC2_{1-284}$ was also soluble and had higher IgG avidity comparing to $rGST-MIC2_{1-284}$. These 4 highly expressed and water-soluble recombinant antigenic proteins may be promising candidates to improve the serodiagnosis of toxoplasmosis in addition to the major surface antigen of SAG1.
본 연구는 리기다소나무 수피의 화장품 약리활성인 항산화활성을 검증하고, 화장품 산업적 응용을 위하여 리기다소나무 수피 추출물의 화장품 천연소재로써 적용 가능성을 확인하였다. 페놀화합물은 물가용부와 EtOAc가용부에서 각각 47mg/L, 601mg/L로 정량되어 EtOAc가용부가 물가용부에 비해 12배 높은 함량이었다. DPPH 소거능은 EtOAC가용부 10ppm에서 86%로 나타나 같은 농도의 BHA보다 높은 소거능을 보였다. Xanthine oxidase 저해활성은 500ppm농도에서 물가용부와 EtOAC가용부에서 각각 76.3%, 80.5%로 70% 이상의 활성을 나타내었다. Tyrosinase 저해활성은 시료의 농도가 증가함에 따라 유의적으로 증가하는 경향을 나타내었으나, 전체적인 활성은 1,000ppm에서 물가용부가 42%, EtOAC가용부가 10.9%로 나타내었다. 이상의 결과로 미루어 보아 리기다소나무 수피 추출물의 항산화효과가 있음을 확인할 수 있었고, 기능성 화장품 소재로써 이용가능성을 확인할 수 있었다.
Ennigrou, Dorra Jellouli;Ali, Mourad Ben Sik;Dhahbi, Mahmoud;Mokhtar, Ferid
Membrane and Water Treatment
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제5권3호
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pp.183-195
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2014
The efficiency of two metal ions (cadmium, zinc) removal from aqueous solutions by ultrafiltration (UF) and Polymer Enhanced Ultrafiltration (PEUF) processes were investigated in this work. The UF and PEUF studies were carried out using an ultrafiltration tangential cell system equipped with 5.000 MWCO regenerated cellulose. A water-soluble polymer: the polyacrylic acid (PAA) was used as complexant for PEUF experiments. The effects of transmembrane pressure, pH, metal ions and loading ratio on permeate fluxes and metal ions removals were evaluated. In UF process, permeate fluxes increase linearly with increasing pH for different transmembrane pressure, which may be the consequence of the formation of soluble metal hydroxyl complexes in the aqueous phase. In PEUF process, above pH 5.0, the Cd(II) retention reaches a plateau at 90% and Zn(II) at 80% for L = 5. Also, cadmium retention at different L is greater than zinc retention at pH varying from 5.0 to 9.0. In a mixture solution, cadmium retention is higher than zinc for different loading ratio, this is due to interactions between carboxylic groups of PAA and metal ions and more important with cadmium ions.
To investigate anti-HIV-1 activity of water soluble chitosans, sulfated chitosan derivatives were prepared in mild condition. Various sulfated chitosan derivatives (N-3,6-O-S-chitosan, N-desulfated 3,6-O-S-chitosan, 3,6-O-S-chitin, and 3,6-O-sulfated-N-(o-carboxybenzoyl) chitosan) were synthesized with sulfurtrioxidepyridene complex in pyridine solvent. Characterization of the sulfated chitosan derivatives was carried out by $^{13}C$ NMR and IR spectroscopies. To observe ionic reaction properties, pKas of the sulfated chitosan derivatives and chitosan of low molecular weight were estimated by potentiometric titration. The sulfated chitosan derivatives had high water solubility, pKas (pKa : 7.7) of N-3,6-O-S-chitosan and N-desulfated 3,6-O-S-chitosan were increased than pKa of water insoluble chitosan (pKa : 6.2), These results suggest the participation of electrostatic interaction of amino and sulfate groups on the sulfated chitosans. Anti-HIV-1 drugs, such as AZT, ddC, and ddI for anti-HIV activity had higher selective index compared with SCB-chitosan but N-3,6-O-S-chitosan has shown higher selective index compared with ddC and ddI as HIV drugs.. These results suggest that sulfated chitosan derivatives were expected as an anti-HIV drug with differential driving force mechanism against some nucleoside analogs drug in the future.
참깨박에 함유되어 있는 불용성 형태의 단백질을 가용성 형태의 단백질로 용출시키기 위하여 Bacillus sp. CW-1121이 생성하는 효소를 작용시켰다. 이때 참깨박의 단백질 용출을 위한 최적 pH는 7.5였으며, 최적 온도는 $40^{\circ}C$였고 최적 조건하에서 2시간의 소화로 약 60%의 용해도를 보였다. 단백질의 용해도는 참깨 단백질이 pH4.5에서 가장 낮아 등전점을 보였고, pH3.0과 pH6.0 이상에서는 크게 증가하였다. 효소처리 참깨박 단백질을 전기영동한 결과 수용성 단백질은 4개, 염용성 단백질은 2개의 밴드가 관찰되었다. 분리 단백의 아미노산 조성은 수용성 단백질의 경우 serine이 17.24 mg/g, 염용성 단백질은 glutamic acid가 10.77 mg/g, 유리아미노산은 glutamic acid가 6.55 mg/g으로 가장 많이 함유되어 있었으며 특히 필수아미노산의 조성도 상당히 좋은 편이었다.
