This paper dealt with plasmid DNA profile in 98 Salmonella(S) isolated from pigs and cattle sources in Taegu, Gyeongbook and Gyeongnam during the period from 1984 to 1987. Also we were studied for restriction enzyme analysis of the plasmid DNA, and mouse infection, Sereny test and normal setum resistance test in guinea pig for S typhimurium and S enteritidis harbored or cured 60 megadalton(Md) plasmid and 36 Md plasmid, respectively. Of the 13 Salmonella isolated from cattle, 7 Salmonella harbored one or more plasmids and molecular sizes of the large plasmids were 60 Md for S typhimurium and 36 Md for S enteritidis. Of the 85 Salmonella isolated from pigs, 47 Salmonella were confirmed as being one or more plasmids, and all the S typimurium stains harbored 60 Md plasmid. In enzyme digestion with 8 types of restriction endonuclease for 60 Md plasmid DNA of S typhimurium, cleavage patterns were varied to enzymes, and the DNA was segmented into 4 to 15 fragments. In restriction enzyme analysis of 36 Md plasmid DNA obtained from four strains of S. enteritidis, the DNA showed the same cleavage patterns obtained with Eco RI, Hind III and Bam H I, and was segmented into 3 to 5 fragments. In virulence for mice by measuring the 50% lethal dose ($LD_{50}$), the $LD_{50}$ values obtained for 60 Md virulence-associated plasmid harbored strains of S typhimurium and 36 Md virulence-associated plasmid of S enteritidis were up to $10^4$-fold lower than the values obtained for the plasmid-cured strains of the same serotype. Only the plasmid harbored strains were resistant to the bactericidal activity of 90% guinea pig serum, and only they gave positive responses in sereny test. We suggested that their plasmid DNA might be associated with virulence for mice.
Two hundred and eighty nine strains of Yersinia enterocolitica isolated from healthy pigs were tested for the presence of 40~50 Megadalton virulence-associated plasmids and plasmidmediated in vitro virulence-associated properties, i.e., congo red uptake, calcium dependency, autoagglutination, CRMOX reaction, crystal violet binding and pyrazinamidase reaction. The correlationships between in vitro virulence-associated properties and the presence of 220 Kdalton outer membrane protein(OMP) were examined in strains with or without virulence-associated plasmids. The correlationships between the presence of plasmids on the production of the OMP and the expression of in vitro virulence-associated properties were studied with $CRMOX^+$ strains and acridine orangecured $CRMOX^-$ mutants. The results were as follows : 1. Of the in vitro virulence-associated tests with 289 strains of Y enterocolitica, 275 strains (95.2%) were positive for pyrazinamidase test, and followed by in order of crystal violet binding test, 226 (79.2% ) ; CRMOX test, 190 (65.7%) ; autoagglutination test, 1.85(64.0%) : calcium dependency test, 86 (29.8%) and congo red uptake test, 47(16.3%). 2. The correlationship between autoagglutination and CRMOX test(r=0.90) was highly significant (p<0.01). 3. In 190 strains(65.7%) bearing the virulence-associated plasmids(MW 40~50 Mdalton), the correlation between the presence of plasmids and their in vitro virulence-associated properties were highest with CRMOX test(r=0.93) and followed by in orders of AAG test(0.81), CV test(0.46), PYZ test(0.37) and CD test(0.18), but no correlationship between the presence of plasmids and CR test(-0.11). 4. The $CRMOX^+$ strains produced the 220 Kdalton OMP when they were cultured at $37^{\circ}C$, but not at $26^{\circ}C$. The presence of 220 Kdalton OMP was correlated significantly with in vitro virulence properties and the presence of virulence-associated plasmid, respectively. 5. In the isogenic $CRMOX^-$ mutant strains, of which plasmid were cured by treatment with acridine orange not only in vitro virulence-associated properties(CR 100%, CD 100%, AAG 82.6%, CV 58.3%) disappeared but also 220 Kdalton OMP(100%) was not produced. These results indicate that the positive CRMOX reaction is plasmid-mediated and the CRMOX test is potential as an in vitro virulence tests with Y enterocolitica.
