Kim, Won-Il;Cho, Yong-Il;Kang, Seog-Jin;Hur, Tai-Young;Jung, Young-Hun;Kim, Nam-Soo
Journal of Veterinary Clinics
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v.29
no.5
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pp.377-383
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2012
Bovine diarrhea is a major economical burden to the bovine industry in Korea. Since multiple infectious agents can be involved in bovine diarrhea, differential diagnosis is essential for effective treatment. Therefore, a panel of two multiplex real-time PCR assays which can simultaneously detect six major bovine enteric pathogens [i.e., bovine viral diarrhea virus (BVDV), bovine coronavirus (BCoV), group A bovine rotavirus (BRV), Salmonella spp., Escherichia coli (E. coli) $K99^+$, and Cryptosporidium parvum] was developed and applied to test 97 fecal samples collected from cattle farms in Korea. In addition, microscopic examination was also preformed on the samples to detect Coccidium oocyst. The estimated sensitivity of the multiplex PCR was 0.1 $TCID_{50}$ for BVDV, BCoV and group A BRV, 5 and 0.5 CFU for E. coli $K99^+$ and Salmonella, respectively, and 50 oocysts for Cryptosporidium. The amplification efficiency of the multiplex PCR ranged between 0.97 and 0.99 for each pathogen. Among 97 samples, 36 samples were positive for at least one of the 6 major pathogens and 6 samples were simultaneously positive for 2 pathogens by the multiplex PCR assay. Coccidium oocysts were also detected in 48 samples, which were all collected from over 1 month old calves. In conclusion, the multiplex real-time PCR panel can be a useful tool for fast and accurate diagnosis of calf diarrhea associated with BVDV, BCoV, group A BRV, E. coli $K99^+$, Salmonella, and/or Cryptosporidium and Coccidium may be an important target which needs to be included in the multiplex PCR panel in the future.
Yun, Byung Ho;Lee, Hee Chul;Chun, Jung Mi;Yoon, So Young;Lee, Woo Gill;Shin, Son Moon
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.48
no.7
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pp.723-730
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2005
Purpose : This study was performed to characterize the etiology and clinical features of acute viral lower-respiratory tract infections(LRI). Methods : Etiologic agents and clinical features of acute viral LRI were studied from October. 2003 through March. 2004 in hospitalized children with LRI(253 cases) at Samsung Cheil Hospital. The viruses were identified by indirect immunofluorescent method. Medical records of patients with proven viral LRI were reviewed retrospectively. Results : Ninety two cases(36.4%) were confirmed as viral infections. The identified pathogens were respiratory syncytial virus(RSV, 76.0%), adenovirus(ADV, 12.0%), influenza virus type A(INFA, 9.8 %), influenza virus type B(INFB, 1.1%) and parainfluenza virus(PIV, 1.1%). Eight four point eight% of patients were younger than 2 years of age. Clinical diagnosis of LRI were pneumonia(56.5%), bronchiolitis(35.9%), tracheobronchitis(4.3%) and croup(3.3%). The clinical symptoms and signs were cough(98.8%), rhinorrhea(82.6%), fever(70.7%), rale(67.4%), wheezing(29.3%), chest retraction(28.3%) and cyanosis(4.3%). The severe respiratory symptoms and signs were more common in RSV-infected patients, even cyanosis could be observed. Seventeen point four percent of patient had fever of $38.5^{\circ}C$ or higher and their most common etiologic agent was INFA(66.7%). Twenty three point nine percent had fever more than 5 days and common etiologic agent was INFA(77.8%). The elevated WBC count($>14{\times}10^3/{\mu}L$) was in 14.1%, and common etiologic agents were INFA(22.2%) and ADV(18.2%). C-reactive protein(CRP >4.0 mg/dL) was increased in 13.0%, and common in ADV(63.6 %). Increased aspartate aminotransferase(AST)/alanine aminotransferase(ALT) was detected in 10.9%, and the most common etiologic agent was RSV(12.9%). Conclusion : The common agents of acute viral LRI were RSV, ADV and INF, respectively. Because the etiologic agents present variable clinical features, it may be helpful to treat and to evaluate acute viral LRI that we should understand their etiologic variability.