The objective of this study was to evaluate the nutritional content of bullfrog meat from different parts of the animal, including fore-chest, thigh and calf. Bullfrog meat was found to be a rich source of proteins, essential amino acids and minerals, but with a low fat content, compared with other aquatic meat products. There was no significant difference (p>0.05) between thigh and calf in mineral content (K, P, Na, Mg, Ca, Zn, Fe, Cu, and Mn), but the contents of K, P, and Mg were higher in thigh and calf than in the fore-chest (p<0.05). The salt-soluble, water-soluble and insoluble protein bands in sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) electrophoresis, from fore-chest, thigh and calf were similar, with the most abundant bands being 35 kDa (salt-soluble protein), 35-48 kDa (water-soluble protein) and 48 kDa (insoluble protein). The results showed that the insoluble protein content in the fore-chest meat was higher than that in the thigh meat and calf meat, but the salt-soluble protein fraction was the most abundant in thigh meat. These results showed that the nutrients in different parts of bullfrog meat were different.
본 실험에서는 천연 추출물중 항산화성이 우수한 추출물을 선발하여 계육 양념육 제품을 개발하고, 둘째. 양념육의 침투속도를 높이기 위하여 수용성 미네랄 성분과 Ge-132를 이용하여 양념계육 제품에 대한 이화학적 특성을 검토하였다. 이상의 게르마늄, 녹차, 수용성 미네랄 및 녹차+게르마늄+수용성 미네랄 복합 첨가 양념 닭고기 제품의 이화학적 결과를 보면, pH는 염지전 가슴부분이 6.00~5.94, 다리부분이 6.55~6.38로 염지 기간 중 처리구간의 pH의 차이는 나타나지 않았으며, 닭고기 부위에 따른 차이는 가슴부분보다 다리부분이 조금 높게 나타났다. 염도와 당도는 염지기간 중 증가하는 경향이었으며, 염도의 경우 염지 24시간째 대조구의 가슴과 다리부분이 각각 1.11%, 1.21%를 나타내었다. 그러나 수용성 미네랄 첨가구 모두 저장 6시간과 12시간째 대조구의 염도보다도 높은 값을 나타내었다. 당도의 경우도 마찬가지로 대조구 24시간째 19.94 brix, 18.89 brix를 저장 6시간째 천연물과 기능수 첨가구 모두 가슴과 다리부분에서 높은 당도를 나타내었다. 가열조리 후 각 처리양념 닭고기제품의 경도 변화는 대조구에 비하여 모든 처리구가 부위에 관계없이 낮은 값을 나타내 었으며 특히, 녹차 첨가구는 가슴부분과 다리부분이 각각 122.59, 142.59kg/$cm^2$로 가장 낮은 값을 나타내었다. 항균성의 경우 대조구의 가슴부분 4.23CFU/g, 다리부분 4.24CFU/g에 비하여 가슴부분은 녹차 첨가구가 3.76CFU/g, 녹차+게르마늄+수용성 미네랄 복합첨 가구가 3.61CFU/g으로 낮은 값을 나타내었고, 다리부분은 녹차 첨가구가 3.49CFU/g, 녹차+게르마늄+수용성 미네랄 복합 첨가구가 3.55 CFU/g으로 낮은 값을 나타내었다. 지방산화도의 경우는 부위에 관계없이 대조구에 비하여 낮은 TBARS값을 나타내었고 특히, 녹차 첨가구가 가슴부분 0.43, 다리부분 0.47로 TBARS값이 낮게 나타났다. 다즙성, 연도 및 종합적인 기호도에서는 대조구에 비하여 녹차, 수용성 미네랄 및 녹차+게르마늄+수용성미네랄 복합 첨가구가 양념 닭고기제품의 다리와 가슴부분 모두에서 유의하게 높은 수치를 나타내었다. 대조구의 유리아미노산 함량 1462.7mg에 비하여 녹차첨가구의 유리아미노산 함량은 1661.46 mg으로 증가하였고, 고기의 추출물에서 맛과 풍미에 중요한 역할을 하는 아미노산인 glutamic acid의 함량이 대조구에 비하여 녹차 첨가구가 534.24mg으로 높은 값을 나타내었다.