The present study was conducted to investigate the antibiotic resistance of 24 Salmonella gallinarum isolated from 48 chicken samples of diagnosed fowl typhoid cases during the period from November 1998 to November 1999. And the isolates of S gallinarum were also tested for their invasion abilities to experimental infection as one of virulence tests, and the presence of virulence-related plasmid in S gallinarum isolates. The results obtained through this study were summarized as follows; 1. All of isolates from 48 cases of 24 farms were identified S gallinarum by biochemical and serological tests.2. Antimicrobial drug resistance test against 24 isolates showed that the isolates were resistant to Colistin(95.8%), and Penicillin(79.2%), Polymyxin B(75.0%), Streptomycin (65.2%), Gentamycin(54.2%), and Tetracycline(33.3%). 3. Mortality in chicken following peroral inoculation of four isolates of S gallinarum during 14-days inoculation pecked at 5 days(40%) after inoculation and all of experimental chickens died within 13 days after inoculation.4. Based on the pattern and number of isolated plasmid from each isolate, plasmid profiles were divided into five groups; group I with 3 plasmids, group II to group IV with 4 plasmids and group V with 5 plasmids.
In order to investigate the virulence of Y. enterocolitica isolated in Korea, all necessary experiments were done including several virulence determinating tests-autoagglutination test, calcium-dependency test, HeLa cell invasion test, Sereny test, crystal violet binding test, and electrophoresis for plasmid pattern. The obtained results are as follows: The virulent strains of Y. enterocolitica revealed positive reactions on autoagglutination test, cacium-dependency test, and drystal violet binding test, while the avirulent strains did not. A positive reaction was observed only at $37^{\circ}C$ implying that the expression of virulence is temperature-dependent. In Sereny test, the standard reference virulent strain (serotype 0:8) showed positive reactions while the virylent experimental strains (serotype 1:3, 0:9) revealed negative results, which indicates that the virulence of Y. enterocolitica in experimental animals varied according to their serotypes. Most of the virulent strains contained 36-38Mdal plasmids, but the avirulent strains did not. In addition, it was noted that autoagglutination, calcium-dependency, and crystal violet binding were related to the presence of plasmids.
Nine strains of Yersinia species isolated from pigs and dogs in Korea, comprising 5 strains of Yersinia enterocolitica, 2 strains of Y kristensenii and each strain of Y pseudotuberculosis and Y intermedia, were examined for the presence of virulence-associated plasmids, calcium dependency and provocation of guinea pig conjuntivitis($Ser{\acute{e}}ny$ test). Three strains of Y enterocolitica isolated from pigs were positive in calcium dependency and harbored one plasmid of about 45 megadalton, but negative in $Ser{\acute{e}}ny$ test.
Kim, Won-yong;Chang, Young-hyo;Park, Kyoung-yoon;Kim, Chul-joong;Shin, Kwang-soon;Park, Yong-ha
Korean Journal of Veterinary Research
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v.35
no.3
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pp.537-542
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1995
In this study, we aim to find the presence of virulence-related plasmid in Salmonella isolates from poultry, and the difference between S pullorum and S gallinarum on the plasmid profile and antibiotics resistance. We used seventeen isolates of Salmonella spp that were isolated from poultry. Thirteen isolates, S typhimurium(ST), S pullorum(SP) and S gallinarum(SG), contained virulence-related plasmids. These are 95Kd plasmid in ST and 85Kd plasmid in SP and SG. Three(1/4 of ST, 1/1 of SE, and 1/9 of SP) isolates have no detectable plasmids. The isolates of ST have relatively variable plasmid profile but the isolates of S pullorum except No 12(additional 3.0Kb plasmid) have common 85K6, 8.1Kb, 4.0Kb and 2.3Kb plasmid and two of three isolates of S gallinarum have common 85Kb, 4.0Kb and 2.3Kb plasmid but the rest has only 85Kb plasmid. Interestingly, all of the isolates of SP have 8.1Kb plasmid, and same size of plasmid is also found in one of ST isolates. All of the isolates have the resistance to penicillin, chloramphenicol, rifampicin, streptomycin, sulfamethazine and some isolates show the resistance to ampicillin and tetracycline. There is no relatedness between plasmid profile and antibiotics resistance and no differences between SP and SG in antibiotics resistance. Therefore further differentiation of each isolates by restriction enzyme assay and, if possible, charaterization of each plasmid, especially, 8.1Kb plasmid in SP and ST, may be necessary.
The chromosomal DNA of Agrobacterium tumefaciens contains the genes required for bacterial attachment to plant cell which is an essential atage in crown gall tumorigenesis by Ti-plasmid. In order to clone the genes, Agrobacterium tumefaciens strain A5512 was mutagenized by transposon Tn5 and two Agrobacterium tumefaciens mutants which are attachment-defective and nontumorigenic were isolated. From one of the two mutants, a chromosomal virulence region which was required for attachment to the plant cells was cloned.