Biologics and medical devices manufactured with bovine-derived raw materials have the risk of viral contamination. Therefore, viral validation study is essential to ensure the safety of the products. Bovine adenovirus type-1 (BAdV-1) is one of the common bovine viral pathogens. For quantitative detection of BAdV-1 during the manufacture of biologics and medical devices, a TaqMan probe real-time PCR method was developed. Specific primers and TaqMan probe for amplifying and detecting BAdV-1 DNA were designed. Specificity, limit of detection (LOD), and robustness of the method was validated according to international guideline on the validation of nucleic acid amplification tests for the pathogen detection. The sensitivity of the assay was found to be $7.44{\times}10^1\;TCID_{50}/ml$. The real-time PCR method was reproducible, very specific to BAdV-1, and robust. Moreover, the method was successfully applied to the validation of Chinese Hamster Ovary (CHO)-K1 cells artificially infected with BAdV-1, a commercial CHO master bank, and bovine type 1 collagen. The overall results indicate that this rapid, specific, sensitive, and robust assay can be reliably used for quantitative detection of BAdV-1 contamination during the manufacture of biologics and medical devices using bovine-derived raw materials.
Viral, bacterial, and fungal infection can be transmitted from donor to recipient via transplantation of human amniotic membrane. Therefore human amniotic membrane for transplantation should be disinfected and sterilized before use. The purpose of this study was to examine the efficacy of the disinfection process and sterilization processes used at human tissue bank in the inactivation of viruses, bacteria, and fungi. A variety of experimental model viruses, bacteria, and fungus for human pathogens, including the human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), bovine herpes virus (BHV), bovine viral diarrhoea virus (BVDV), hepatitis A virus (HAV), porcine parvovirus (PPV), Escherichia coli, Bacillus subtilis, and Candida albicans were all selected for this study. Enveloped viruses such as HIV-1, BHV, and BVDV were effectively inactivated to undetectable levels by 70% ethanol treatment, gamma irradiation process, and ethylene oxide (EO) gas sterilization process. Also non-enveloped viruses such as HAV and PPV were effectively inactivated to undetectable levels by gamma irradiation and EO gas treatment. However HAV and PPV showed high resistance to 70% ethanol treatment. E. coli and C. albicans were effectively inactivated to undetectable levels by 70% ethanol treatment, gamma irradiation process, and EO gas treatment. Also B. subtilis was effectively inactivated to undetectable levels by gamma irradiation process and EO gas treatment. However it showed high resistance to 70% ethanol treatment.
Kim, Seonjeong;Kim, Yewon;Kim, Ju Won;Hwang, Yu-bin;Kim, Seong Hyeon;Jang, Yo Han
Journal of Life Science
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v.32
no.5
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pp.375-390
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2022
Influenza viruses are zoonotic respiratory pathogens, and influenza infections have caused a substantial burden on public health systems and the livestock industry. Although currently approved seasonal influenza vaccines have shown potent protection efficacy against antigenically well-matched strains, there are considerable unmet needs for the efficient control of viral infections. Enormous efforts have been made to develop broadly protective universal influenza vaccines to tackle the huge levels of genetic diversity and variability of influenza viruses. In addition, antiviral drugs have been considered important interventions for the treatment of viral infections. The viral neuraminidase inhibitor oseltamivir is the most widely used antiviral medication to treat influenza A and influenza B viruses. However, unsatisfactory clinical outcomes resulting from side effects and the emergence of resistant variants have led to greater attention being paid to plants as a natural resource for anti-influenza drugs. In particular, the recent COVID-19 pandemic has underpinned the need for safe and effective antiviral drugs with a broad spectrum of antiviral activity to prevent the rapid spread of viruses among humans. This review outlines the results of the antiviral activities of various natural products isolated from plants against influenza viruses. Special focus is paid to the virucidal effects and the immune-enhancing effects of antiviral natural products, since the products have broad applications as inactivating agents for the preparation of inactivated vaccines and vaccine adjuvants.
The prevalence of major calf disease was investigated in 117 Holstein dairy calves in Chonnam area. All of them were moved in the College experimental farm which is operated in intensive units. clinical signs were daily examined throughout two months after the introduction of the College farm. Among calves, 92 cases(78.6%) died in the two months after the introduction in it. Outbreaks of respiratory and alimentary diseases were their main causes of their fatality. The incidence of respiratory disorders during the full period of the experiment was up to 42.8%, and the alimentary diseases were occurred 35.9% of the herd. Most of the mortality was related with respiratory(59.9%) and alimentary(52.1%) pathogens. Also calf mortality by combined infection claimed 6.6% among 100 morbidity cases. Principle pathogens to cause mortality were Pasteurella spp(44.4%), E coli(29.9%), bovine viral diarrhea virus(16.2%), IBRV(12.0%), respectively. Viruses also played as an important role in increasing calf morbidity to secondary respiratory bacterial pathogens. Pasteurella infection combined with infectious bovine rhinotracheitis virus(11 cases), parainfluenza virus type-3(9 cases), or bovine respiratory syncytial virus(7 cases) was appeared as major pattern to mortality. colibacillosis in causing enteritis was concurrently infected with BVD(19 cases), bovine coronavirus infection(14 cases), salmonellosis(5 cases), coccidiosis(5 cases) and clostridial infection(4 cases). Ninty-two cases to death were appeared to have 100% neutralizing antibodies to BCV; Among them, 73.8% had the neutralizing antibody level higher than 64. Calves with neutralizing antibodies higher than 16 to BVDV were 50%. The cases with neutralizing antibody level lower than 8 to BEFV were 89.4% that means the necessity of appropriate vaccination.