본 연구에서는 참나무(oak wood)류중 신갈나무(Querrus mongolica)로부터 수용성 식이섬유소의 제조와 제조된 수용성 식이섬유소의 생리적 기능성을 검정하고자 하였다. 신갈나무로부터 수용성 식이섬유소의 분리는 전처리 기술로써 폭쇄처리를 하였으며 최적 폭쇄전처리 조건은 25kgf/$\textrm{cm}^2$의 압력으로 6분간 처리하였다. 폭쇄시료를 탈리그닌 처리하기 위해 가장 효과적인 방법중 1% NaOH 용액으로 수회여과 처리 하였다. 앞에서 탈리그닌된 시료를 효소가수분해 처리하기 위 해 사용된 효소로는 Onnozok R-10보다 Cellusoft 효소의 가수분해율이 효과적이었다. 제조된 수용성 식이섬유소의 분자량 분포는 약 1,200-348 사이에 존재하는 oligomer 형태의 소당류로 분포되어 있었다. 제조된 수용성 식이섬유소의 생리적 기능성을 검정하기 위해 실험동물은 Sprague-Dawley종 수컷을 이용하여 정상군과 고콜레스테롤식이 실험군으로 나눈 후 고콜레스테롤 실험군을 다시 섬유소 종류와 공급수준에 따라 섬유소를 공급하지 않은 무섬유식이군 (FF군), 시판 식이섬유소를 5%공급한군 (5P군) 10%공급한군 (l0P군) 제조 식이섬유소를 5% 공급한 군 (5M군) 10% 공급한 군(10M군) 등 각 10마리씩 6군으로 나누어 4주간 사육하였다. 식이섭취량은 섬유소공급군이 FF군에 비해 증가되었으며 체중증가량은 섬유소공급군에서 FF군에 비해 유의적 (p<0.05)으로 낮았다. 식이효율은 FF군에 비해 모든 식이섬유소군에서 유의적 (p<0.05)으로 낮았으며 특히 10% 공급군에서 가장 낮았다. 간 무게근 FF군에 비하여 식이섬유소 공급군에서 유의적 (p<0.05)으로 감소되었으며 소장 및 맹장무게는 정상군과 무섬유식이군에 비하여 식이섬유소 공급군에서 증가되었다. 혁청 GOT 활성은 식이섬유소 공급군이 FF군에 비해 유의적 (p<0.05)으로 저하되었다. GPT 활성은 정상군에 비해 무섬유식이군인 FF군에서 증가되었으며 섬유소 공급관들은 다소 감소되는 경향이었다. 간조직 중 GST 활성은 FF군에 비해 식이섬 유소 공급군 모두 활성이 증가되었다. 그리고 이러한 생리적 기능은 제조된 수용성 섬유소군이 시판 수용성 섬유소와 차이가 없었다. 결론적으로 제조된 수용성 식이섬유소와 시판되는 수용성 식이섬유소가 생리져 기능이 거의 비슷하고 무독성이 관찰됨으로써 신갈나무로부터 제조된 수용성 식이섬유소의 제조 방법이 우수하다고 볼 수 있다.
The aim of this study is to elucidate the anti-microbial activity and anti-oxidative activity of water-soluble chitosan with a molecular weight of 5,000-200,000. Water-soluble chitosans have demonstrated a regular anti-microbial activity on the tested strians by the paper disk method. In the MIC (Minimum Inhibitory Concentration) test, CC-01 (MW=5,000) with the lower MW showed the higher MIC value than the higher MW chitosan. The MW of chitosan increase, the MIC decreases. MICs of 4 chitosans(CC-02∼CC-05) against S. aureusTCC 65389, E coli ATCC 8739, p. aeruginosa, ATCC 9027 and C. albicans ,ATCC 10231 were 7.0-39.O$\mu\textrm{m}$, whereas MICs of chitosans against A. niger were over 2.OmM. Formula containing chitosan showed higher anti-microbial activities than the formula made with the chemical preservatives(Methylparaben 0.2% and Imidazolidinyl Urea 0.3%). Among 5 water-soluble chitosans, CC-03(MW=92,163) showed the most potent anti-oxidative activity (IC$\sub$50/ : 0.2mM). In conclusion, the water-soluble low molecular weight chitosan could be served as natural preservatives and antioxidant in cosmetics.
Kim, Hyung-Soo;Jang, Duck-Kyu;Woo, Dong-Kyun;Woo, Kang-Lyung
Preventive Nutrition and Food Science
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제7권1호
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pp.12-17
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2002
Simultaneous determination of nine water-soluble vitamins contained in multi-nutrient tablets was carried out by reversed phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) equipped with analytical $C_{18}$ column and UV (270 nm) detector. Those standard vitamins were successfully separated within 23 minutes by gradient elution with solvent A (0.5 M potassium phosphate monobasic) and solvent B (0.25 M potassium phosphate monobasic-methanol, 1:1). Calibration curves showed good linealities with correlation coefficients (> 0.92) in tested ranged respectively. The detection limits were considered to be 2.1 ng for ascorbic acids 60 ng for Vit B$_{6}$ 3 ng for p-aminobenzoic acid, 9 ng for niacinamide, 9 ng for thiamin, 5.0 ng for folic acid and 1.5 ng for riboflavin at 0.05 a.u.f.s. Solid phase extraction through Sep-Pak (C$_{18}$ ) cartridge was successfully applied for purification of water soluble vitamins in commercial multi-nutrient tablets.ts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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