At the present study, it was aimed to explore the molecular genetic characterization of multiple antimicrobial resistant Salmonella spp. isolates from pigs and cattle. A total of 138 Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium) isolates were typed with phage, among them, 83.3% of S. Typhimurium tested could divide into a 10 phage types. Definitive type 193 (DT193) (25.4%) and DT195 (24.6%) were exhibited as the dominant types. DT104 and U302 were found from pigs and cattle. On the other hand, S. Enteritidis had 6 phage types, of them, phage type 21 (PT21) and PT11b were the popular types. In the plasmid profiles, 135 of S. Typhimurium isolates were exhibited 1 to 6 plasmid bands which molecular weight ranged from 90 to 2kb. 35 isolates (25.4%) harbored a 90kb plasmid which is thought to be the serotype specific virulence plasmid. Two of twenty five S. Enteritidis had common plasmids at 2 and 1.5kb. With multiplex polymerase chain reaction, virulence genes (invA and spvC) were detected from all Salmonella spp. from 167 of S. Typhimurium, S. Enteritidis and chloramphenicol resistant S. Schwarzengrund, but some drug resistant genes, such as PSE-1, cml/tetR and flo were not determined but other drug resistant genes, for example TEM and int were found. The detection rates of spvC, TEM and int gene was 35.3%, 29.3% and 72.5%, respectively. The TEM gene was highly popular in S. Typhimurium, which was detected from ampicillin and amoxicillin resistant strains as 95.9%. int gene was able to detect from all the isolates identified as multidrug resistsnt (MDR), particularly DT193 was thought as the most prevalent virulence and multidrug resistance isolate. The major plasmid profile and drug resistance pattern of DT193 were 90, 40, 10.5, 6.3, 3.0kb and ACCbDNaPSSuT, respectively. MDR was commonly found in other phage types, particularly DT104, U302 and DT203.
Kim, Eunsuk;Park, Soyeon;Cho, Seongbeom;Hahn, Tae-Wook;Yoon, Hyunjin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.6
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pp.962-972
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2019
Non-typhoidal Salmonella (NTS) is one of the most frequent causes of bacterial foodborne illnesses. Considering that the main reservoir of NTS is the intestinal tract of livestock, foods of animal origin are regarded as the main vehicles of Salmonella infection. In particular, poultry colonized with Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium), a dominant serotype responsible for human infections, do not exhibit overt signs and symptoms, thereby posing a potential health risk to humans. In this study, comparative genomics approaches were applied to two S. Typhimurium strains, ST1539 and ST1120, isolated from a duck slaughterhouse and a pig farm, respectively, to characterize their virulence and antimicrobial resistance-associated genomic determinants. ST1539 containing a chromosome (4,905,039 bp; 4,403 CDSs) and a plasmid (93,876 bp; 96 CDSs) was phylogenetically distinct from other S. Typhimurium strains such as ST1120 and LT2. Compared to the ST1120 genome (previously deposited in GenBank; CP021909.1 and CP021910.1), ST1539 possesses more virulence determinants, including ST64B prophage, plasmid spv operon encoding virulence factors, genes encoding SseJ effector, Rck invasin, and biofilm-forming factors (bcf operon and pefAB). In accordance with the in silico prediction, ST1539 exhibited higher cytotoxicity against epithelial cells, better survival inside macrophage cells, and faster mice-killing activity than ST1120. However, ST1539 showed less resistance against antibiotics than ST1120, which may be attributed to the multiple resistanceassociated genes in the ST1120 chromosome. The accumulation of comparative genomics data on S. Typhimurium isolates from livestock would enrich our understanding of strategies Salmonella employs to adapt to diverse host animals.
Journal of the Korea Institute of Information and Communication Engineering
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v.15
no.4
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pp.1000-1006
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2011
We examined the effects of various phenolic compounds, Ti plasmids(octopine, nopaline) and A. tumefaciens on the vir gene expression. Nine phenolic compounds were tested using 3 types of Ti plasmid and 3 strains of A. tumefaciens on the vir gene expression. It was also investigated how the levels of vir gene expression could be related to specific phenolic compounds. Six phenolic compounds as 4-hydroxyacetophenone, phenol, catechol, resorcinol, acetosyringone and vanillin had exhibited a strong effect on the vir gene expression of A. tumefaciens MW107 containing nopaline Ti plasmid. The vir genes of A. tumefaciens MW105 and MW108 containing octopine Ti plasmids were remarkably stimulated only by acetosyringone. Thus, it appeared that the vir gene inducing abilities were differed by the kinds of phenolic compounds, A. tumefaciens and Ti plasmids.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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