In the event of an outbreak of a livestock epidemic, it has been considered that the existing burial-centered carcass disposal method should be improved ecofriendly for prevention of leachate and odors from burial basically in regard of pathogen inactivation. Therefore, the aim of this study is whether it was possible to treat the carcass of cattle and chickens using the chemical carcass treatment method. It was conducted to establish detailed treatment standards for the chemical treatment method of cattle and chicken carcasses based on the results of the proof of the absence of infectious diseases in cattle chickens. After inoculating cattle carcass with 10 pathogens (foot and mouth disease virus, bovine viral diarrhea virus, Mycobacterium bovis, Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis, Brucella abortus, Bacillus anthracis, Clostridium chauvoei, Clostridium perfringens, Escherichia coli, and Salmonella Typhimurium) and chicken carcasses with low pathogenic avian influenza virus, Clostridium perfringens type C, E. coli and Salmonella Typhimurium, these were treated at 90℃ for 5 hours in a potassium hydroxide liquid solution corresponding to 15% of the body weight. This method liquefies all cadaveric components and inactivates all inoculated pathogens by PCR and culture. Based on these results, it was possible to prove that chemical treatment of cattle and chicken carcasses is effective in killing pathogens and is a safe method without the risk of disease transmission. The chemical treatment method of livestock carcasses can be suggested as an alternative to the current domestic burial-centered livestock carcass treatment method, preventing environmental pollution, and contributing to public health.
In order to detect quarantine plant viruses, we developed reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) primer pairs for five single-stranded (ss) plant RNA viruses that are not currently reported in Korea but could be potential harmful plant viral pathogens. Three viruses such as Chilli veinal mottle virus (ChiVMV), Colombian datura virus (CDV), and Tobacco etch virus (TEV) belong to the genus Potyvirus while Chrysanthemum stem necrosis virus (CSNV) and Iris yellow spot virus (IYSV) are members of the genus Tospovirus. To design RT-PCR primers, we used reported gene sequences corresponding to the capsid protein and polyprotein for ChiVMV, CDV, and TEV while using nucleocapsid protein regions for CSNV and IYSV. At least two different primer pairs were designed for each virus. Fifteen out of 16 primer pairs were successfully applied in detection of individual quarantine virus with high specificity and efficiency. Taken together, this study provides a rapid and useful protocol for detection of five quarantine viruses.
Fish pathology is one of the main scientific bases upon which this expansion in aquaculture has been dependent and requires a wide knowledge of the environmental constraints, the physiology and characteristic of the various pathogens, the responses of the host, and the methods by which they may be controlled. The primary disease and parasite problems in aquaculture animals related to viral, bacteria, fungal and protozoan epizootics. Parasitic nematodes, trematodes and cestodes are commonly found in aquaculture animals, but seldom are they present in concentrations sufficient to cause significant problems, When an epizootic does occur and chemical treatment is indicated, the appropriate chemical must be selected an properly applied. We have antibiotics, sulfa, nitrofuran and other chemicals for treatment of fish diseases, Some may be mixed with the feed during formulation, added to the pellets of feed as a surface coating, given in the form of an injection or used as a bath. Even though a drug or chemical has been officially approved for use in aquaculture, the substance should never be used unless there is a clear need, Some of the reasions for this view are as follows: (1) the constant use of antibiotics can leak to the development of resistant strains of bacteria, (2) biofilter efficiency may be impaired or destroyed by chemicals added to closed recirculating water systems, and(3) the injudicious use of chemical can have a damaging effect on the environment as well as on human.
Three cats with 2 weeks to 1 month history of drooling, halitosis, difficulty eating and pain on opening the mouth were presented to local animal hospitals. On physical examination, the gingiva was swollen, bright red and very painful with bilaterally symmetric pattern. Surgically excised abnormal gingival biopsy samples were requested for diagnosis. Histopathologically, gingival epithelium showed severe hyperplasia and ballooning degeneration. Moderate to severe infiltration of lymphocytes and plasma cells were presented in lamina propria. Immunohistochemically, inflammatory cells of the samples demonstrated major positive reactions for T lymphocytes. But some plasma cells also presented. According to polymerase chain reaction, tissues samples were negative for four kinds of feline viral pathogens. Based on the clinical, gross, histopathologic findings, these three cases were diagnosed as lymphoplasmacytic gingivitis in cats. In our best knowledge, this is the first case report in Korea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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